Լիպոսոմներ հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդի միջոցով, օգտագործելով Sonication

Լիպոսոմները բազմակողմանի նանոկրիչներ են, որոնք օգտագործվում են դեղերի առաքման մեջ՝ շնորհիվ իրենց կենսահամատեղելիության և ինչպես հիդրոֆիլ, այնպես էլ հիդրոֆոբ դեղամիջոցները պարուրելու ունակության: Հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդը (նաև հայտնի է որպես էմուլսացման մեթոդ կամ լուծիչ-գոլորշիացման մեթոդ) լիպոսոմների պատրաստման նշանավոր տեխնիկա է, որն առաջարկում է պարկուճավորման բարձր արդյունավետություն: Այս հոդվածը կենտրոնանում է լիպոսոմների պատրաստման վրա հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդի միջոցով, որը ուժեղացված է զոնդային տիպի sonication-ով, ընդգծելով ընթացակարգային քայլերը, առավելությունները և հնարավոր կիրառությունները դեղերի առաքման համակարգերում:

Լիպոսոմները վեզիկուլյար կառուցվածքներ են, որոնք բաղկացած են մեկ կամ մի քանի լիպիդային երկշերտից, որոնք կարող են պարփակել հիդրոֆիլ և հիդրոֆոբ միացությունները։ Նրանց յուրահատուկ կառուցվածքը նրանց դարձնում է իդեալական դեղորայքի նպատակային առաքման համար: Հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդը (aka emulsification կամ լուծիչ-գոլորշիացման մեթոդ) լիպոսոմների պատրաստման լավ հաստատված տեխնիկա է: Հետևյալ պարբերություններում մենք ձեզ ներկայացնում ենք հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդի առավելությունները՝ օգտագործելով զոնդային տիպի sonication, որը հայտնի է բարելավելու էմուլսացումը, պարկուճավորման արդյունավետությունը և լիպոսոմային չափի կրճատումը:

Հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդով լիպոսոմների պատրաստման մեթոդիկա

Լիպոսոմների ձևավորումը հակադարձ գոլորշիացման մեթոդի միջոցով՝ օգտագործելով sonication, ներառում է լիպիդների լուծարումը քլորոֆորմի և մեթանոլի օրգանական լուծիչների խառնուրդում (2:1 վ/վ), ինչը նպաստում է շրջված միցելների ձևավորմանը: Այնուհետև այս խառնուրդին ավելացվում է ջրային բուֆեր: Համակցված լուծույթը հնչյունավորվում է, օրինակ՝ օգտագործելով UP400ST-ի նման զոնդի տիպի sonicator, ջրի մեջ յուղի միկրոէմուլսիա ստեղծելու համար: Օրգանական լուծիչն այնուհետև գոլորշիացվում է պտտվող գոլորշիչի միջոցով, որի արդյունքում առաջանում է մածուցիկ գել, որն ի վերջո փլուզվում է՝ ձևավորելով լիպոսոմներ: Միկրոէմուլսիայի փուչիկների մեծ ջրային միջուկը նպաստում է հիդրոֆիլ մոլեկուլների թակարդմանը, ինչը հանգեցնում է լիպոսոմային գելերի, որոնք ցուցադրում են վերահսկվող թողարկում և լավ ներթափանցման պրոֆիլ: Վերջապես, լիպոսոմները կրճատվում են միատարր չափի, օգտագործելով sonicator:

Լիպոսոմների ձևավորում հակադարձ գոլորշիացման մեթոդի միջոցով՝ օգտագործելով Sonication

Արձանագրություն / Քայլ առ քայլ հրահանգներ.

1. Քաշեք և լուծեք լիպիդները.
   Ճշգրիտ կշռեք ընդհանուր 40 մգ L-α-ֆոսֆատիդիլքոլին և խոլեստերին՝ 4:1 կամ 7:3 զանգվածային հարաբերակցությամբ:
   Կշռված լիպիդները լուծեք 10 մլ քլորոֆորմ/մեթանոլ խառնուրդի մեջ (4:1 վ/վ) կլոր հատակով կոլբայի մեջ:
2. Լիպիդային ֆիլմի ձև.
   Կլոր հատակով կոլբը ամրացրեք պտտվող գոլորշիչին:
   Կոլբը պտտել 8 xg 40°C ջերմաստիճանում վակուումային պայմաններում, մինչև կոլբայի պատերի վրա ձևավորվի բարակ լիպիդային թաղանթ:
3. Հեռացնել լուծիչի գոլորշիները.
   Տարհանեք լուծիչների խառնուրդի մնացած գոլորշիները՝ շիշը ազոտ գազով լվանալով:
4. Redissolve Lipid Film:
   Վերլուծեք լիպիդային թաղանթը 10 մլ դիէթիլ եթերի մեջ, որպեսզի ձևավորվեն հակադարձ փուլային վեզիկուլներ:
5. Պատրաստել ջրային փուլը.
   Խառնեք 5 մլ PBS բուֆեր (0,1 Մ, pH 7,4), որը պարունակում է պարկուճի համար ակտիվ բաղադրիչ և 20 մգ Tween 80 օրգանական փուլի հետ (դիէթիլային եթեր՝ լուծված լիպիդներով):
6. Sonicate էմուլսիան.
   Տեղադրեք առանց էմուլսիան սառցե լոգարանում:
   Էմուլսիան արտահոսեցրեք՝ օգտագործելով զոնդային տիպի UP200Ht 26 կՀց հաճախականությամբ և 50% զարկերակային ռեժիմով (0,5 ցիկլ = 30 վայրկյան ON / 30 վրկ անջատում) և 50% ամպլիտուդով 1 րոպեի ընթացքում:
7. Գոլորշիացնել գել ձևավորելու համար.
   Վերադարձրեք ձայնային էմուլսիան պտտվող գոլորշիչին:
   Գոլորշիացնել մթնոլորտային ճնշման տակ 40°C-ում, մինչև գել ստացվի:
8. Ձևավորել լիպոսոմներ.
   Հետագայում գոլորշիացրեք գելը, այն կոտրելով կիսաթափանցիկ հեղուկի մեջ, ինչը ցույց է տալիս լիպոսոմների ձևավորումը:
9. Վերջնական լիպոսոմային կասեցում.
   Լիպոսոմային կախույթին ավելացրեք ևս 5 մլ PBS բուֆեր (0,1 Մ, pH 7,4):
   Նրբորեն խառնեք խառնուրդը:
   Դիէթիլ եթերի մնացած գոլորշիները տարհանեք ազոտի միջոցով:
10. Պահպանում:
    Պահպանեք վերջնական լիպոսոմի կախոցը 4°C ջերմաստիճանում սառնարանում, մինչև պահանջվի:

Այս հրահանգները ուրվագծում են լիպոսոմների պատրաստման քայլ առ քայլ գործընթացը՝ օգտագործելով հակափուլային գոլորշիացման մեթոդը՝ ուլտրաձայնային հոմոգենիզացիայի միջոցով՝ ապահովելով ներքին ջրային բարձր բեռնում և ակտիվ բաղադրիչի արդյունավետ պարկուճ:
Հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդը, մասնավորապես, օգտագործելով զոնդային տիպի sonication, լայնորեն ընդունված տեխնիկա է լիպոսոմների պատրաստման համար, հատկապես, երբ նպատակաուղղված է բարձր ներքին ջրային բեռնմանը: Այս մեթոդը ձեռնտու է ավանդական բարակ թաղանթով հիդրատացման մեթոդի նկատմամբ՝ շնորհիվ լիպոսոմների մեջ ավելի մեծ քանակությամբ ջրային փուլ ներառելու ունակության:

Probe-Type Sonication-ի առավելությունները լիպոսոմների ձևավորման համար

• Ընդլայնված միատարրություն. Զոնդի տիպի sonication ապահովում է հետևողական էներգիայի ներդրում, ինչը հանգեցնում է լիպոսոմների չափերի ավելի միասնական բաշխման:
• Բարելավված էկապսուլյացիա. Մեխանիկական ուժերը ձայնագրման ընթացքում ուժեղացնում են թմրամիջոցների պարկուճը, հատկապես հիդրոֆիլ միացությունների համար:
• Մասշտաբայնություն: Մեթոդները հեշտությամբ ընդլայնելի են՝ դրանք դարձնելով պիտանի լիպոսոմների լայնածավալ արտադրության համար:

Լիպոսոմների կիրառությունները դեղերի առաքման մեջ

Լիպոսոմները, որոնք պատրաստված են էմուլգացիայի և լուծիչ-գոլորշիացման մեթոդներով, զոնդային տիպի sonication-ով, հարմար են տարբեր դեղամիջոցների առաքման համար, ներառյալ.

1. Թմրամիջոցների նպատակային առաքում. Լիպոսոմների ֆունկցիոնալացումը հատուկ լիգանդներով թույլ է տալիս նպատակային առաքում կատարել որոշակի հյուսվածքներ կամ բջիջներ:
2. Վերահսկվող թողարկում. Լիպիդային երկշերտ կառուցվածքը թույլ է տալիս թմրամիջոցների վերահսկվող թողարկումը՝ բարձրացնելով թերապևտիկ արդյունավետությունը:
3. Բազմակողմանիություն: Այս մեթոդները ներառում են թերապևտիկ նյութերի լայն շրջանակ՝ փոքր մոլեկուլներից մինչև ավելի մեծ կենսամոլեկուլներ, ինչպիսիք են սպիտակուցները և նուկլեինաթթուները:

Հակառակ փուլային գոլորշիացման մեթոդը հատկապես հայտնի է իր ներքին ջրային ավելի բարձր բեռնվածությամբ՝ համեմատած բարակ թաղանթի խոնավացման մեթոդի հետ: Այս հատկանիշը օգտակար է այն ծրագրերի համար, որոնք պահանջում են հիդրոֆիլ դեղամիջոցների կամ այլ թերապևտիկ միջոցների էական ինկապսուլյացիա:
Հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդը՝ օգտագործելով զոնդի տիպի sonication, ամուր և արդյունավետ տեխնիկա է լիպոսոմների պատրաստման համար: Ներքին ջրային ավելի բարձր բեռնվածության հասնելու նրա կարողությունը այն դարձնում է նախընտրելի մեթոդ դեղագործական կիրառություններում, որտեղ հիդրոֆիլ նյութերի ինկապսուլյացիան առավելագույնի հասցնելը կարևոր է: Լուծիչների գոլորշիացման մանրակրկիտ վերահսկումը և ձայնային արտանետման օգտագործումը այս մեթոդի հաջողության բանալին են, ինչը հանգեցնում է տարբեր թերապևտիկ նպատակների համար հարմար բարձրորակ լիպոսոմների արտադրությանը:

Գտեք ճիշտ Sonicator ձեր լիպոսոմային արտադրության համար

Hielscher Ultrasonics-ն առաջարկում է զոնդային տիպի sonicators-ի արտադրանքի լայն տեսականի լիպոսոմների արդյունավետ արտադրության համար, ինչը հանգեցնում է բիոակտիվ մոլեկուլների բարձր ծուղակային արդյունավետության և բարձր բեռնման հզորության:
Դուք կարող եք օգտագործել Hielscher sonicators լիպոսոմների պատրաստման տարբեր ուղիների համար, ինչպիսիք են այստեղ նկարագրված հակափուլային գոլորշիացման տեխնիկան, էմուլսացման մեթոդը և բարակ թաղանթի մեթոդը:
Կարդացեք ավելին ուլտրաձայնային լիպոսոմի պատրաստման մասին բարակ թաղանթով:
Կարդացեք ավելին ուլտրաձայնային եղանակով պատրաստված լիպոսոմների պարուրման մասին

• վիտամին C
• DHA և EPA (ձկան յուղ)
• ալիցին

Դիզայն, արտադրություն և խորհրդատվություն – Որակյալ Արտադրված է Գերմանիայում

Hielscher ուլտրաձայնային սարքերը հայտնի են իրենց բարձր որակի և դիզայնի չափանիշներով: Հզորությունը և հեշտ շահագործումը թույլ են տալիս մեր ուլտրաձայնային սարքերի սահուն ինտեգրումը արդյունաբերական օբյեկտներում: Կոպիտ պայմանները և պահանջկոտ միջավայրերը հեշտությամբ կառավարվում են Hielscher ուլտրաձայնային սարքերի կողմից:

Hielscher Ultrasonics-ը ISO սերտիֆիկացված ընկերություն է և հատուկ շեշտադրում է կատարում բարձր արդյունավետության ուլտրաձայնային սարքերի վրա, որոնք բնութագրվում են ժամանակակից տեխնոլոգիաներով և օգտագործողների համար հարմարավետությամբ: Իհարկե, Hielscher ուլտրաձայնային սարքերը համապատասխանում են ԵԽ-ին և համապատասխանում են UL, CSA և RoH-ների պահանջներին:

Ստորև բերված աղյուսակը ցույց է տալիս մեր ուլտրաձայնային սարքերի մոտավոր մշակման հզորությունը.