Novi sonikatori za mikroploče za razbijanje tvrdokornih biofilmova
, Kathrin Hielscher, objavljeno u rubrici Novosti tvrtke Hielscher
Biofilmovi – guste mikrobne zajednice koje prianjaju uz površine – među najtežim su izazovima u mikrobiologiji i kliničkoj dijagnostici. Novi sonikator za mikroploče UIP400MTP olakšava pripremu velikog broja uzoraka. Analize recenziranih istraživanja pokazuju da ultrazvučni sustavi visokih performansi, poput sonikatora za ploče s više jažica tvrtke Hielscher, postaju ključni laboratorijski alati za odvajanje tih tvrdokornih struktura s ploča MBEC™, omogućujući preciznije ispitivanje antimikrobnog djelovanja i brže istraživačke radne postupke.
Odvajanje biofilma sonikacijom
Znanstvenici se sve više oslanjaju na sonikaciju ploča s više jažica jer biofilmovi mogu biti stotinama puta otporniji na antibiotike od slobodno plutajućih planktonskih bakterija, prema dvama važnim istraživanjima biofilmova bakterije Staphylococcus aureus, koagulaza-negativnih stafilokoka i bakterije Staphylococcus saprophyticus. Kada su uklopljeni u matriks biofilma, ti mikroorganizmi pokazuju izrazito povišene minimalne inhibitorne koncentracije (MIC) i minimalne baktericidne koncentracije (MBC), koje često premašuju klinički dostižne koncentracije lijekova.
No učinkovito ispitivanje započinje učinkovitim i pouzdanim odvajanjem stanica biofilma – i upravo se tu UIP400MTP ističe.
Odvajanje adherentnih staničnih kultura s bilo koje standardne mikroploče: priprema velikog broja uzoraka sonikatorom UIP400MTP
Biofilmovi: skriveni štit protiv antibiotika
U obama navedenim istraživanjima istraživači su zabilježili izrazita povećanja antimikrobne rezistencije kada su bakterije ispitivane u obliku biofilma:
Vrijednosti MIC-a povećale su se 2 do 32 puta, a ponekad i više, u usporedbi s planktonskim stanicama.
Određeni izolati prešli su iz stanja osjetljivosti na antibiotike u stanje potpune otpornosti nakon što su se našli u biofilmu.
Za neke biofilmove bile su potrebne vrijednosti MBC-a koje su premašivale najviše ispitane koncentracije, što ističe njihovu iznimnu toleranciju.
Ti nalazi naglašavaju zašto je razbijanje biofilmova ključno: precizno određivanje profila otpornosti na lijekove ovisi o oslobađanju stanica iz zaštitnog matriksa kako bi se mogle pojedinačno ispitati.
Rješenje: sonikator za mikroploče UIP400MTP
U obama istraživanjima upotrijebljen je sonikator za ploče s više jažica UIP250MTP tvrtke Hielscher za odvajanje biofilmova uzgojenih na specijaliziranim uređajima MBEC™ s poklopcima s klinovima. Sonikacija ploče s više jažica tijekom 5 minuta uspješno je odvojila stanice biofilma u svježi medij, omogućujući istraživačima mjerenje MICB i MBCB uz visoku reproducibilnost.
Ta je tehnika široko prihvaćena jer:
- Istodobno i ravnomjerno obrađuje sve jažice, što je ključno za usporedno ispitivanje antimikrobnog djelovanja.
- Akustična kavitacija učinkovito razbija izvanstanični matriks bez uništavanja stanica.
- Besprijekorno funkcionira s platformama MBEC s poklopcima s klinovima koje se upotrebljavaju u istraživanju otpornosti biofilmova.
Ključne značajke koje će odmah uvjeriti istraživače
- 400 vata ultrazvučne snage (20 kHz) za brzo i temeljito odvajanje biofilma
- Potpuna kontrola parametara, uključujući unos energije (Ws/mL), amplitudu, temperaturu i vrijeme
- Ugrađeni izmjenjivač topline s recirkulacijskom pumpom za održavanje ploča hladnima tijekom sonikacije
- Programabilni načini rada za ponovljive, automatizirane radne postupke
- Ravnomjerna sonikacija po cijelim pločama. Pogledajte videozapis u nastavku!
Ispitivanje ravnomjernosti vizualno potvrđuje homogeno kavitacijsko polje potrebno za standardizirano razaranje biofilma – poznat izazov kod ultrazvučnih kupelji manje snage.
Sonikator za ploče s više jažica UIP400MTP za učinkovita ispitivanja MBEC
Zašto je to važno za bolnice, laboratorije i razvoj antibiotika
Infekcije povezane s biofilmom – od infekcija mokraćnog sustava do infekcija krvotoka povezanih s kateterom – poznate su po tome što ih je teško liječiti. Istraživanja pokazuju:
- Konvencionalno ispitivanje antibiotika na planktonskim stanicama podcjenjuje otpornost u stvarnim uvjetima.
- Visokokvalitetna sonikacija ključna je za pripremu uzoraka dobivenih iz biofilma koji omogućuju precizno ispitivanje.
- Alati poput uređaja UIP400MTP pomažu premostiti jaz između laboratorijskog ispitivanja i kliničke stvarnosti.
Kako antimikrobna rezistencija nastavlja rasti, tehnologije koje poboljšavaju reproducibilnost i pouzdanost istraživanja biofilmova mogu imati presudnu ulogu u razvoju novih terapija.
Priložena istraživanja nedvojbeno upućuju na jedan zaključak: bakterije koje stvaraju biofilm zahtijevaju nove pristupe ispitivanju, a sonikacija ploča s više jažica – posebice iznimno snažnim ultrazvučnim sustavima s ravnomjerno raspoređenim ultrazvukom, poput uređaja Hielscher UIP400MTP – brzo postaje zlatni standard za odvajanje biofilmova s ploča MBEC.
Za mikrobiološke laboratorije, stručnjake za razvoj lijekova i kliničke istraživače ti uređaji više nisu samo praktična pomagala – postaju neophodni alati za precizno mjerenje stvarne otpornosti na antibiotike patogena uklopljenih u biofilm.
Ovdje pronađite informacije o sonikatoru za ploče s više jažica UIP400MTP!
Dodatna literatura
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.

