THC વિશ્લેષણ માટે અલ્ટ્રાસોનિક નમૂના તૈયારી

• અલ્ટ્રાસોનિક નિષ્કર્ષણ એ THCના ઉત્પાદન માટેની એક પ્રમાણિત પદ્ધતિ છે, પરંતુ તેનો ઉપયોગ વિશ્લેષણાત્મક હેતુઓ માટે પણ કરી શકાય છે.
• કેનાબિસ ઉત્પાદનોમાં THCની કુલ માત્રાના વિશ્લેષણ માટે અલ્ટ્રાસોનિકેશન એ નમૂના તૈયાર કરવાની એક સામાન્ય પદ્ધતિ છે.
• TLC, GC અને HPLC વિશ્લેષણ પહેલાં નમૂનાઓ પર અલ્ટ્રાસોનિક નિષ્કર્ષણ લાગુ કરવામાં આવે છે.

અલ્ટ્રાસોનિક THC નિષ્કર્ષણ

THC, અથવા ટેટ્રાહાઇડ્રોકેનાબિનોલ (delta-9-tetrahydrocannabinol), એ એવું રસાયણ છે જે મારિજુઆનાની મોટાભાગની માનસિક અસરો માટે જવાબદાર છે. કેનાબિસ પ્રજાતિની 400 કરતાં વધુ જુદી જુદી જાતો જાણીતી છે. કેનાબિસની ચોક્કસ જાતના આધારે, કેનાબિસમાં THCની માત્રા 0.3 wt% જેટલી ઓછી હોઈ શકે છે. અન્ય જાતોમાં, THCની માત્રા 20 wt% સુધી પહોંચી શકે છે.
કેનાબિસનાં જુદાં જુદાં ઉત્પાદનોમાં પણ નોંધપાત્ર તફાવત હોય છે: મારિજુઆનામાં THCની સરેરાશ સાંદ્રતા 1 થી 5% વચ્ચે હોય છે; હશીશમાં THCની માત્રા 5 થી 15% વચ્ચે હોય છે અને હશીશ તેલમાં તે સરેરાશ 20% હોય છે. આનંદપ્રમોદ માટે લેવાતા મારિજુઆનાના ડોઝમાં THCની માત્રા ખૂબ જ બદલાતી હોય છે અને મારિજુઆનામાં THCની માત્રા જેટલી ઓછી હોય, ઇચ્છિત અસરો અનુભવવા માટે વપરાશકર્તાએ તેટલું વધુ સેવન કરવું પડે છે.

શક્તિશાળી અલ્ટ્રાસાઉન્ડનો ઉપયોગ (જે સોનિફિકેશન તરીકે પણ ઓળખાય છે) વનસ્પતિ સામગ્રીમાંથી સક્રિય ઘટકોના નિષ્કર્ષણ માટેનું એક પ્રમાણિત સાધન છે. સોનિકેશન દ્વારા THC તેમજ કેનાબિનોઇડ્સ અને ટર્પીન્સ જેવા અન્ય સક્રિય ઘટકોનું સફળતાપૂર્વક નિષ્કર્ષણ કરી શકાય છે. અલ્ટ્રાસોનિક કેનાબિસ નિષ્કર્ષણ વિશે વધુ વાંચવા માટે અહીં ક્લિક કરો!

THCની માત્રાનું વિશ્લેષણ કરવા માટે અલ્ટ્રાસોનિક નમૂના તૈયારીનો ઉપયોગ થાય છે

• આનંદપ્રમોદ માટેનાં THC ઉત્પાદનોના ગુણવત્તા નિયંત્રણ માટે,
• ઔષધીય THC ઉત્પાદનોની ગુણવત્તા નક્કી કરવા માટે,
• માદક ઉપયોગ માટેના હેમ્પ અને રેસા માટેના હેમ્પ વચ્ચે ભેદ પાડવા માટે.

THC વિશ્લેષણ માટે નીચેની ક્રોમેટોગ્રાફિક પદ્ધતિઓનો સામાન્ય રીતે ઉપયોગ થાય છે: પાતળા સ્તરની ક્રોમેટોગ્રાફી (TLC), ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફી (GC) અને ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતાવાળી પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી (HPLC)

TLC વિશ્લેષણ માટે અલ્ટ્રાસોનિક નમૂના તૈયારીનો પ્રોટોકોલ

નમૂના તૈયારી: નમૂનાઓ તૈયાર કરવા માટે, સૂકવેલી વનસ્પતિ સામગ્રીનું મેસરેશન કરવું અને તેને પીસીને સમાનરૂપ ચૂર્ણ બનાવવું આવશ્યક છે. અલ્ટ્રાસોનિક નિષ્કર્ષણ માટે, કેનાબિસ વનસ્પતિનું 500mg ચૂર્ણ અને 5mL મિથેનોલ-ક્લોરોફોર્મ મિશ્રણ (9 : 1ના ગુણોત્તરમાં) એક વાયલમાં ભેળવવામાં આવે છે. સોનિકેશન માટે માઇક્રો ટિપવાળા અલ્ટ્રાસોનિકેટર , VialTweeter અથવા અલ્ટ્રાસોનિક CupHornનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. સોનિકેશનમાં આશરે 5 min. લાગે છે. ત્યારબાદ, નમૂનાને ઓછામાં ઓછા 5 min. માટે સ્થિર રહેવા દો. ઉપરના સ્વચ્છ પ્રવાહીને નિષ્કર્ષણ મિશ્રણથી પાતળું કરો (v/v: 1 : 10). મુક્ત THC: TLC-પ્લેટ પર 1μL
ડિકાર્બોક્સિલેશન: 100μL નિષ્કર્ષને બાષ્પીભવન દ્વારા સંપૂર્ણપણે સૂકવવામાં આવે છે. અવશેષને 180℃ પર 4 min. માટે ગરમ કરવામાં આવે છે. 500μL મિથેનોલ-ક્લોરોફોર્મ (v/v 9 : 1) ઉમેરો. 5 min. માટે સોનિકેશન કરો. ઉપરના સ્વચ્છ પ્રવાહીને નિષ્કર્ષણ મિશ્રણથી પાતળું કરો (v/v: 1 : 10).
કેલિબ્રેશન: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC સિલિકા જેલ F-254, Merck 5729
TLC સ્કેનર II, સોફ્ટવેર CATS3, Camag Muttenz એલ્યુએન્ટ:
ઇથાઇલ એસિટેટ : ટોલ્યુઇન : ક્લોરોફોર્મ = 3 : 17 : 0.25 (v/v/v)
ક્રોમેટોગ્રાફી પછીનું વ્યુત્પન્નીકરણ: 0.1 M NaOHમાં 0.1% ફાસ્ટ બ્લૂ સોલ્ટ
550 nm પર ડેન્સિટોમેટ્રી

GC વિશ્લેષણ માટે અલ્ટ્રાસોનિક નમૂના તૈયારીનો પ્રોટોકોલ

નમૂના તૈયારી: સૂકવેલી વનસ્પતિ સામગ્રીનું મેસરેશન કરવામાં આવે છે અને તેને પીસીને સમાનરૂપ ચૂર્ણ બનાવવામાં આવે છે. નિષ્કર્ષણ માટે, કેનાબિસ વનસ્પતિનું 500mg ચૂર્ણ અને 10mL મિથેનોલ-હેક્સેન મિશ્રણ (9 : 1ના ગુણોત્તરમાં) એક વાયલમાં ભેળવવામાં આવે છે. સોનિકેશન માટે માઇક્રો ટિપવાળા પ્રોબ પ્રકારના અલ્ટ્રાસોનિક ઉપકરણ , VialTweeter અથવા અલ્ટ્રાસોનિક CupHornનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. નમૂનાનું 15–20 min. માટે સોનિકેશન કરો. નમૂનાને હલાવો અને ઓછામાં ઓછા 5 min. માટે સ્થિર રહેવા દો. ઉપરના સ્વચ્છ પ્રવાહીને નિષ્કર્ષણ મિશ્રણથી પાતળું કરો (v/v 1: 20).
ડિકાર્બોક્સિલેશન: ઇન્સર્ટમાં
ઇન્જેક્ટરનું તાપમાન 250℃
કેલિબ્રેશન: 5 ng/μLથી 250 ng/μL
GC: 5973 MSD અને 7683 ઓટોસેમ્પલર સાથે HP 6890; ઇન્જેક્શન: 1μL, સ્પ્લિટલેસ સમય: 2 min.
કૉલમ: HP-5 MS, 30m, વ્યાસ 250 μm, ફિલ્મની જાડાઈ 0.25 μm
વાહક વાયુ: He, 35 psi, અચળ પ્રવાહ દર: 4 mL/min.
ઓવન: 1min. માટે 100℃; 15℃ /min.ના દરે તાપમાન વધારીને 280℃ સુધી; 5 min. માટે 280℃. MSD: SCAN: m/e 35 – 550

HPLC વિશ્લેષણ માટે અલ્ટ્રાસોનિક નમૂના તૈયારીનો પ્રોટોકોલ

નમૂના તૈયારી (GC તૈયારીને અનુરૂપ): સૂકવેલી વનસ્પતિ સામગ્રીનું મેસરેશન કરવામાં આવે છે અને તેને પીસીને સમાનરૂપ ચૂર્ણ બનાવવામાં આવે છે. નિષ્કર્ષણ માટે, કેનાબિસ વનસ્પતિનું 500mg ચૂર્ણ અને 10mL મિથેનોલ-હેક્સેન મિશ્રણ (9 : 1ના ગુણોત્તરમાં) એક વાયલમાં ભેળવવામાં આવે છે. સોનિકેશન માટે માઇક્રો ટિપવાળા પ્રોબ પ્રકારના અલ્ટ્રાસોનિકેટર , VialTweeter અથવા અલ્ટ્રાસોનિક CupHornનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. નમૂનાનું 15–20 min. માટે સોનિકેશન કરો. નમૂનાને હલાવો અને ઓછામાં ઓછા 5 min. માટે સ્થિર રહેવા દો. ઉપરના સ્વચ્છ પ્રવાહીને નિષ્કર્ષણ મિશ્રણથી પાતળું કરો (v/v 1: 20).

HPLC-DAD: Waters 2695 વિભાજન મોડ્યુલ / 2996 PAD ઇન્જેક્શન: 10μL
પ્રીકૉલમ: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
કૉલમ: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
એલ્યુએન્ટ: આઇસોક્રેટિક 36% TEAP 25 mmol/L, 64% એસિટોનાઇટ્રાઇલ; 210nm પર માત્રા નિર્ધારણ
કેલિબ્રેશન: 0.001 – 0.10 μg/μL
કેલિબ્રેશન: 0.01 – 0.50 μg/μL
રિટેન્શન સમય: CBD માટે: 6.2 min.; CBN માટે: 8.0 min.; THC માટે: 9.4 min.; THC-A માટે: 11.0 min
LOD: CBD 0.5%, CBN 0.5%, THC 0.15%, THC-A 1%

VialTweeter એક અનન્ય અલ્ટ્રાસોનિક પ્રણાલી છે, જે પરસ્પર દૂષણ વિના બિલકુલ સમાન પરિસ્થિતિઓમાં એકસાથે 10 જેટલી વાયલનું સોનિકેશન કરે છે.