استخراج بتا گلوکان از قارچ برای ازمایش ازمایشگاهی و یا اهداف تولید شامل ترکیبی از خرد کردن، سنگ زنی و یا خرد کردن قارچ، استخراج التراسونیک کمک، و بارش بتا گلوکان. در اینجا یک طرح ساده از فرایند استخراج بتا گلوکان، همراه با حجم نمونه و وزن برای یک ازمایش در مقیاس ازمایشگاهی است. لطفا توجه داشته باشید که شرایط و اندازه گیری های خاص ممکن است بسته به نوع قارچ و خلوص بتا گلوکان مورد نیاز متفاوت باشد.

مواد و تجهیزات

• 17
• اب مقطر سرد (به عنوان مثال، 500 میلی لیتر)
• بلندر یا چرخ
• لیوان شیشه ای یا فلاسک
• کاغذ فیلتر یا راه اندازی فیلتراسیون خلاء
• سانتریفیوژ (اختیاری)
• الکل (به عنوان مثال اتانول) برای بارش
• یخچال
• خشک کردن فر

پروتکل استخراج بتا گلوکان

1. قارچ ها را خرد یا خرد کنید (به عنوان مثال Chaga یا Lion)’ قارچ یانه) به ذرات درشت تقریبا 1 تا 3 میلی متر. به عنوان مثال، از 100 گرم ذرات قارچ خشک استفاده کنید.
2. سپس ذرات قارچ را به یک لیوان شیشه ای یا فلاسک اضافه کنید.
3. بعد، 500mL اب مقطر را به فنجان حاوی ذرات قارچ که باید استخراج شود اضافه کنید. نسبت اب به قارچ ممکن است بسته به نوع قارچ خاص و اندازه ذرات متفاوت باشد.
4. پس از هم زدن دوغاب، sonicate مخلوط با استفاده از یک هموژنایزر ازمایشگاه اولتراسونیک (به عنوان مثال، UP400St با sonotrode 22mm در دامنه 100٪ و یا UP200Ht با sonotrode 14mm در دامنه 100٪) و حفظ درجه حرارت زیر 90 °C. درجه حرارت پایین تر به حفظ ترکیبات حساس به گرما مانند بتا گلوکان ها در طول استخراج کمک می کند. Sonicate برای حدود. 5 به 10 دقیقه در هنگام استفاده از UP400St و برای 10 به دقیقه در هنگام استفاده از UP200Ht، به ترتیب. لطفا توجه داشته باشید که دما و زمان استخراج می تواند بسته به قدرت مافوق صوت استفاده می شود متفاوت است. البته، حجم بزرگتر نیاز به زمان فراصوت طولانی تر است.
5. فیلتر مخلوط فراصوت داده را از طریق کاغذ فیلتر و یا استفاده از یک راه اندازی فیلتراسیون خلاء برای جدا کردن مایع (حاوی بتا گلوکان استخراج شده) از باقی مانده قارچ جامد.
6. سپس بتا گلوکان ها را از مایع با اضافه کردن الکل (به عنوان مثال اتانول) رسوب دهید. به طور معمول، شما می توانید از 2-3 حجم الکل برای بارش استفاده کنید.
7. پس از ان، مخلوط را برای چند ساعت در یخچال نگهداری کنید تا بتا گلوکان ها رسوب کنند.
8. پس از بارش، می توانید مایع را با دقت تخلیه کنید و رسوب بتا گلوکان را جمع اوری کنید.
9. در نهایت، بتا گلوکان ها را در فر در دمای پایین (به عنوان مثال 40-50 °C) خشک کنید تا تمام الکل برداشته شود و یک پودر خشک دریافت کنید.

قارچ ها تغییراتی در ویژگی های خود نشان می دهند. از این رو، فرایند استخراج بتا گلوکان می تواند بر اساس عواملی مانند گونه های قارچ خاص، وضعیت قارچ (خشک یا تازه)، اندازه ذرات و دمای استخراج متفاوت باشد. برای بهینه سازی روش استخراج خود را، در نظر ازمایش با پارامترهای مختلف، از جمله تغییر نسبت جامد به مایع، تنظیم دما، کاوش حلال های مختلف، و ازمایش مدت زمان فراصوت متنوع و تنظیمات دامنه.

التراسونیک کمک انزیمی استخراج بتا گلوکان

التراسونیک کمک استخراج انزیمی یک روش مورد استفاده برای استخراج بتا گلوکان از قارچ با استفاده از ترکیبی از انزیم ها و امواج مافوق صوت است. این فرایند افزایش بهره وری استخراج با شکستن دیواره های سلولی قارچ و تسهیل انتشار بتا گلوکان.

مقیاس بالا از استخراج بتا گلوکان از قارچ

هنگامی که شما یک پروتکل استخراج بتا گلوکان ایجاد کرده اید که نیازهای شما را براورده می کند، مقیاس بندی فرایند استخراج می تواند یک تلاش ساده باشد.

استخراج دسته ای مقیاس بالا

اگر قصد دارید با استفاده از یک روش استخراج دسته ای مقیاس بندی کنید، توصیه می کنیم حجم دسته ای را افزایش دهید در حالی که نسبت جامد به مایع و تمام پارامترهای دیگر را ثابت نگه دارید. اگر شما همچنان به استفاده از هموژنایزر اولتراسونیک همان، مطمئن شوید که به تناسب افزایش زمان فراصوت. برای دسته های بیش از 1 لیتر، ممکن است بخواهید یک همزن اهسته را برای حفظ تعلیق ذرات و بهبود یکنواختی استخراج در نظر بگیرید. تصویر زیر نشان می دهد 8 لیتر راه اندازی استخراج دسته ای با استفاده از UP400St هموژنایزر اولتراسونیک در ترکیب با همزن ازمایشگاهی.

استخراج قارچ درون خطی

برای کسانی که علاقه مند به استخراج مقادیر بیشتری از بتا گلوکان از قارچ هستند، Hielscher Ultrasonics راکتورهای سلول جریان طراحی شده برای استخراج مواد گیاهی را ارائه می دهد. اگر این در مورد شما صدق می کند، ما شما را تشویق می کنیم که به طور مستقیم برای اطلاعات بیشتر با ما تماس بگیرید. تیم فنی ما خوشحال خواهد شد که در تعیین مناسب ترین تنظیمات برای نیازهای خاص شما کمک کند. با این حال، انجام ازمایش در مقیاس ازمایشگاهی که قبلا با گونه های قارچ خاص شما ذکر شد، می تواند در درک الزامات دقیق فرایند ارزشمند باشد. تصویر زیر را نشان می دهد راکتور سلول جریان بزرگ با هموژنایزر اولتراسونیک UIP4000hdT برای استخراج بتا گلوکان در حدود 50 به 200 لیتر دوغاب قارچ حلال در ساعت.

تجربی غلظت بتا گلوکان از گونه های قارچ

در زیر، لیستی از غلظت تجربی بتا گلوکان را پیدا خواهید کرد که از گونه های مختلف قارچ استخراج شده است.

گونه های قارچ	محتوای بتا گلوکان (٪ وزن)
Termitomyces fuliginosus R. Heim	1%
بولتوس غول R. Heim	3%
Russula densifolia Secr. گیلت سابق	25%
Russula cyanoxantha (Schaeff.) Fr.	29%
روسلا البورالاتا هونگو	42%
Russula emetica (Schaeff.) Pers.	10%
روسولا دلیکا Fr.	38%
Pycnoporus cinnabarinus (Jacq.) P. کارست.	35%
Amanita hemibapha (Berk. & برووم) ساک.	5%
Amanita princeps گوشه & باس	9%
Amanita caesarea (Scop.) Pers.	4%
Heimiella retispora (پت. & C.F. بیکر) Boedijn	19%
Cortinarius claricolor var. turmalis (Fr.) Quadr	13%
ترمیتومیسس تایلریانوس اوتینو	12%
Termitomyces microcarpus (Berk. & بروم) R. Heim	8%
Termitomyces eurhizus (برک.) R. Heim	7%
Polyporellus varius (Pers.) P. Karst.	2%
Pycnoporus coccineus (Fr.) بوندارتسف & خواننده	45%
Lentinus squarrosulus Mont.	2%
Daedaleopsis confragosa (بولتون) J. شروت	3%
Pycnoporus sanguineus (L.) Fr.	35%
Amanita hemibapha (Berk. & برووم) ساک.	5%
Amanita virgineoides باس	1%
اگاریکوس سیلواتیکوس شاف	3%
مولیبدیت کلروفیلوم (G. Mey.) مسی	3%
Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst.	33%
Amauroderma rugosum (بلوم) & T. Nees) تورند	4%
Suillus bovinus var. bovinus (Pers.) کونتزه	1%
Clitocybe suaveolens (Schumach.) P. Kumm. S	9%
Cleroderma verrucosum (Bull.) Pers.	9%
Heimiella retispora (پت. & C.F. بیکر)	19%
لنتینولا edodes (برک.) پگلر	34%
Pycnoporus cinnabarinus (Jacq.) P. کارست.	35%

در بخش 4،4،4، با توجه به این، با توجه به این، با وجود، با توجه به این، با وجود، با وجود، منبع: Boonyanuphap، Jaruntorn & هانساواسدی، چانیدا (1389). توزیع فضایی بتا گلوکان حاوی جوامع قارچ وحشی در جنگل خشک نیمه گرمسیری، تایلند. تنوع قارچی 46. 29-42. 10.1007 / s13225-010-0067-8.