Síntesis eficaz de péptidos mediante sonicación

La síntesis de péptidos en fase sólida (SPPS) es el método habitual para la síntesis de péptidos. La ultrasonicación es una herramienta fiable para intensificar la síntesis de péptidos en fase sólida, lo que se traduce en mayores rendimientos, mayor pureza, ausencia de racemización y una velocidad de reacción significativamente acelerada. Hielscher Ultrasonics ofrece diversas soluciones ultrasónicas para la síntesis, escisión y disolución de péptidos.

Síntesis ultrasónica de péptidos

La ultrasonicación ya se aplica ampliamente como método intensificador en síntesis orgánica y es bien conocida por sus ventajas, como la reducción drástica de los tiempos de reacción, mayores rendimientos, menos subproductos, la iniciación de vías que no podrían lograrse de otras maneras y/o una mejor selectividad. También se pueden obtener grandes beneficios cuando la sonicación se acopla a las reacciones de síntesis peptídica. Los resultados de la investigación han demostrado que la síntesis peptídica asistida por ultrasonidos consigue un rendimiento optimizado de péptidos de gran pureza, sin racemización y en un tiempo de reacción corto.

Ventajas de la síntesis peptídica ultrasónica

  • Alto rendimiento de péptidos
  • Síntesis mucho más rápida
  • Mayor pureza del péptido
  • Sin racemización
  • Síntesis paralela de varios péptidos
  • Escalable linealmente a cualquier volumen

Solicitar información




Tenga en cuenta nuestra Política de privacidad.


Cabezal ultrasónico para la sonicación uniforme de varios recipientes de reactor, por ejemplo, para mejorar la síntesis de péptidos.

Cuphorn ultrasónico para la sonicación uniforme de varios recipientes de reactor para mejorar la síntesis de péptidos.

Representación esquemática de la síntesis peptídica en fase sólida de Merrifield, que puede intensificarse mediante sonicación.

Gráfico que muestra la síntesis de péptidos en fase sólida de Merrifield. La ultrasonicación se utiliza para promover y mejorar la reacción de síntesis, así como para separar los péptidos sintetizados de la resina.
Gráfico: ©Conejos-Sánchez et al., 2014)

Síntesis de péptidos en fase sólida mejorada con ultrasonidos

La síntesis peptídica en fase sólida (SPPS) es una reacción química que permite ensamblar una cadena peptídica mediante reacciones sucesivas de derivados de aminoácidos sobre un soporte poroso insoluble. Sin embargo, la síntesis peptídica en fase sólida tradicional es un proceso relativamente ineficaz y lento. Por ello, la intensificación ultrasónica de la síntesis peptídica es una herramienta muy apreciada para lograr una síntesis más eficaz y rápida de los péptidos.
Silva et al. (2021) compararon la síntesis peptídica en fase sólida (SPPS) "clásica" con fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) con la SPPS asistida por ultrasonidos (US) para la preparación de tres péptidos, a saber, el péptido Pep1 (VSPPLTLGQLLS-NH2) específico del receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR3) y los nuevos péptidos Pep2 (RQMATADEA-NH2) y Pep3 (AAVALLPAVLLALLAPRQMATADEA-NH2).
La SPPS asistida por ultrasonidos dio lugar a una reducción del tiempo de ensamblaje del péptido 14 veces (Pep1) y 4 veces (Pep2) en comparación con el método "clásico". Curiosamente, la SPPS asistida por ultrasonidos produjo Pep1 con mayor pureza (82%) que la SPPS "clásica" (73%). La significativa reducción de tiempo, combinada con la elevada pureza del péptido bruto obtenido, llevó al equipo de investigación a aplicar la SPPS asistida por ultrasonidos al gran péptido Pep3, que presenta un elevado número de aminoácidos hidrófobos y secuencias homooligo. Sorprendentemente, la síntesis de este péptido de 25 polímeros se logró en menos de 6 horas (347 min) con una pureza moderada (aprox. 49%).

La síntesis peptídica en fase sólida ultrasónica (US-SPPS) es una técnica eficaz para la síntesis peptídica que evita la racemización.

Síntesis de péptidos más rápida mediante síntesis de péptidos en fase sólida utilizando agitación ultrasónica.
(Estudio y análisis: Wołczański et al., 2019)

Merlino et al. (2019) también realizaron un estudio exhaustivo de los efectos ultrasónicos en la síntesis de péptidos en fase sólida basada en Fmoc, que permitió la síntesis de diferentes péptidos biológicamente activos (hasta 44-mer), con un notable ahorro de material y tiempo de reacción. Demostraron que la ultrasonicación no exacerbaba las principales reacciones secundarias y mejoraba la síntesis de péptidos dotados de “secuencias difíciles”La síntesis de péptidos en fase sólida promovida por ultrasonidos (US-SPPS) es una de las estrategias actuales de síntesis de péptidos más eficaces.

La disponibilidad de sistemas de alto rendimiento para la síntesis ultrasónica (sónica) de péptidos permite mejorar significativamente las tasas de síntesis y aumentar la pureza de los productos brutos. (cf. Wołczański et al., 2019)

La síntesis peptídica ultrasónica proporciona altos rendimientos de péptidos de gran pureza, al tiempo que evita la racemización.

Investigación de la racemización. Comparación de espectros de RMN 1H significativos de péptidos modelo sintetizados manualmente mediante el método clásico a temperatura ambiente frente al método ultrasónico a temperatura elevada. Los desplazamientos químicos de los protones α de His y Cys y del grupo metileno de Acm (paneles de la izquierda), y de los protones ɣ-metil de Val (paneles de la derecha) muestran que la sonicación a 70°C no causa racemización.
(Estudio y análisis: Wołczański et al., 2019)

Desdoblamiento ultrasónico de péptidos

Tras la síntesis de péptidos en fase sólida (SPPS), los péptidos sintetizados deben separarse de las resinas poliméricas. Este paso también se conoce como desprotección. Cuando se comparan la agitación común y la ultrasonicación para la separación de péptidos de la resina, el método de agitación requiere aproximadamente 1 hora, mientras que la separación ultrasónica puede realizarse en 15 a 20 minutos. La escisión ultrasónica de péptidos puede aplicarse a la escisión de aminoácidos protegidos y péptidos unidos a resinas de poliestireno mediante enlaces de éster bencílico.

La separación por ultrasonidos es una técnica rápida y fiable para separar los péptidos sintetizados de la resina de poliestireno.

La separación ultrasónica de péptidos de la resina de poliestireno proporciona altos rendimientos de péptidos de gran pureza, sin racemización, en un procedimiento rápido.
(estudio y gráfico: ©Anuradha y Ravindranath, 1995)

Reactor agitado por ultrasonidos para mejorar la síntesis de péptidos.

Reactor agitado por ultrasonidos para mejorar y acelerar la síntesis de péptidos. La imagen muestra el ultrasonicador UP200St en un reactor de vidrio agitado.

Solicitar información




Tenga en cuenta nuestra Política de privacidad.


Ultrasonidos de alto rendimiento para la síntesis de péptidos
Hielscher Ultrasonics ofrece diversas soluciones ultrasónicas para la sonicación directa e indirecta. Los procesadores ultrasónicos potentes y controlables con precisión suministran exactamente la cantidad correcta de energía ultrasónica al recipiente de reacción. Tanto si utiliza jeringas, tubos, placas multipocillo o reactores de vidrio como recipiente de síntesis, Hielscher Ultrasonics le ofrece el ultrasonicador más adecuado para su aplicación de péptidos.

Los sistemas ultrasónicos de Hielscher son ideales para la síntesis de

  • péptidos personalizados
  • producción de péptidos a gran escala
  • bibliotecas de péptidos

Muchas síntesis de péptidos se realizan en jeringas (por ejemplo, reactores de jeringa frita). El agitador ultrasónico de jeringa de Hielscher sonoriza la solución peptídica acoplando las ondas ultrasónicas a través de la pared de la jeringa en el líquido. El agitador ultrasónico de jeringa es una de las soluciones ultrasónicas más populares para la síntesis de péptidos asistida por ultrasonidos.
El cuphorn ultrasónico es una herramienta adecuada para sonicar hasta 5 recipientes de reacción, mientras que el VialTweeter puede contener hasta diez tubos de reacción y, además, cinco recipientes más grandes mediante un accesorio de sujeción.
Para otros tipos de reactores, como el reactor de fase sólida Merrifield o Kamysz y otros recipientes/reactores de polipropileno o borosilicato, Hielscher ofrece sistemas de ultrasonidos clamp-on personalizados para sonicación indirecta.
Para la síntesis de péptidos en fase sólida en placas multipocillo / microtiter, el UIP400MTP es el dispositivo ideal. La cavitación ultrasónica se acopla indirectamente de manera uniforme en los numerosos pocillos de muestras para una transferencia de masa y una reacción de síntesis superiores. Vea el vídeo a continuación para ver el UIP400MTP ¡en acción!
Por supuesto, los reactores de vidrio estriado de mayor tamaño, por ejemplo para síntesis en fase disuelta, pueden equiparse fácilmente con sondas ultrasónicas (también denominadas sonotrodos o bocinas ultrasónicas) de cualquier tamaño.

Ventajas de los ultrasonicadores Hielscher para la síntesis de péptidos

  • varios tipos de ultrasonidos
  • sonicación directa e indirecta
  • control preciso de la intensidad
  • control preciso de la temperatura
  • ultrasonidos continuos o pulsados
  • funciones inteligentes, dispositivos programables
  • disponible para cualquier volumen
  • escalabilidad lineal
El homogeneizador ultrasónico UIP400MTP puede sonicar placas de pocillos múltiples y microplacas para lisis celular, fragmentación de ADN, dispersión u homogeneización.

UIP400MTP para sonicación multiplaca de pocillos

Póngase en contacto con nosotros/Envíenos su pregunta

Solicitar más información

Utilice el siguiente formulario para solicitar información adicional sobre procesadores ultrasónicos, aplicaciones y precio. Estaremos encantados de hablar con usted sobre su proceso y ofrecerle un sistema de ultrasonidos que cumpla sus requisitos.









Tenga en cuenta nuestra Política de privacidad.


Los homogeneizadores ultrasónicos de alto cizallamiento se utilizan en procesos de laboratorio, de sobremesa, piloto e industriales.

Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrasónicos de alto rendimiento para aplicaciones de mezcla, dispersión, emulsificación y extracción a escala de laboratorio, piloto e industrial.



Literatura / Referencias

Información interesante

péptidos

Los péptidos son compuestos en los que varios aminoácidos están unidos mediante enlaces amida, los llamados enlaces peptídicos. Cuando se unen en estructuras complejas – Formadas normalmente por 50 o más aminoácidos, estas grandes estructuras peptídicas se denominan proteínas. Los péptidos son un componente esencial de la vida y desempeñan numerosas funciones en el organismo.

síntesis de péptidos

En química orgánica, biología molecular y ciencias de la vida, la síntesis peptídica es el proceso de producción de péptidos. Los péptidos se sintetizan químicamente mediante una reacción de condensación del grupo carboxilo de un aminoácido con el grupo amino de otro aminoácido. Suelen utilizarse estrategias de grupos protectores (también grupos protectores) para evitar reacciones secundarias no deseadas con las distintas cadenas laterales de los aminoácidos.
La síntesis química (in vitro) de péptidos suele comenzar acoplando el grupo carboxilo del aminoácido entrante (C-terminal) al N-terminal de la cadena peptídica en crecimiento. Al contrario que en la síntesis C-N, la biosíntesis proteica natural de péptidos largos en los organismos vivos se produce en la dirección opuesta. Esto significa que en la biosíntesis, el N-terminal del aminoácido entrante se une al C-terminal de la cadena proteica (N-a-C).
La mayoría de los protocolos de investigación y desarrollo para la síntesis de péptidos se basan en métodos en fase sólida, mientras que los métodos de síntesis en fase disolución se encuentran en la producción industrial de péptidos a gran escala.


Ultrasonidos de alto rendimiento La gama de productos de Hielscher cubre todo el espectro, desde el ultrasonicador compacto de laboratorio, pasando por las unidades de sobremesa, hasta los sistemas de ultrasonidos totalmente industriales.

Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrasónicos de alto rendimiento de laboratorio a tamaño industrial.