Νέες συσκευές υπερήχησης μικροπλακών για τη διάσπαση επίμονων βιοϋμενίων
, Kathrin Hielscher, δημοσιεύθηκε στην κατηγορία Νέα της Hielscher
Τα βιοϋμένια – πυκνές μικροβιακές κοινότητες που προσκολλώνται σε επιφάνειες – συγκαταλέγονται στις δυσκολότερες προκλήσεις στη μικροβιολογία και την κλινική διαγνωστική. Η νέα συσκευή υπερήχησης μικροπλακών UIP400MTP διευκολύνει την προετοιμασία μεγάλου αριθμού δειγμάτων. Αναλύσεις μελετών που έχουν αξιολογηθεί από ομοτίμους δείχνουν ότι τα υπερηχητικά συστήματα υψηλών επιδόσεων, όπως οι συσκευές υπερήχησης πλακών πολλαπλών βοθρίων της Hielscher, αναδεικνύονται σε απαραίτητα εργαστηριακά εργαλεία για την αποκόλληση αυτών των επίμονων δομών από πλάκες MBEC™, επιτρέποντας ακριβέστερες δοκιμές αντιμικροβιακής ευαισθησίας και ταχύτερες ερευνητικές ροές εργασίας.
Αποκόλληση βιοϋμενίων με υπερήχηση
Οι επιστήμονες βασίζονται όλο και περισσότερο στην υπερήχηση πλακών πολλαπλών βοθρίων, επειδή τα βιοϋμένια μπορεί να είναι εκατοντάδες φορές πιο ανθεκτικά στα αντιβιοτικά από τα ελεύθερα αιωρούμενα πλαγκτονικά βακτήρια, σύμφωνα με δύο σημαντικές μελέτες για βιοϋμένια Staphylococcus aureus, σταφυλόκοκκων αρνητικών στην κοαγκουλάση και Staphylococcus saprophyticus. Όταν είναι ενσωματωμένα στη μήτρα ενός βιοϋμενίου, αυτά τα μικρόβια εμφανίζουν δραματικά αυξημένες ελάχιστες ανασταλτικές συγκεντρώσεις (MICs) και ελάχιστες βακτηριοκτόνες συγκεντρώσεις (MBCs), συχνά πέρα από τα κλινικά εφικτά επίπεδα των φαρμάκων.
Ωστόσο, οι αποτελεσματικές δοκιμές ξεκινούν με την αποδοτική, αξιόπιστη αποκόλληση των κυττάρων του βιοϋμενίου – και σε αυτό ακριβώς ξεχωρίζει η UIP400MTP.
Αποκόλληση καλλιεργειών προσκολλημένων κυττάρων από οποιαδήποτε τυπική μικροπλάκα: προετοιμασία μεγάλου αριθμού δειγμάτων με τη συσκευή υπερήχησης UIP400MTP
Βιοϋμένια: Μια κρυφή ασπίδα κατά των αντιβιοτικών
Και στις δύο αναφερόμενες μελέτες, οι ερευνητές κατέγραψαν δραματικές αυξήσεις της αντοχής στα αντιμικροβιακά όταν τα βακτήρια εξετάστηκαν υπό μορφή βιοϋμενίου:
Οι τιμές MIC αυξήθηκαν κατά 2 έως 32 φορές, και μερικές φορές περισσότερο, σε σύγκριση με τα πλαγκτονικά κύτταρα.
Ορισμένα απομονωμένα στελέχη μετατράπηκαν από ευαίσθητα στα αντιβιοτικά σε πλήρως ανθεκτικά μόλις βρέθηκαν σε κατάσταση βιοϋμενίου.
Ορισμένα βιοϋμένια απαιτούσαν επίπεδα MBC πέρα από τις υψηλότερες συγκεντρώσεις που δοκιμάστηκαν, αναδεικνύοντας την ακραία ανοχή τους.
Αυτά τα ευρήματα υπογραμμίζουν γιατί η διάσπαση των βιοϋμενίων είναι κρίσιμη: ο ακριβής προσδιορισμός του προφίλ αντοχής στα φάρμακα εξαρτάται από την απελευθέρωση των κυττάρων από την προστατευτική μήτρα, ώστε να μπορούν να εξεταστούν μεμονωμένα.
Η λύση: Η συσκευή υπερήχησης μικροπλακών UIP400MTP
Και οι δύο μελέτες χρησιμοποίησαν τη συσκευή υπερήχησης πλακών πολλαπλών βοθρίων UIP250MTP της Hielscher για την αποκόλληση βιοϋμενίων που είχαν αναπτυχθεί σε εξειδικευμένες διατάξεις MBEC™ με καπάκι με προεξοχές. Η υπερήχηση της πλάκας πολλαπλών βοθρίων για 5 λεπτά αποκόλλησε επιτυχώς τα κύτταρα του βιοϋμενίου σε φρέσκο θρεπτικό μέσο, επιτρέποντας στους ερευνητές να μετρήσουν τις MICB και MBCB με υψηλή αναπαραγωγιμότητα.
Αυτή η τεχνική υιοθετείται ευρέως επειδή:
- Επεξεργάζεται όλα τα βοθρία ταυτόχρονα και ομοιόμορφα, κάτι απαραίτητο για συγκριτικές δοκιμές αντιμικροβιακής ευαισθησίας.
- Η ακουστική σπηλαίωση διασπά αποτελεσματικά την εξωκυτταρική μήτρα χωρίς να καταστρέφει τα κύτταρα.
- Λειτουργεί απρόσκοπτα με τις πλατφόρμες MBEC με καπάκι με προεξοχές που χρησιμοποιούνται στην έρευνα για την αντοχή των βιοϋμενίων.
Βασικά χαρακτηριστικά που θα πείσουν αμέσως τους ερευνητές
- 400 watt υπερηχητικής ισχύος (20 kHz) για γρήγορη, ενδελεχή αποκόλληση βιοϋμενίων
- Πλήρης έλεγχος των παραμέτρων, συμπεριλαμβανομένων της εισροής ενέργειας (Ws/mL), του πλάτους ταλάντωσης, της θερμοκρασίας και του χρόνου
- Ενσωματωμένος εναλλάκτης θερμότητας με αντλία ανακυκλοφορίας για να διατηρούνται οι πλάκες δροσερές κατά την υπερήχηση
- Προγραμματιζόμενοι τρόποι λειτουργίας για επαναλήψιμες, αυτοματοποιημένες ροές εργασίας
- Ομοιόμορφη υπερήχηση σε ολόκληρη την επιφάνεια των πλακών. Δείτε το παρακάτω βίντεο!
Η δοκιμή ομοιομορφίας επιβεβαιώνει οπτικά το ομοιογενές πεδίο σπηλαίωσης που απαιτείται για την τυποποιημένη διάσπαση βιοϋμενίων – μια γνωστή πρόκληση στα λουτρά υπερήχων χαμηλότερης ισχύος.
Συσκευή υπερήχησης πλακών πολλαπλών βοθρίων UIP400MTP για αποδοτικές δοκιμές MBEC
Γιατί αυτό έχει σημασία για τα νοσοκομεία, τα εργαστήρια και την ανάπτυξη αντιβιοτικών
Οι λοιμώξεις που σχετίζονται με βιοϋμένια – από λοιμώξεις του ουροποιητικού συστήματος έως λοιμώξεις της κυκλοφορίας του αίματος που σχετίζονται με καθετήρες – είναι διαβόητα δύσκολο να αντιμετωπιστούν. Οι μελέτες δείχνουν ότι:
- Οι συμβατικές δοκιμές αντιβιοτικών σε πλαγκτονικά κύτταρα υποεκτιμούν την αντοχή σε πραγματικές συνθήκες.
- Η υπερήχηση υψηλής ποιότητας είναι ζωτικής σημασίας για την προετοιμασία δειγμάτων από βιοϋμένια που επιτρέπουν ακριβείς μετρήσεις.
- Εργαλεία όπως η UIP400MTP βοηθούν στη γεφύρωση του χάσματος μεταξύ των εργαστηριακών δοκιμών και της κλινικής πραγματικότητας.
Καθώς η αντοχή στα αντιμικροβιακά συνεχίζει να αυξάνεται, οι τεχνολογίες που βελτιώνουν την αναπαραγωγιμότητα και την αξιοπιστία στην έρευνα των βιοϋμενίων ενδέχεται να διαδραματίσουν καθοριστικό ρόλο στην ανάπτυξη νέων θεραπειών.
Οι συνημμένες μελέτες καθιστούν ένα συμπέρασμα αδιαμφισβήτητο: τα βακτήρια που σχηματίζουν βιοϋμένια απαιτούν νέες προσεγγίσεις δοκιμών, και η υπερήχηση πλακών πολλαπλών βοθρίων – ειδικά με υπερηχητικά συστήματα εξαιρετικά υψηλής ισχύος που κατανέμουν ομοιόμορφα τους υπερήχους, όπως το Hielscher UIP400MTP – καθιερώνεται ταχύτατα ως το χρυσό πρότυπο για την αποκόλληση βιοϋμενίων από πλάκες MBEC.
Για τα μικροβιολογικά εργαστήρια, τους φορείς ανάπτυξης φαρμάκων και τους κλινικούς ερευνητές, αυτές οι συσκευές δεν αποτελούν πλέον απλώς ευκολίες – εξελίσσονται σε απαραίτητα εργαλεία για την ακριβή μέτρηση της πραγματικής αντοχής στα αντιβιοτικά των παθογόνων που είναι ενσωματωμένα σε βιοϋμένια.
Βρείτε εδώ πληροφορίες για τη συσκευή υπερήχησης πλακών πολλαπλών βοθρίων UIP400MTP!
Πρόσθετες βιβλιογραφικές αναφορές
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.

