Νέοι ηχοβολείς μικροπλακών για το σπάσιμο επίμονων βιοφίλμ
, Κάθριν Χίλσερ, που δημοσιεύθηκε στο Hielscher News
Βιοϋμένια – πυκνές μικροβιακές κοινότητες που προσκολλώνται σε επιφάνειες – είναι από τις πιο δύσκολες προκλήσεις στη μικροβιολογία και τα κλινικά διαγνωστικά. Ο νέος ηχοβολέας μικροπλακών UIP400MTP διευκολύνει την προετοιμασία δειγμάτων υψηλής απόδοσης. Οι αναλύσεις μελετών με κριτές δείχνουν ότι τα συστήματα υπερήχων υψηλής απόδοσης, όπως οι ηχοβολείς πλακών πολλαπλών πηγαδιών της Hielscher, αναδεικνύονται σε απαραίτητα εργαστηριακά εργαλεία για την απομάκρυνση αυτών των επίμονων δομών από τις πλάκες MBEC™, επιτρέποντας ακριβέστερες αντιμικροβιακές δοκιμές και ταχύτερες ερευνητικές ροές εργασίας.
Αποκόλληση βιοφίλμ με ηχομόνωση
Οι επιστήμονες βασίζονται ολοένα και περισσότερο στον ηχοβολισμό πλακών πολλαπλών πηγαδιών, επειδή τα βιοφίλμ μπορεί να είναι εκατοντάδες φορές πιο ανθεκτικά στα αντιβιοτικά από τα πλαγκτονικά βακτήρια που επιπλέουν ελεύθερα, σύμφωνα με δύο μεγάλες μελέτες σχετικά με τα βιοφίλμ του Staphylococcus aureus, των αρνητικών κατά της πηκτικότητας σταφυλόκοκκων και του Staphylococcus saprophyticus. Όταν ενσωματώνονται σε μια μήτρα βιοϋμενίου, τα μικρόβια αυτά παρουσιάζουν δραματικά αυξημένες ελάχιστες ανασταλτικές συγκεντρώσεις (MIC) και ελάχιστες βακτηριοκτόνες συγκεντρώσεις (MBC), συχνά πέρα από τα κλινικά εφικτά επίπεδα φαρμάκων.
Αλλά οι αποτελεσματικές δοκιμές ξεκινούν με την αποτελεσματική, αξιόπιστη αποκόλληση των κυττάρων του βιοφίλμ. – και σε αυτό το σημείο το UIP400MTP ξεχωρίζει.
Αποκόλληση προσκολλημένων κυτταρικών καλλιεργειών από οποιαδήποτε τυπική μικροπλάκα: Προετοιμασία δειγμάτων υψηλής απόδοσης με τον ηχοβολέα UIP400MTP
Βιομεμβράνες: Αντιβιοτικά: Μια κρυφή ασπίδα ενάντια στα αντιβιοτικά
Και στις δύο προαναφερθείσες μελέτες, οι ερευνητές κατέγραψαν δραματική αύξηση της μικροβιακής αντοχής όταν τα βακτήρια εξετάστηκαν σε μορφή βιοφίλμ:
Οι τιμές MIC αυξήθηκαν 2 έως 32 φορές, και μερικές φορές περισσότερο, σε σύγκριση με τα πλαγκτονικά κύτταρα.
Ορισμένα απομονωμένα στελέχη μετατράπηκαν από ευαίσθητα στα αντιβιοτικά σε πλήρως ανθεκτικά όταν βρέθηκαν σε κατάσταση βιοφίλμ.
Ορισμένα βιοφίλμ απαιτούσαν επίπεδα MBC πέραν των υψηλότερων συγκεντρώσεων που δοκιμάστηκαν, αναδεικνύοντας την ακραία ανοχή τους.
Αυτά τα ευρήματα υπογραμμίζουν γιατί η διάσπαση των βιοφίλμ είναι κρίσιμη: η ακριβής ανάλυση του προφίλ της ανθεκτικότητας στα φάρμακα εξαρτάται από την απελευθέρωση των κυττάρων από την προστατευτική μήτρα, ώστε να μπορούν να εξεταστούν μεμονωμένα.
Η λύση: UIP400MTP
Και οι δύο μελέτες χρησιμοποίησαν τον ηχοβολέα πολλαπλών κοιλοτήτων UIP250MTP της Hielscher για την αποκόλληση βιοϋμενίων που αναπτύχθηκαν σε εξειδικευμένες συσκευές MBEC™ pin-lid. Ο ηχοβολισμός των πλακών πολλαπλών πηγαδιών για 5 λεπτά απομάκρυνε επιτυχώς τα κύτταρα βιοφίλμ σε φρέσκο μέσο, επιτρέποντας στους ερευνητές να μετρήσουν τα MICB και MBCB με υψηλή αναπαραγωγιμότητα.
Η τεχνική αυτή υιοθετείται ευρέως διότι:
- Επεξεργάζεται όλα τα φρεάτια ταυτόχρονα και ομοιόμορφα, πράγμα απαραίτητο για συγκριτικές αντιμικροβιακές δοκιμές.
- Η ακουστική σπηλαίωση διασπά αποτελεσματικά την εξωκυτταρική μήτρα χωρίς να καταστρέφει τα κύτταρα.
- Λειτουργεί άψογα με τις πλατφόρμες καπακιού με καρφίτσα MBEC που χρησιμοποιούνται στην έρευνα για την αντίσταση στο βιοφίλμ.
Βασικά χαρακτηριστικά που θα πείσουν τους ερευνητές αμέσως
- 400 watt ισχύος υπερήχων (20 kHz) για γρήγορη, λεπτομερή αποκόλληση βιοφίλμ
- Πλήρης έλεγχος παραμέτρων, συμπεριλαμβανομένης της εισερχόμενης ενέργειας (Ws/mL), του πλάτους, της θερμοκρασίας και του χρόνου
- Ενσωματωμένος εναλλάκτης θερμότητας με αντλία ανακυκλοφορίας για να διατηρούνται οι πλάκες δροσερές κατά τη διάρκεια του ηχοβολισμού
- Προγραμματιζόμενες λειτουργίες για επαναλαμβανόμενες, αυτοματοποιημένες ροές εργασίας
- Ομοιόμορφος ηχοβολισμός σε όλες τις πλάκες. Παρακολουθήστε το βίντεο παρακάτω!
Η δοκιμή ομοιομορφίας επιβεβαιώνει οπτικά το ομοιογενές πεδίο σπηλαίωσης που απαιτείται για την τυποποιημένη διάσπαση του βιοφίλμ. – μια γνωστή πρόκληση σε λουτρά υπερήχων χαμηλότερης ισχύος.
Υπερήχων πλάκας πολλαπλών φρεατίων UIP400MTP για αποτελεσματικές δοκιμασίες MBEC
Γιατί αυτό έχει σημασία για τα νοσοκομεία, τα εργαστήρια και την ανάπτυξη αντιβιοτικών
Λοιμώξεις που σχετίζονται με το βιοφίλμ – από λοιμώξεις του ουροποιητικού συστήματος έως λοιμώξεις αίματος που σχετίζονται με καθετήρες – είναι γνωστό ότι είναι δύσκολο να αντιμετωπιστούν. Οι μελέτες δείχνουν:
- Οι συμβατικές δοκιμές αντιβιοτικών σε πλαγκτονικά κύτταρα υποεκτιμούν την ανθεκτικότητα στον πραγματικό κόσμο.
- Ο υψηλής ποιότητας ηχοβολισμός είναι ζωτικής σημασίας για την προετοιμασία ακριβών δειγμάτων που προέρχονται από βιοφίλμ.
- Εργαλεία όπως το UIP400MTP συμβάλλουν στη γεφύρωση του χάσματος μεταξύ των εργαστηριακών δοκιμών και της κλινικής πραγματικότητας.
Καθώς η μικροβιακή αντοχή συνεχίζει να αυξάνεται, οι τεχνολογίες που βελτιώνουν την αναπαραγωγιμότητα και την αξιοπιστία στην έρευνα του βιοφίλμ μπορεί να διαδραματίσουν καθοριστικό ρόλο στην ανάπτυξη νέων θεραπειών.
Οι συνημμένες μελέτες καθιστούν ένα συμπέρασμα αδιαμφισβήτητο: τα βακτήρια που σχηματίζουν βιοφίλμ απαιτούν νέες προσεγγίσεις δοκιμών και ο ηχητικός καθαρισμός σε πλάκες πολλαπλών πηγαδιών – ειδικά με εξαιρετικά ισχυρά, ομοιόμορφα κατανεμημένα συστήματα υπερήχων όπως το UIP400MTP της Hielscher – γίνεται γρήγορα το χρυσό πρότυπο για την απομάκρυνση των βιοφίλμ από τις πλάκες MBEC.
Για τα μικροβιολογικά εργαστήρια, τους φαρμακευτικούς προγραμματιστές και τους κλινικούς ερευνητές, οι συσκευές αυτές δεν είναι πλέον μόνο ευκολίες – καθίστανται απαραίτητα εργαλεία για την ακριβή μέτρηση της πραγματικής αντοχής στα αντιβιοτικά των παθογόνων μικροοργανισμών που είναι ενσωματωμένοι σε βιοφίλμ.
Βρείτε πληροφορίες για τον ηχοβολέα πλακών πολλαπλών πηγαδιών UIP400MTP εδώ!
Περαιτέρω αναφορές
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.


