• Třífázová dělení (TPP) je technikou pro extrakci, separaci a čištění složek, např. Lipidů, enzymů, polysacharidů a dalších biomolekul, z biologického materiálu.
• Ultrazvukové třífázové dělení vyniká konvenčním TPP vyšším výtěžkem, lepší čistotou a výjimečnou rychlostí.
• Ultrazvukový TPP je použitelný pro malé a velké objemy a může být snadno přizpůsoben průmyslové výrobě.

Ultrazvukové třífázové dělení

Třífázové dělení

Třífázové dělení (TPP) je jednoduchý a účinný jednokrokový proces pro separaci, čištění a koncentraci biomolekul, jako jsou enzymy, lipidy, polysacharidy atd. Z komplexních směsí.
TPP se provádí postupným přidáním dostatečného množství soli (typicky síranu amonného) a organického rozpouštědla (hlavně T-butanol /terc-butanolu). Soli, jako je síran amonný, se používají při určité nasycení pro vysrážení proteinu. Organické rozpouštědlo, jako je Tbutanolu, aby se vytvořily třífázové vrstvy a aby se odstranily sloučeniny s nízkou molekulovou hmotností, jako jsou lipidy, fenoly a některé detergenty. Od té doby Tbutanol má vysokou teplotu varu, ale méně hořlavý než ethanol a methanol, Tbutanolu je výhodným rozpouštědlem pro TPP.
Po zpracování surového extraktu a dekantace se směs oddělí na tři různé fáze: horní rozpouštědlo (T-butanol) obsahuje nepolární sloučeniny, které se oddělují od spodní vodné fáze (obsahující polární sloučeniny) interfacial proteinovou sraženinou. Požadované proteiny jsou selektivně rozděleny na jednu fázi a další kontaminující proteiny do druhé fáze. To způsobuje částečné čištění a koncentraci bílkovin. Extrakčním procesem je sloučení kosmotropického, vysušování, izotonického korozpouštědla a osmolytického srážení bílkovin.

Ultrazvučně vylepšená TPP

Sonikace výrazně zesiluje proces TPP. Ultrazvukem asistované TPP se úspěšně používá pro separaci a čištění biomolekul. Široká škála biomoelkulů byla izolována efektivněji v kratším čase. Například enzymy z rostlin (např. bromelain, papain, invertáza, polyfenoloxidáza a inhibitory trypsinu), zvířata (např. trypsin, α-chymotrypsin, chymosin, pepsin a luciferáza) a mikroby (např. lipáza, α-amyláza, α-galaktosidáza, serratiopeptidáza, cyklodextrin glykosyltransferáza a fibrinolytické enzymy) byly čištěny ultrazvukovým TPP. Další výhodou ultrazvukového TPP je zvýšená aktivita různých enzymů, což vede ke zjevným vyšším výnosům (>100%) protože cílový enzym nebo protein se vysráží ve střední vrstvě mezi organickou a vodnou fází.
Ultrazvukový TPP může být efektivně používán se surovými vzorky a lze je snadno zvětšit.

Příklady pro US-TPP

Ultrazvukový TPP pro extrakci astaxanthinu

Pro extrakci astaxantinu (AX) se kombinovaná léčba TPP a sonikace s Hielscher UP400S je nejen jednoduchá a snadno použitelná, ale také velmi účinná technika pro izolaci AX od bakteriální biomasy Paracoccus NBRC 101723. Operační proměnné sonikace mohou být optimalizovány tak, aby získaly optimální výsledky extrakce. Parametry zpracování ultrazvukem mají jako amplituda, čas, teplota a extrakční nádoba (velikost, tvar), stejně jako velikost částic biomasy, významně ovlivňují ultrazvukové uvolňování AX z biomasy. Ultrasonikace vlhké biomasy dává lepší výsledky než ultrazvukový TPP sušené biomasy pro rychlou a účinnou extrakci AX. Ultrazvukový TPP má za následek o 37% vyšší zotavení AX než běžné extrakce rozpouštědlem. (viz Chougle a kol., 2013)

Ultrazvukový TPP pro separaci andrographolidu od Andrographis paniculata

Andrographolid je labradní diterpenoid, který je ceněn pro své vysoké protizánětlivé, antioxidační, hepatoprotektivní, antikarcinogenní a antidiabetické účinky. Srovnávací studie ukazují, že ultrazvukový TPP nejen zvyšuje výtěžnost andrografolidu, ale také zlepšuje antioxidační aktivitu ve srovnání s konvenčním TPP.

Vysoce výkonné ultrazvukové procesory

Hielscher Ultrasonics se specializuje na návrh a výrobu vysoce výkonných ultrazvukových systémů pro extrakci, stejně jako mnoho dalších procesů.
Náš sortiment zahrnuje malé, výkonné laboratorní zařízení, robustní ultrazvukové přístroje a průmyslové vysoce výkonné systémy. Rozdělovač Příslušenství umožňují ideální přizpůsobení ultrazvuku vašim specifickým požadavkům na proces. Všechny ultrazvukové přístroje Hielscher jsou konstruovány pro 24/7 provoz při plném zatížení.
Naše dlouholeté zkušenosti s ultrazvukovým zpracováním nám umožňují poradit se s našimi klienty z prvních testů s ultrazvukem prostřednictvím kroků optimalizace a implementace procesů v průmyslovém měřítku.
Použijte prosím níže uvedený formulář, abyste nám informovali o vašem procesu! Jsme rádi, že doporučujeme diskutovat o příležitostech a výhodách sonikace pro vaši žádost.