Sonikacija za testiranje na droge i analizu potencije lijekova
Ultrazvučna homogenizacija i ekstrakcija je uobičajena tehnika pripreme uzoraka prije analize lijeka, npr. za testove kvaliteta, procjenu sirovina i testove potencije. Ultrasonikatori tipa sonde se široko koriste za oslobađanje aktivnih supstanci kao što su API, bioaktivna biljna jedinjenja i druge supstance.
Predanalitička priprema uzoraka u ispitivanju lijekova pomoću ultrazvučne obrade
Test potentnosti lijeka je neophodan kako bi se utvrdilo koliko je aktivnog spoja u uzorku lijeka. Analiza lijekova i ispitivanje potencije lijekova koristi se u području farmakologije, toksikologije i forenzike. Zbog specifičnosti i efikasnosti, tečna hromatografija visokih performansi (HPLC) je najčešće korišćena metodologija u analizi potencijala leka.
Ključna razlika između testa i potencije je u tome što je test testiranje materijala kako bi se odredili njegovi sastojci i kvalitet, dok je potentnost količina lijeka potrebna da bi se postigao učinak u svom maksimalnom intenzitetu. Upotreba ova dva termina, test i potencija, uobičajena je u biohemiji i farmakologiji.
Ultrazvuk se primjenjuje prije analize potencije i testova kako bi se oslobodili bioaktivni sastojci ili aktivni farmaceutski sastojci (API) iz matrice. Ultrazvukom se mogu ekstrahovati ciljna jedinjenja iz biljnih materijala (npr. lišće, korenje itd.) ili rastvoriti farmaceutski oblik za doziranje kao što su tablete kako bi se aktivni sastojak učinio dostupnim za kasniju analizu.
Korak po korak protokol za analizu lijekova
Priprema uzorka važan je korak u analizi lijekova i testiranju potencijala lijeka i uključuje nekoliko koraka kako bi se osigurali tačni i ponovljivi rezultati. Slijede opći koraci koji su uključeni u pripremu uzorka prije analize potentnosti lijeka:
- Sakupljanje uzoraka: Prvi korak je prikupljanje odgovarajućeg uzorka lijeka, koji može biti u čvrstom, tekućem ili polučvrstom obliku. Važno je osigurati da uzorak bude reprezentativan za cijelu seriju te da se pravilno skladišti i rukuje kako bi se održao njegov kvalitet i stabilnost.
- Homogenizacija uzorka: Uzorak treba homogenizirati kako bi se osiguralo da je lijek ravnomjerno raspoređen po uzorku. Ovaj korak je kritičan za čvrste i polučvrste uzorke. Ultrazvuk je visoko efikasna i pouzdana metoda homogenizacije i stoga se često primjenjuje u pripremi uzoraka. Pročitajte više o primjeni ultrazvučnih homogenizatora za pripremu uzoraka!
- Ako je ciljna supstanca zarobljena u ćelijskom matriksu (npr. biljni materijal, ćelijsko tkivo), supstanca se mora osloboditi pre nego što se može izvršiti analitičko merenje ili analiza. Ultrazvučna ekstrakcija je vrhunska tehnika koja omogućava da zarobljene supstance budu dostupne za prikupljanje i analizu. Pročitajte više o ultrazvučnoj ekstrakciji bioaktivnih spojeva!
- Smanjenje veličine uzorka: Sljedeći korak je smanjenje volumena uzorka na odgovarajuću količinu za analizu. Ovo se može postići vaganjem dijela uzorka ili korištenjem djelitelja uzorka.
- Razrjeđivanje uzorka: Ako je koncentracija uzorka previsoka, možda će biti potrebno razrijediti je kako bi se dovela u linearni raspon testa. Upotrebljeni razblaživač treba da odgovara leku i metodi analize koja se koristi.
- Alikvotiranje uzorka: Razrijeđeni uzorak treba podijeliti u pojedinačne porcije kako bi se osiguralo da se ista količina uzorka koristi za svaki test. Ovaj korak pomaže da se smanji varijabilnost između testova i poboljša reproduktivnost.
- Čuvanje uzoraka: Alikvotne uzorke treba čuvati u odgovarajućim uslovima, kao što je skladištenje u frižideru ili zamrzivaču, kako bi se održala njihova stabilnost dok ne budu spremni za analizu.
Ovi koraci su opće smjernice za pripremu uzorka i mogu se razlikovati ovisno o specifičnom lijeku i metodi analize koja se koristi. Važno je slijediti upute proizvođača testa kako biste osigurali tačne i pouzdane rezultate.
Kako ultrazvuk potiče izolaciju bioaktivnih spojeva iz biljnog materijala?
Bioaktivna jedinjenja kao što su terpeni, kanabinoidi ili flavonoidi mogu se izolovati iz biljaka korišćenjem procesa zasnovanog na ultrazvuku koji se naziva ultrazvučna ekstrakcija, koji uključuje obradu kaše koja se sastoji od mlevenog biljnog materijala u rastvaraču (npr. alkohol, voda, vodeni etanol, heksan itd.) ultrazvukom velike snage. Primjena intenzivne ultrazvučne obrade na tekućinu ili kašu rezultira stvaranjem akustične kavitacije. Fenomen akustične kavitacije karakteriziraju lokalni uvjeti vrlo gustoće energije, vrlo visoke razlike tlaka i temperature, kao i mlaznice tekućine i posmične sile. U ovom energetski gustom polju, ćelijski zidovi su perforirani i razbijeni tako da se unutarćelijski materijal oslobađa u okolni rastvarač. Nakon procesa sonikacije, ciljni molekuli se potpuno oslobađaju iz ćelijskog matriksa i plutaju u otapalu. Pomoću tehnika izolacije kao što su isparavanje ili destilacija, ciljna tvar se može pročistiti i dalje obraditi ako je potrebno.
Ultrazvučna ekstrakcija se koristi u proizvodnji bioaktivnih jedinjenja (npr. adaptogeni, eterična ulja, kanabis- & proizvodi bogati terpenima) za konzumaciju kao dodatak ishrani, aditivi za hranu i terapeutici kao i za analizu lijekova.
Ultrazvučni laboratorijski homogenizatori za pripremu uzoraka prije analize lijeka
Hielscher Ultrasonics razvija, proizvodi i isporučuje ultrasonikatore visokih performansi za homogenizaciju i ekstrakciju. Hielscher ultrazvučni homogenizatori i ekstraktori se koriste u farmaceutskoj industriji i proizvodnji dodataka prehrani u proizvodnji i ocjeni kvalitete. Ultrazvučni homogenizatori se također koriste za pripremu uzoraka u testiranju droga, uključujući skrining na ilegalne supstance u drogama, krivotvorene droge i ljudske uzorke.
Sa karakteristikama kao što su precizna regulacija amplitude, automatsko protokoliranje podataka i daljinsko upravljanje pretraživačem, Hielscher ultrasonikatori omogućavaju visoko standardiziranu pripremu uzorka.
Tabela u nastavku daje vam indikaciju približnog kapaciteta obrade naših ultrazvučnih sistema od kompaktnih ručnih homogenizatora i MultiSample Ultrasonicatora do industrijskih ultrazvučnih procesora za komercijalne primjene:
Batch Volume | Flow Rate | Preporučeni uređaji |
---|---|---|
razne bočice i posude | N / A | CupHorn |
mikrotitarske ploče sa više jažica | N / A | UIP400MTP | 10 bočica od 0,5 do 1,5 ml | N / A | VialTweeter na UP200St |
00,01 do 250 ml | 5 do 100 ml/min | UP50H |
00,01 do 500 ml | 10 do 200 ml/min | UP100H |
10 do 1000 ml | 20 do 200 ml/min | UP200Ht |
10 do 2000 ml | 20 do 400 ml/min | UP400St |
Kontaktiraj nas! / Pitajte nas!
Literatura / Reference
- Dent M., Dragović-Uzelac V., Elez Garofulić I., Bosiljkov T., Ježek D., Brnčić M. (2015): Comparison of Conventional and Ultrasound Assisted Extraction Techniques on Mass Fraction of Phenolic Compounds from sage (Salvia officinalis L.). Chem. Biochem. Eng. Q. 29(3), 2015. 475–484.
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.