Tách tế bào siêu âm

Tách tế bào siêu âm là một kỹ thuật chuẩn bị mẫu hiệu quả cao và đáng tin cậy được sử dụng trong các lĩnh vực khác nhau của sinh học tế bào và công nghệ sinh học. Sử dụng sóng siêu âm, sonicator tấm đa giếng UIP400MTP tách các tế bào bám dính khỏi bề mặt nuôi cấy và chuẩn bị huyền phù tế bào cho các ứng dụng hạ lưu. Sonication cung cấp một số lợi thế so với các kỹ thuật tách enzyme, hóa học và cơ học truyền thống, làm cho nó trở thành một công cụ có giá trị cho các nhà nghiên cứu.

Nguyên lý tách tế bào siêu âm

Tách tế bào siêu âm dựa vào việc sử dụng siêu âm điện để phá vỡ sự tương tác giữa các tế bào và chất nền mà chúng được gắn vào. Sóng siêu âm tạo ra microbubbles, cavitation âm thanh và rung động trong môi trường nuôi cấy, tạo ra các lực cơ học nhẹ nhàng nhưng hiệu quả đánh bật các tế bào. Quá trình này thường được thực hiện bằng cách sử dụng UIP400MTP sonicator không tiếp xúc cho các tấm đa giếng.

Dưới đây, bạn tìm thấy một hướng dẫn mẫu mực để tách tế bào bằng cách sử dụng UIP400MTP sonicator tấm đa giếng.
 

Thiết bị và vật liệu để tách tế bào siêu âm

• Sonicator không tiếp xúc cho tấm đa giếng UIP400MTP: Sonicator thông lượng cao này là công cụ chính. Máy UIP400MTP sonicator tấm phù hợp với bất kỳ tấm đa giếng và microtiter tiêu chuẩn nào cũng như cho các đĩa Petri. Sóng siêu âm cung cấp năng lượng cơ học cần thiết cho sự tách rời tế bào.
• Đĩa nuôi cấy tế bào hoặc đĩa Petri: Các mạch tiêu chuẩn được sử dụng để phát triển nuôi cấy tế bào bám dính.
• Môi trường văn hóa: Môi trường lỏng trong đó các tế bào được phát triển và duy trì.
• PBS vô trùng (nước muối đệm phốt phát): Được sử dụng để rửa tế bào trước khi tách ra.
• Bộ sưu tập ống: Để thu thập hệ thống treo tế bào tách rời.

Giao thức tách siêu âm bằng cách sử dụng tấm Sonicator UIP400MTP

1. Chuẩn bị
   – Đảm bảo tất cả các thiết bị sạch sẽ và vô trùng để ngăn ngừa ô nhiễm.
   – Làm ấm trước môi trường nuôi và PBS đến nhiệt độ thích hợp (thường là 37 ° C).
2. Rửa tế bào
   – Hút môi trường nuôi cấy từ bình hoặc đĩa nuôi cấy tế bào.
   – Nhẹ nhàng rửa các tế bào bằng PBS vô trùng để loại bỏ bất kỳ tế bào trung bình và tách rời còn sót lại.
3. Sonication
   – Thêm một lượng nhỏ PBS hoặc môi trường nuôi cấy tươi vào bình hoặc đĩa để phủ lớp đơn tế bào.
   – Đặt đĩa hoặc đĩa Petri vào UIP400MTP sonicator.
   – Sonicate trong một khoảng thời gian xác định, thường dao động từ vài giây đến vài phút, tùy thuộc vào loại tế bào và cường độ đính kèm.
4. Bộ sưu tập huyền phù tế bào
   – Sau khi sonication, quan sát các tế bào dưới kính hiển vi để đảm bảo tách ra.
   – Nhẹ nhàng pipet huyền phù tế bào để thu thập các tế bào tách ra.
   – Chuyển hệ thống treo vào ống thu gom.
5. Xử lý sau tách rời
   – Máy ly tâm huyền phù tế bào nếu cần thiết để tập trung các tế bào.
   – Treo lại các tế bào trong môi trường nuôi cấy tươi hoặc bộ đệm cho các ứng dụng hạ nguồn.

Ghi chú: Các thông số (như thời gian và cường độ sonication) cần được tối ưu hóa cho các loại tế bào khác nhau để tránh tổn thương tế bào. Một số loại tế bào mỏng manh có thể nhạy cảm hơn với điều trị siêu âm, đòi hỏi phải tối ưu hóa cẩn thận.

Ứng dụng thực tế của tách tế bào siêu âm

Tách tế bào siêu âm được sử dụng trong các nghiên cứu và thiết lập lâm sàng khác nhau:

1. Flow Cytometry: Chuẩn bị huyền phù đơn bào để phân tích.
2. Đếm tế bào và xét nghiệm khả năng tồn tại: Tách các ô để đếm chính xác và đánh giá khả năng tồn tại.
3. Nuôi cấy phụ: Chuyển tế bào từ tàu nuôi cấy này sang tàu nuôi cấy khác.
4. Thí nghiệm sinh học phân tử: Phân lập tế bào để chiết xuất DNA, RNA và protein.