Ultrasonik ildiz hujayra izolyatsiyasi
Sonikatsiya insonning yog 'to'qimalaridan ildiz hujayralarini ajratib olishning yuqori samarali mexanik usuli hisoblanadi. Ultrasonik izolyatsiya qilingan stromal tomir fraktsiyasi (SVF) tibbiy ilovalar uchun sezilarli regenerativ potentsialni namoyish etadi. Hielscher Ultrasonics ildiz hujayralarini yig'ish uchun bir qator to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita sonication imkoniyatlarini taqdim etadi. Ildiz hujayralarini izolyatsiya qilish jarayoni uchun ideal sonikatorni toping!
Ildiz hujayralarining ultratovushli izolyatsiyasi
Inson tanasidan olingan yog 'to'qimasi (liposaktsiya orqali) to'qimalarni ildiz hujayralari va boshqa o'sish hujayralaridan olib tashlash uchun ultratovush bilan ishlov beriladi. Hujayralarning bu ajratilgan qismi stromal tomir fraktsiyasi hujayralari (SVF) deb nomlanadi.
Ildiz hujayralarini yog 'to'qimalaridan ultratovushli izolyatsiya qilish usuli faqat ultratovushli kavitatsiyaning ishlash printsipiga asoslanadi, bu faqat mexanik kesishdir. Ushbu kavitatsion kesish kuchlari yog 'to'qimasini buzadi, shuning uchun ildiz hujayralari yog' to'qimalarining tuzilishidan chiqariladi. Ildiz hujayralarini ultratovush bilan izolyatsiya qilish fermentsiz protsedura bo'lib, kollagenaza, tripsin yoki dispazadan foydalanishdan qochadi.
Chiqarilgan ildiz hujayralarini, mezenximal ildiz hujayralarini, endotelial prekursorlarni va boshqa o'sish hujayralari turlarini ajratish uchun soniklangan yog 'to'qimalari santrifüj qilinadi.
Ajratilgan ildiz hujayralari to'planadi va ularning sifati, shu jumladan hujayralar soni, hayotiyligi, endotoksin va gramm bo'yoqlari uchun tahlil qilinadi va darhol autolog transplantatsiya uchun ishlatiladi yoki krio-saqlashda saqlanadi.
Nima uchun fermentlardan qochish kerak?
Ildiz hujayralarini izolyatsiya qilish uchun fermentativ hazm qilish yuqori xarajatlar va mumkin bo'lgan xavfsizlik xavflari bilan birga samaradorlikning etishmasligi bilan birga keladi [Oberbauer va boshq. 2015], ultratovushli kavitatsiya kabi fermentativ bo'lmagan izolyatsiyalash usullariga afzallik beriladi. Ultrasonik izolyatsiya bosqichi hujayralar va hujayra agregatlarini yog 'to'qimasidan mexanik ravishda ajratish orqali fermentativ hazm qilishni almashtiradi.
GDmini2 UP200St-TD transduserida (200 vatt)
- Tez
- Samarali
- Qayta tiklanadigan
- xavfsiz
- Fermentsiz
- Tejamkor
- Steril variantlar
Yog'dan olingan ildiz hujayralari
Soniaction orqali olingan ildiz hujayra hosildorligi
1,67–2,24 × 10 da ultratovushli kavitatsiya rentabelligidan foydalangan holda nashr etilgan stromal tomir fraktsiyasini izolyatsiyalash usuli7 yashovchanligi 97,1-98,9% bo'lgan hujayralar [Viktor, S., 2014]. Taxminan 2-4 million hujayra / gramm yog 'to'qimalarining hujayra hosildorligi dissotsilangan yog' to'qimalarida etuk adipotsitlarning ultratovushli lizisi orqali olingan [Bright va boshqalar, 2014].
Ultrasonik usulda tayyorlangan hujayralar standart enzimatik izolyatsiya usuli bilan solishtirganda teng darajada yuqori adipogen va osteogenik farqlanish potentsialiga ega [Oberbauer va boshq. 2015].
Ildiz hujayra izolyatsiyasi uchun ultratovushli tizimlar
Yuqori xavfsizlik va eng yaxshi sifatni ta'minlash uchun ildiz hujayralarini davolashni aniq nazorat qilish imkonini beruvchi ishonchli ultratovush uskunasi bemorlarni muvaffaqiyatli davolashning asosiy omilidir. Hielscher Ultrasonics ildiz va endotelial prekursor hujayralarini ajratib olish va yig'ish uchun otolog ultratovushli kavitatsiyani ajratish jarayoni uchun turli xil variantlarni taklif qiladi.
Ildiz hujayra izolyatsiyasi uchun to'g'ridan-to'g'ri sonication
To'g'ridan-to'g'ri sonikatsiya orqali ildiz hujayralarini izolyatsiya qilish jarayoni uchun ultrasonik shox (sonotrod, ultratovush uchi / prob) yog 'to'qimalariga botiriladi. Sonotrode orqali ultratovush to'lqinlari to'g'ridan-to'g'ri otolog yog'ga birlashtiriladi, shunda ultratovush kavitatsiyasi ildiz hujayralari va stromal hujayralarni qoldiq to'qimalardan chiqaradi. Hielscher sonikatorlari UP200Ht va UP200St sonotrode S26d14 bilan otolog ildiz hujayralarini davolash uchun keng tarqalgan tizimlar. To'g'ridan-to'g'ri sonikatsiya orqali stromal tomir fraktsiyasi izolyatsiyasi asosan toza xonalarda foydalanish uchun javob beradi.
Ildiz hujayra izolyatsiyasi uchun bilvosita sonikatsiya
Ildiz hujayralari autolog ilovalar uchun ishlatilganligi sababli, jarayonning sterilligi juda muhimdir. Shuning uchun, Hielscher bilvosita sonication kabi bir nechta variantni ishlab chiqdi GDmini2, VialTweeter va boshqa moslashtirilgan tizimlar. Bilvosita sonikatsiya orqali ultratovush to'lqinlari devor idishi orqali yog 'to'qimalariga birlashtiriladi. Stromal tomir fraktsiyasi (SVF) to'g'ridan-to'g'ri sonikatsiya paytida bo'lgani kabi ultratovushli kavitatsiya orqali yog 'to'qimasidan ajralib chiqadi.
Bilvosita sonikatsiya jarayoni hujayralarni yopiq idishda qayta ishlash uchun afzallik beradi ifloslanishsiz sharoitlar chunki ultratovush shoxini (sonotrode) kiritish orqali o'zaro ifloslanish xavfi yo'qoladi. Hujayra izolyatsiyasi steril jarayon sharoitlarini ta'minlaydigan yopiq tizimda amalga oshiriladi.
Hielscher Steril Sonicators haqida ko'proq o'qing!
Hielscher raqamli sonikatorlari sensorli displey yoki brauzer boshqaruvi orqali aniq boshqarilishi mumkin. Sonication protseduralari intuitiv menyu orqali oldindan o'rnatilishi mumkin. Ultrasonik qurilmalar avtomatik ma'lumotlarni yozib olish bilan jihozlangan (barcha sonikatsiya jarayoni ma'lumotlari o'rnatilgan SD-kartada saqlanadi). Ultrasonik quvvat kiritish hujayra izolyatsiyasi protokoliga to'liq moslashtirilishi mumkin.
VialTweeter sonikatori bir xil va tez steril namuna tayyorlash uchun steril gomogenizator hisoblanadi.
Adabiyot/Adabiyotlar
- Oberbauer, Eleni; Steffenhagen, Carolin; Wurzer, Christoph; Gabriel, Christian; Redl, Heinz; Wolbank, Susanne (2015): Enzymatic and non-enzymatic isolation systems for adipose tissue-derived cells: current state of the art. Cell Regeneration (2015) 4:7.
- Stadlmann, J., Taubenschmid, J., Wenzel, D. et al. (2017): Comparative glycoproteomics of stem cells identifies new players in ricin toxicity. Nature 549, 2017. 538–542
- Haghjoo M., Azarbayjani M.A., Peeri M., Hosseini S.A. (2019): Effect of Training, Hyaluronic Acid, and Mesenchymal Stem Cell Therapies on Osteocalcin Gene Expression in Cartilage Tissue of Rats with Knee Osteoarthritis. Gene Cell Tissue 6, 2019.
- Zhu M., Kong D., Tian R., Pang M. , Mo M., Cheng, Y., Yang G., Cheng H.L., Lei X., Fang K., Cheng B., Wu Y. (2020): Platelet sonicates activate hair follicle stem cells and mediate enhanced hair follicle regeneration. Journal of Cellular and Molecular Medicine 24, 2020. 1786–1794.
Bilishga arziydigan faktlar
Ildiz hujayralari nima?
Ildiz hujayralari - bu ko'p hujayrali organizmning bir xil turdagi cheksiz ko'proq hujayralarni ishlab chiqarish qobiliyatiga ega bo'lgan ajratilmagan hujayralari. Ular hayot va o'sishning dastlabki holatida tanadagi ko'plab turli hujayra turlariga aylanishning ajoyib salohiyati bilan tavsiflanadi. Ildiz hujayralarining eng ajralib turadigan xususiyati ularning hujayra bo'linishi orqali o'zini yangilash qobiliyati va maxsus funktsiyalarga ega bo'lgan to'qima yoki organga xos hujayralarga aylanish qobiliyatidir. Pluripotent ildiz hujayralari uchta jinsiy hujayraning har qandayiga farqlash imkoniyatiga ega: endoderma (oshqozon ichki qavati, oshqozon-ichak trakti, o'pka), mezoderma (mushak, suyak, qon, urogenital) yoki ektoderma (epidermal to'qimalar va asab tizimi).
Ichak va suyak iligi kabi ba'zi organlarda ildiz hujayralari eskirgan yoki shikastlangan to'qimalarni tiklash va almashtirish uchun muntazam ravishda bo'linadi. Boshqa organlarda, masalan, oshqozon osti bezi va yurak, ildiz hujayralari faqat maxsus sharoitlarda bo'linadi.
Regenerativ va estetik tibbiyotda ko'p qirrali terapevtik qo'llash uchun yuqori potentsialni taklif qiluvchi mezenximal stromal / ildiz hujayralari (MSC) asosan suyak iligida joylashgan, ammo ular boshqa to'qimalardan (masalan, xaftaga, yog ', mushak hujayralari) ajratilishi mumkin. ham. Mezenximal ildiz hujayralari o'z-o'zini yangilash qobiliyati bilan ajralib turadigan prototipli kattalar ildiz hujayralari deb hisoblanadi.
Ildiz hujayralarini tadqiq qilish va davolash usullari transplantatsiya (to'qima muhandisligi) uchun to'qimalar va organlarni etishtirish uchun ishlatiladi. Ildiz hujayralarini qo'llash uchun boshqa tibbiyot sohalari miya kasalliklarini davolashda (masalan, Parkinson va Altsgeymer kasalligi), hujayra etishmovchiligini davolashda, qon kasalliklarida (masalan, leykemiya), bo'g'imlar va xaftaga nasli (masalan, osteoartrit) hamda kosmetik muolajalarda mavjud. (masalan, qarishga qarshi muolajalar). Umuman olganda, ildiz hujayralari taxminan o'lchamga ega. Diametri 15-25 mikron.
mezenximal ildiz hujayralari (MSC) ko'p potentsial stromal hujayralar bo'lib, ular osteoblastlar (suyak hujayralari), xondrositlar (xaftaga hujayralari), miotsitlar (mushak hujayralari) va adipotsitlar (yog 'hujayralari) kabi turli xil hujayra turlariga farqlash qobiliyatiga ega.
Stromal tomir fraksiyasi (SVF) nima?
Stromal tomir fraksiyasi (SVF) lipoaspiratning tarkibiy qismi bo'lib, uni inson tanasidagi yog 'to'qimalaridan liposaktsiya yo'li bilan olish mumkin. Lipoaspirat hujayralarning heterojen aralashmasidan iborat bo'lib, yog'dan olingan ildiz hujayralari (ASC yoki ADSC) deb nomlanuvchi ildiz hujayralarining yuqori tarkibiga ega bo'lib, ular suyak iligi ildiz hujayralari bilan o'xshashliklarini ko'rsatadi, masalan, ularning ko'p urug'li hujayralarga ajralish qobiliyati.
Stromal tomir fraksiyasining heterojen populyatsiyasiga endotelial hujayralar, eritrotsitlar, fibroblastlar, limfotsitlar, monotsitlar/makrofaglar va peritsitlar kiradi, shuningdek, yog'dan olingan ildiz hujayralarining muhim qismi.
Yog 'oliy stromal / ildiz hujayralari (ASC) nima?
Yog 'oluvchi stromal / ildiz hujayralari (ASC / ADSC) epidermal o'sish omili (EGF), qon tomir endotelial o'sish omili (VEGF), asosiy fibroblast o'sish omili (bFGF), keratinotsitlar o'sish omili (KGF) kabi bioaktiv o'sish omillarini yuqori darajada chiqaradi. , trombotsitlardan hosil bo'lgan o'sish omili (PDGF), gepatotsitlar o'sish omili (HGF), o'sish omilini o'zgartiruvchi beta (TGF-b), insulin o'sish omili (IGF) va miyadan olingan neyrotrofik omil (BDNF). ACS nafaqat o'sish omillarini chiqaradi, balki fms bilan bog'liq tirozin kinaz 3 (Flt-3) ligand, granulotsitlar-koloniyalarni stimulyatsiya qiluvchi omil (G-CSF), granulotsitlar makrofag-koloniyalarini stimulyatsiya qiluvchi omil (GM-CSF), makrofag kabi sitokinlarni ham chiqaradi. -koloniyani ogohlantiruvchi omil (M-CSF), interleykin (IL) kabi IL-6, IL-7, IL-8, IL-11 va IL-12, leykemiya inhibitiv omil (LIF) va o'simta nekrozi omil-alfa (TNF-a).
Ildiz hujayra qanday chiqariladi?
Odamlardan avtolog kattalar ildiz hujayralarini quyidagi manbalardan olish mumkin:
- O'rim-yig'im bilan ekstraktsiyani talab qiladigan suyak iligi, ya'ni suyakka burg'ulash.
- Liposaktsiya orqali ekstraktsiyani talab qiladigan yog 'to'qimasi (lipid hujayralari).
- Aferez orqali ekstraktsiyani talab qiladigan qon, bunda donordan qon a orqali o'tadi “dializ” qonning boshqa tarkibiy qismlari donorga qaytarilganda ildiz hujayralari olinadigan mashina.