α-синуклеїнові фібрили і стрічки фрагментуються в наукових дослідженнях для створення менших фрагментів фібрил або навіть окремих білкових молекул, які можна легше проаналізувати за допомогою різних експериментальних методів. VialTweeter Sonicator є одним з найбільш часто використовуваних ультразвукових апаратів для ефективної та надійної фрагментації альфа-синуклеїну.

α-Синуклеїн в дослідженнях

Альфа-синуклеїнові фібрили - це білкові агрегати, які тісно пов'язані з нейродегенеративними розладами, такими як хвороба Паркінсона та певні форми деменції, включаючи деменцію з тілами Леві. Дослідження, зосереджені на альфа-синуклеїнових фібрилах, спрямовані на розуміння їх ролі в прогресуванні захворювання та розробку потенційних терапевтичних втручань. Розщеплюючи альфа-синуклеїнові фібрили на більш дрібні фрагменти, дослідники можуть досліджувати їх специфічні особливості будови. Наприклад, фрагментація альфа-синуклеїнових фібрил дозволяє дослідникам досліджувати їх взаємодію з іншими молекулами, такими як білки, ліпіди або невеликі молекули. Виробляючи менші фрагменти, місця зв'язування та спорідненість цих взаємодіючих партнерів можуть бути досліджені більш ефективно. Менші α-Syn фрібрили та стрічки також можуть демонструвати змінену токсичність та біохімічні ефекти. Тому надійна та ефективна техніка фрагментації, яка дає відтворювані результати при швидкій та простій обробці зразків, має вирішальне значення.
Ультразвукова альфа-синхронна фрагментація: Ультразвуковий пристрій VialTweeter - це встановлена ультразвукова система підготовки зразків, яка обробляє до 10 флаконів одночасно в абсолютно однакових умовах. Програмовані налаштування дозволяють проводити просте і швидке повторне виконання одних і тих же експериментів, що дає високонадійні і відтворювані результати при фрагментації фібрил альфа-синуклеїну.

α-Synuclein Sample Preparation за допомогою звукогенератора

Один підхід до вивчення альфа-синуклеїнових фібрил передбачає їх вилучення та фрагментацію за допомогою таких методів, як ультразвукова обробка. Ультразвукова обробка - це процес, який використовує високоінтенсивні, низькочастотні ультразвукові хвилі для порушення та розщеплення білкових агрегатів, що призводить до вивільнення менших фібрил або окремих білкових молекул. Sonicator VialTweeter є широко використовуваним пристроєм у дослідженнях, пов'язаних з α-синуклеїном, для цієї мети.

Численні дослідження описують точні протоколи підготовки зразків ультразвукової обробки альфа-синуклеїнових фібрил, які використовують Hielscher VialTweeter для ефективної та надійної фрагментації α-синуклеїнових фібрил. Фрагментуючи фібрили ультразвуково, дослідники можуть проаналізувати отримані продукти та вивчити їх структуру, токсичність та взаємодію з іншими молекулами. Це дослідження дає важливе уявлення про механізми, що лежать в основі нейродегенерації, і потенційно визначає нові терапевтичні цілі. Добре зарекомендували себе протоколи ультразвукової обробки α-синуклеїнів, що використовують ультразвуковий пристрій VialTweeter, дозволяють отримати надійні та відтворювані результати.

Верхні зображення: нефрагментовані альфа-синуклеїнові фібрили
Нижчі зображення: Ультразвуково фрагментовані альфа-синуклеїнові фібрили за допомогою ультразвукового пристрою VialTweeter
(дослідження та зображення: ©Dieriks et al., 2022)

Ультразвукова фрагментація α-синуклеїнових фібрил – Протоколи

Оскільки численні дослідники використовують ультразвуковий апарат VialTweeter як бажану техніку фрагментації для отримання однорідних фрагментів α-синуклеїнових фібрил, встановлені протоколи легко доступні. Нижче ви можете знайти кілька зразкових протоколів фрагментації.
 

 
Підготовка насіння ClearTau: Фібрили ClearTau були розведені до 10 мкМ в dH2O і ультразвуковою обробкою з амплітудою 70% протягом 50 с з циклом 1 s ON 1 s OFF в трубці за допомогою ультразвукового апарату UP200St з VialTweeter. Для насіння була характерна електронна мікроскопія.
Вимірювання флуоресценції ThS: Фібрили ClearTau були розведені до 2,5 мкМ в dH2O і ультразвуковою обробкою з амплітудою 70% протягом 50 с з циклом 1 с ON 1 s OFF в трубці за допомогою UP200St з VialTweeter. В якості контролю використовувався повнорозмірний мономер тау 4R2N 2, 5 мкМ. До реакції 100 мкл було додано 100 мкл ThS (10 мкМ), отримавши кінцеву концентрацію білка 1,25 мкМ. Одноразова точкова флуоресценція ThS була виміряна за допомогою 96 добре прозорих нижніх пластин, встановлених в мікропланшетному зчитувачі FLUOstar Omega з порушенням при 445 нм і випромінюванням при 485 нм.
(пор. Лиморенко та ін., 2023)
 
Рівномірна довжина α-синуклеїну за допомогою ультразвукової обробки: Неоднорідність довжини α-син фібрил і стрічок була зменшена ультразвуком протягом 20 хв на льоду в 2-мл трубках Еппендорфа в VialTweeter, встановленому при 75% амплітуді, 0,5 с імпульсів.
(пор. Буссе та ін., 2013)
 
Проведено контроль якості людських рекомбінантних мономерних WT або S129A a-Syn та фібрилярних поліморф, які вони генерують, а також a-Syn 1–110. Згодом фібрилярні поліморфи були фрагментовані ультразвуком протягом 20 хв у трубках Eppendorf 2-мл у ультразвуковому апараті VialTweeter для генерації фібрилярних частинок із середнім розміром 42-52 нм, які підходять для ендоцитозу.
(пор. Шрівастава та ін., 2020)
 

Характеристика п'яти фібрилярних α-син поліморфів. (A) Показані трансмісійні електронні мікрофотографії негативно забарвлених фібрилярних поліморфів α-Syn фібрил, стрічок, фібрил-91, фібрил-65 та фібрил-110 до (верхня смуга) та після фрагментації за допомогою VialTweeter (нижня смуга). (B) Показано розподіл довжин фрагментованих фібрилярних поліморфів. Вказано кількість (n) фібрилярних збірок, з яких були отримані гістограми.
(дослідження та зображення: Шрівастава та ін., 2020)

 
Фібрили α-Syn були фрагментовані ультразвуком протягом 20 хв у 2 мл трубках Eppendorf у VialTweeter для генерації фібрилярних частинок із середнім розміром 42-52 нм за оцінкою аналізу TEM.
(пор. Негріні та ін., 2022)
 
Ресуспендовані фібрили91 (в PBS) були фрагментовані перед додаванням до клітинних культур ультразвуком протягом 20 хв у трубках Eppendorf 2 мл за допомогою ультразвукового пристрою Vial Tweeter, аліцитованого, спалаху, замороженого в рідкому азоті і зберігається до використання при -80 ̊C.
(пор. Vajhøj et al., 2021)
 

VialTweeter і лабораторні ультразвукові апарати для фрагментації α-Syn

Hielscher Ultrasonics є всесвітньо визнаним провідним виробником передових ультразвукових апаратів. Наші ультразвукові апарати, яким довіряють і зарекомендували себе у великих дослідницьких лабораторіях по всьому світу, пропонують неперевершену якість і продуктивність для ваших критичних експериментів.
З Hielscher VialTweeter та будь-яким іншим звуковим апаратом Hielscher ви відчуєте неперевершений комфорт користувача, оскільки вони продумано розроблені для відтворюваних результатів, простоти використання та безперебійної роботи. Завдяки функціям автоматичного запису даних ви можете зосередитися на своїх дослідженнях, тоді як наші ультразвукові апарати ретельно записують важливі дані для відтворюваності та точності.
Досягайте послідовних і відтворюваних результатів з упевненістю!
Наші ультразвукові апарати розроблені та виготовлені в Німеччині. Німецька точність та найвища інженерна якість забезпечують надійну та точну підготовку зразків, таку фрагментацію альфа-синуклеїнових фібрил кожного разу. Більше не турбуйтеся про суперечливі результати - наша ультразвукова технологія гарантує, що ваші дослідження залишаються на передньому краї наукового прогресу.
Але і це ще не все! Наше прагнення до досконалості виходить за рамки нашої продукції. Ми пишаємося нашим винятковим обслуговуванням клієнтів, надаючи експертну підтримку для вирішення будь-яких запитів або проблем, які у вас можуть виникнути. Наша спеціальна команда тут, щоб допомогти вам на кожному кроці вашої дослідницької подорожі, гарантуючи, що ви отримаєте максимальну віддачу від наших ультразвукових апаратів.
Виберіть інновації, надійність та винятковий досвід користувача - виберіть наші лабораторні ультразвукові апарати, такі як VialTweeter для фрагментації альфа-синуклеїнових фібрил. Скористайтеся вже встановленими протоколами та поповніть ряди провідних дослідників, які довіряють нашій технології для своїх критичних досліджень. Підніміть свої дослідження та досліджуйте нові рубежі в дослідженнях деменції та нейродегенеративних захворювань за допомогою наших найсучасніших ультразвукових апаратів.

Дизайн, виробництво та консалтинг – Якість виробництва Німеччини

Hielscher ультраакукатори добре відомі своїми найвищими стандартами якості та дизайну. Надійність і проста експлуатація дозволяють плавно інтегрувати наші ультразвукові апарати в промислові об'єкти. Грубі умови та вимогливе середовище легко обробляються ультразвуковими апаратами Hielscher.

Hielscher Ultrasonics є сертифікованою компанією ISO і приділяє особливу увагу високопродуктивним ультразвуковим апаратам, що відрізняються найсучаснішими технологіями та зручністю у використанні. Звичайно, ультразвукові апарати Hielscher відповідають вимогам CE та відповідають вимогам UL, CSA та RoHs.
 
У таблиці нижче наведено приблизну потужність обробки наших ультразвукових апаратів лабораторного розміру: