Elucija protiteles z ultrazvočno razbijanjem z visoko zmogljivim ultrazvočnim razbijanjem

Afinitetna kromatografija je močna tehnika za čiščenje beljakovin, ki zahteva Ultrazvočno podprta nespecifična elucija je zanesljiva tehnika priprave vzorcev za pridobivanje protiteles iz afinitete kromatografije. Učinkovito in ponovljivo izpiranje ciljnih protiteles, vezanih na afiniteto, se znatno izboljša z ultrazvočno razbijanjem. Visoko zmogljiv ploščni zvočni UIP400MTP je optimalno primeren za eluiranje visokega števila vzorcev v 96-kanalnih, mikrotitrskih in večjamskih ploščah ter olajša okrevanje protiteles pri afiniteti kromatografiji.

Kako Sonication olajša Elution?

Z uporabo ultrazvočno ojačane nespecifične elucije lahko laboratorijski delavci in znanstveniki učinkovito obnovijo očiščena protitelesa iz kolon afinitetne kromatografije. Ta prečiščena protitelesa se izvajajo prek nadaljnjih aplikacij na različnih področjih, kot so imunologija, biotehnologija in medicinska diagnostika.

Elucija je korak priprave vzorca, ki se običajno uporablja za afiniteto kromatografijo: Afiniteta Kromatografija izkorišča zelo specifične interakcije med ciljno molekulo (kot je protitelo) in ligandom, imobiliziranim na kromatografski matriki. To omogoča selektivno čiščenje ciljne molekule iz kompleksne zmesi z uporabo specifične afinitete vezave molekul, npr. protiteles.
Specifična vezava protiteles: Protitelesa se pogosto očistijo s kromatografijo afinitete, kjer se selektivno vežejo na ligand, imobiliziran na kromatografski smoli. To je lahko antigen, protein A / G ali katera koli druga molekula, ki deluje specifično z želenim protitelesom.
Elucija: Po vezavi ciljnega protitelesa na matrico naslednji korak vključuje eluiranje (ali izpiranje) vezanega protitelesa iz smole. Ta korak elucije običajno vključuje prekinitev specifične vezave med protitelesi in ligandom. Ta korak je mogoče opremiti z ultrazvočno razbijanjem.
Ultrazvočna sonda UP50H je laboratorijski homogenizator, ki se pogosto uporablja kot motilec celic, razpršilec in emulgator v laboratorijih.Ultrazvočno podprta nespecifična elucija: Za razliko od specifičnih metod elucije, ki motijo samo interakcijo med protitelesi in ligandi, nespecifične metode elucije motijo vse interakcije na smoli, vključno z nespecifičnimi. To je lahko koristno pri ravnanju z močno vezanimi onesnaževalci, ki bi lahko motili proces čiščenja. Tukaj pride v igro ultrazvočno razbijanje! Ultrazvočni valovi se uporabljajo za ustvarjanje kavitacijskih mehurčkov v elucijskem pufru. Ko se ti mehurčki zrušijo v bližini smolne matrice, proizvajajo intenzivne lokalizirane strižne sile in mikrostreaming. Ta mehanska motnja pomaga prekiniti nespecifične interakcije med protitelesi in ligandom, kar olajša izpiranje vezanega protitelesa iz matrice.

96-kanalne plošče in druge plošče z več vrtinami je najbolje obdelati z uporabo Sonicator UIP400MTP. Ta ultrazvočni sistem je idealen za lizo, fragmentacijo DNA in obdelavo vzorcev za obdelavo topnosti celic v visoko zmogljivih vzorcih.

Visoko zmogljiv zvočni UIP400MTP olajša izpiranje protiteles in beljakovin

Prošnja za informacije




Upoštevajte naše Politika zasebnosti.


 

Ta vadnica pojasnjuje, katera vrsta sonikatorja je najboljša za vaše naloge priprave vzorcev, kot so liza, motnje celic, izolacija beljakovin, fragmentacija DNK in RNA v laboratorijih, analize in raziskave. Izberite idealno vrsto sonikatorja za vašo aplikacijo, volumen vzorca, številko vzorca in prepustnost. Hielscher Ultrasonics ima idealen ultrazvočni homogenizator za vas!

Kako najti popoln Sonicator za motnje celic in ekstrakcijo beljakovin v znanosti in analizi

Video sličica

 

Prednosti ultrazvočne elucije z ultrazvočno ultrazvočno razbijanjem

Ultrazvočna elucija ponuja številne prednosti, zlasti v kontekstu tehnik čiščenja beljakovin, kot je kromatografija afinitete.
Na primer, ultrazvočno razbijanje odlikuje alternativne metode v smislu celovitosti beljakovin, okrevanja, čistosti, vsestranskosti in učinkovitosti. Zaradi teh prednosti je ultrazvočna elucija prednostna izbira za procese čiščenja beljakovin, zlasti v aplikacijah, kjer je ohranjanje strukture in aktivnosti beljakovin bistvenega pomena. Poleg tega ultrazvočna elucija izstopa zaradi svoje preprostosti, učinkovitosti, vsestranskosti in združljivosti s široko paleto beljakovin in afinitetnih matrik. Z uporabo ultrazvočnih valov za prekinitev interakcij med beljakovinami in matrico, ultrazvočna elucija ponuja nežno in hitro metodo za čiščenje beljakovin, ki zagotavlja visoke stopnje okrevanja in ohranja celovitost beljakovin za nadaljnje aplikacije.

Nežnejši do strukture beljakovin: Izpiranje z nizkim pH vključuje uporabo kislih puferjev za prekinitev vezave med ciljno beljakovino (npr. Protitelesi) in matrico afinitete. Vendar pa lahko izpostavljenost nizkemu pH denaturira beljakovine, kar lahko ogrozi njihovo strukturo in biološko aktivnost. V nasprotju s tem se ultrazvočna elucija opira predvsem na mehanske motnje in ne na kemično denaturacijo, zaradi česar je nežnejša do strukture beljakovin. To je še posebej koristno pri čiščenju občutljivih beljakovin ali protiteles, občutljivih na spremembe pH.

  • Zmanjšano tveganje za združevanje: Izpiranje z nizkim pH lahko poveča tveganje za agregacijo beljakovin zaradi razvijanja beljakovin in izpostavljenosti hidrofobnim regijam. Agregacija lahko privede do izgube aktivnosti beljakovin in težav pri nadaljnji predelavi. Ultrazvočna elucija, za primerjavo, zmanjšuje tveganje za agregacijo z uporabo mehanskih sil za prekinitev interakcij med beljakovino in matrico afinitete, ne da bi bistveno spremenila naravno konformacijo beljakovin.
  • Izboljšana predelava in čistost: Ultrazvočna elucija lahko doseže višje stopnje predelave in stopnje čistosti v primerjavi z alternativnimi metodami izpiranja. Mehanska motnja, ki jo zagotavlja ultrasonication, učinkovito sprošča vezane beljakovine iz matrice afinitete, hkrati pa zmanjšuje nespecifične interakcije. Rezultat tega je povečana rekuperacija ciljne beljakovine z zmanjšano kontaminacijo z nespecifično vezanimi molekulami, kar prispeva k večji čistosti eluirane frakcije.
  • Visoko zmogljiva obdelava: Hielscher Ultrasonics ponuja različne zvočnike za ultrazvočno podprto čiščenje beljakovin, elucijo in biopanning. Mikrotitrska plošča-sonikator UIP400MTP omogoča množično obdelavo vzorcev v 96-kanalnih in drugih večjamskih ploščah. VialTweeter je idealen za brezskrbno in sočasno ultrazvočno razbijanje do 10 cevi, kot so viale Eppendorf, pod enakimi pogoji. CupHorn je vsestranski sonicator, idealen za več cevi, majhne čaše in druga plovila. In seveda, klasični sondni sonikatorji z mikronasveti so dobro uveljavljeno laboratorijsko orodje za pripravo vzorcev. Hielscher Ultrasonics paleta izdelkov ima idealno ultrazvočno napravo za vašo nastavitev eksperimenta in velikost vzorca.
  • Vsestranskost in združljivost: Ultrazvočna elucija je združljiva s široko paleto beljakovin in afinitetnih matrik, ki ponujajo vsestranskost v aplikacijah čiščenja. Nasprotno pa izpiranje z nizkim pH morda ni primerno za nekatere beljakovine, ki so občutljive na kisla stanja, ali za afinitete matrice, ki so nagnjene k razgradnji ali izpiranju pri nizkem pH. Ultrazvočna elucija zagotavlja nežno in univerzalno uporabno alternativo, ki jo je mogoče prilagoditi specifičnim potrebam čiščenja, ne da bi pri tem ogrozili celovitost beljakovin ali stabilnost matrice.
  • Čas in učinkovitost: Ultrazvočna elucija običajno zahteva krajše čase elucije v primerjavi z drugimi metodami elucije. Hitro in učinkovito sproščanje vezanih beljakovin, ki ga olajša ultrasonication, zmanjša čas obdelave in poveča splošno učinkovitost čiščenja, zaradi česar je privlačna možnost za visoko zmogljive aplikacije ali kadar so potrebni časovno občutljivi rezultati.
96-kanalni ploščni Sonicator UIP400MTP za lizo celic, ekstrakcijo DNA, fragmentacijo DNA, topnost celic in čiščenje beljakovin.

96-kanalni ploščni zvočni UIP400MTP za ultrazvočno razbijanje večjamskih plošč, plošč PCR in ELISA

 

VialTweeter na ultrazvočnem procesorju UP200ST

VialTweeter sonikator za sočasno ultrazvočno razbijanje 10 vzorcev, npr. za prekinitev celic in ekstrakcijo beljakovin

Ultrazvočno podprto biopanning

Biopanning je kritična tehnika pri čiščenju protiteles, zlasti kadar je treba pridobiti zelo specifična protitelesa za raziskave ali medicinsko diagnostiko. Biopanning je proces, pri katerem so protitelesa izolirana iz mešanice protiteles, tako imenovane knjižnice protiteles.

Kako deluje Ultrasonic Biopanning?

Začne se s knjižnico protiteles, mešanico različnih protiteles. Za vsako protitelo je značilna lastna edinstvena oblika in specifičnost. Za analizo in terapevtike je treba izolirati specifična protitelesa, ki prepoznajo določeno tarčo, kot je virus ali rakava celica. Z uporabo biopanninga lahko ta specifična protitelesa izoliramo. Ultrasonication pomaga olajšati proces biopanninga, zaradi česar je čiščenje protiteles učinkovitejše.

Začenši s knjižnico protiteles, so protitelesa običajno prikazana na površini bakteriofagov, celic kvasovk ali drugega prikazovalnega sistema. Ta knjižnica predstavlja raznoliko paleto protiteles.
V prvem koraku je ta knjižnica izpostavljena vaši ciljni molekuli. Protitelesa, ki se vežejo na tarčo, se bodo držala, druga pa se bodo izprala. Za odstranitev nevezanih protiteles vzorce večkrat speremo s pufersko raztopino.

Zdaj imamo vzorce, ki vsebujejo samo vezana protitelesa. Vendar to pomeni, da so protitelesa še vedno pritrjena na njihov prikazovalni sistem. Da bi jih osvobodili, je treba prekiniti interakcijo med protitelesi in ligandi. Ta korak je znan kot elucija. Vzorce lahko eluiramo z raztopino, ki moti vezavo, npr. z uporabo specifičnega elucijskega pufra, kaotropnega, znižanja pH vrednosti, uporabe toplote itd. Te tehnike elucije uničijo vezavo protiteles in ligandov, lahko pa tudi poslabšajo sama protitelesa. Zato se ultrazvočno razbijanje uporablja kot alternativna tehnika za nežno odstranjevanje protiteles iz tarče.

Po končanem koraku elucije dobimo očiščena protitelesa, pripravljena za uporabo v raziskavah, diagnostiki ali terapiji.

Biopanning je močna tehnika čiščenja protiteles in ultrazvočna elucija olajša in poveča učinkovitost – kar povzroči visoko prečiščena, nepoškodovana protitelesa. Ultrazvočno biopanning omogoča znanstvenikom, da izolirajo zelo specifična protitelesa iz kompleksnih vzorcev, kar odpira vrata širokemu spektru aplikacij.

Sonikatorji za čiščenje protiteles

Hielscher sonicators so dobro uveljavljena orodja, ki se uporabljajo v najboljših raziskovalnih ustanovah po vsem svetu. Hielscherjevi sonikatorji, cenjeni zaradi najsodobnejšega oblikovanja in vrhunske zmogljivosti, veljajo za nepogrešljiva laboratorijska orodja na področju biotehnologije in molekularne biologije. Hielscher Ultrasonics ponuja sonicators za en vzorec, kot tudi visoko zmogljivo pripravo vzorca, ki olajšajo učinkovito čiščenje protiteles in elucijo ciljno vezanih molekul, in omogočajo učinkovito biopanning za natančno in hitro izolacijo specifičnih protiteles.
V kontekstu čiščenja protiteles Hielscher sonicatorji odlikujejo olajšanje korakov pranja in izpiranja z učinkovitim odstranjevanjem nevezanih protiteles, hkrati pa ohranjajo celovitost kompleksov, vezanih na cilj. Njihov natančen nadzor in razširljivost omogočata prilagojene pogoje obdelave, kar zagotavlja optimalne rezultate čiščenja v širokem razponu volumnov in kompleksnosti vzorcev.
Hielscher sonicatorji predstavljajo tehnološke inovacije v ultrazvočni obdelavi, ki ponujajo neprimerljive zmogljivosti za čiščenje protiteles, elucijo in biopanning. S svojo natančnostjo, zanesljivostjo in enostavnostjo delovanja različni ultrazvočni sistemi ponujajo optimalno učinkovitost in vsestranskost za biofarmacevtske raziskave, diagnostiko in terapijo.
Pišite nam zdaj, če želite izvedeti več o Hielscher zvočnih napravah za čiščenje protiteles, elucijo in biopanning! Naše izkušeno tehnično osebje z veseljem razpravlja o vaši aplikaciji, povezani s protitelesi!

Zakaj Hielscher Ultrazvočna?

  • visoka učinkovitost
  • Najmotejša tehnologija
  • zanesljivost & robustnost
  • nastavljiv, natan en nadzor procesov
  • serije & v vrsti
  • za vsako količino
  • Inteligentna programska oprema
  • pametne funkcije (npr. programiranje, podatkovno protokoliranje, daljinski upravljalnik)
  • Enostavna in varna za delovanje
  • Nizki stroški vzdrževanja
  • CIP (čisto mesto)

Prošnja za informacije




Upoštevajte naše Politika zasebnosti.


Oblikovanje, izdelava in svetovanje – Kakovost izdelana v Nemčiji

Hielscher ultrasonicatorji so dobro znani po svojih najvišjih standardih kakovosti in oblikovanja. Robustnost in enostavno delovanje omogočata nemoteno vključitev naših ultrazvočnihtorjev v industrijske objekte. Z grobimi pogoji in zahtevnimi okolji lahko ravnajo Hielscher ultrasonicatorji.

Hielscher Ultrasonics je iso certificirano podjetje in dal poseben poudarek na visokozmogiji ultrasonicators, ki vključujejo najmotejšo tehnologijo in prijaznost uporabnika. Seveda, Hielscher ultrasonicators so CE skladni in izpolnjujejo zahteve UL, CSA in RoHs.

Kontaktiraj nas! / Vprašajte nas!

Vprašajte za več informacij

Prosimo, uporabite spodnji obrazec, da zahtevate dodatne informacije o ultrazvočnih procesorjih, aplikacijah in ceni. Z veseljem se bomo z vami pogovorili o vašem procesu in vam ponudili ultrazvočni sistem, ki izpolnjuje vaše zahteve!









Prosimo, upoštevajte naše Politika zasebnosti.


Video prikazuje ultrazvočni sistem za pripravo vzorcev UIP400MTP, ki omogoča zanesljivo pripravo vzorca vseh standardnih večglasnih plošč z uporabo ultrazvoka visoke intenzivnosti. Tipične aplikacije UIP400MTP vključujejo celično lizo, DNK, RNK in kromatin omejevanje, kot tudi ekstrakcijo beljakovin.

Ultrasonicator UIP400MTP za multi-dobro sonication plošče

Video sličica

Primerjava ultrazvočne elucije s tradicionalnimi tehnikami elucije

  1. Gradientna elucija: Pri gradientni eluciji se vezavna trdnost med ciljno beljakovino in afiniteto matrico postopoma zmanjšuje s spremembo sestave elucijskega pufra. To lahko vključuje spreminjajoče se dejavnike, kot so pH, koncentracija soli ali koncentracija konkurenčnih ligandov. Gradientna elucija omogoča fino nastavitev pogojev elucije za selektivno sproščanje ciljne beljakovine, hkrati pa zmanjšuje nespecifično vezavo.
    Prednosti ultrazvočne elucije: Ultrazvočna elucija ponuja hitrejše in enakomernejše sproščanje vezanih beljakovin v primerjavi z gradientno elucijo. Medtem ko gradientna elucija zahteva skrbno optimizacijo in spremljanje pogojev elucije, ultrazvočna elucija zagotavlja enostavnejšo in učinkovitejšo metodo za obnovitev beljakovin.
  2. Konkurenčna elucija: Pri konkurenčnem izpiranju se v elucijski pufer vnese visoka koncentracija konkurenčnega liganda, da se prekine vezava med ciljno beljakovino in afiniteto matrico. Konkurenčni ligand tekmuje s ciljnim proteinom za vezavna mesta na matriksu, s čimer izpodrine beljakovino in jo sprosti v izlužek.
    Prednosti ultrazvočne elucije: Ultrazvočna elucija ponuja nežnejšo in bolj vsestransko alternativo konkurenčni eluciji. Kompetitivno izpiranje lahko zahteva uporabo visokih koncentracij kaotropnih sredstev (tj. sotopljenca, ki prekine mrežo vodikove vezi med molekulami vode in zmanjša stabilnost naravnega stanja beljakovin z oslabitvijo hidrofobnega učinka) ali ostrih kemikalij, ki lahko vplivajo na stabilnost in aktivnost beljakovin. V nasprotju s tem ultrazvočna elucija zagotavlja mehanske motnje brez potrebe po dodatnih kemičnih sredstvih, ohranjanju celovitosti beljakovin in zagotavljanju visokih stopenj okrevanja.
  3. Temperaturno povzročena elucija: Temperaturno povzročena elucija vključuje spremembo temperature elucijskega pufra, da se prekine vezava med ciljno beljakovino in matrico afinitete. To je mogoče doseči s povečanjem ali znižanjem temperature, odvisno od specifične interakcije protein-matriks.
    Prednosti ultrazvočne elucije: Ultrazvočna elucija ponuja hitrejšo in nadzorovano metodo za izpiranje beljakovin v primerjavi z metodami, ki jih povzroča temperatura. Medtem ko lahko temperaturno povzročena elucija zahteva natančen nadzor temperaturnih gradientov in daljše čase ravnotežja, ultrazvočna elucija zagotavlja takojšnje mehanske motnje, kar ima za posledico krajše čase elucije in izboljšano učinkovitost.
  4. Encimska elucija: Encimska elucija uporablja specifične encime, ki razcepijo vezi med ciljno beljakovino in matrico afinitete ter sproščajo beljakovine v eluat. Ta metoda je še posebej uporabna za beljakovine, ki so tesno vezane na matriks, ali za aplikacije, ki zahtevajo natančen nadzor nad pogoji elucije.
    Prednosti ultrazvočne elucije: Ultrazvočna elucija ponuja neencimsko in brez kemikalij alternativo encimski eluciji. Medtem ko encimska elucija lahko zahteva optimizacijo koncentracije encimov, časa inkubacije in pH pogojev, ultrazvočna elucija zagotavlja preprosto in splošno uporabno metodo za obnovitev beljakovin brez potrebe po dodatnih reagentih ali specializirani opremi.
Sonicator za visoko zmogljivo pripravo vzorcev! Sonikator UIP400MTP plošče olajša lizo, ekstrakcijo beljakovin, fragmentacijo DNA in celično topnost bioloških vzorcev v 96-kanalnih ploščah.

Plošča sonikator UIP400MTP za vse 96-kanalne plošče, mikrotitrske plošče in plošče z več jamicami.



Literatura/reference


Ultrazvočne visoke zmogljivosti! Paleta izdelkov Hielscher zajema celoten spekter iz kompaktnega laboratorijskega ultrazvočnikatorja nad enotami na vrhu klopi do polnoindustrijskih ultrazvočnih sistemov.

Hielscher Ultrasonics proizvaja visoko zmogljivost ultrazvočnih homogenizatorjev iz laboratorij do industrijske velikosti.


Z veseljem bomo razpravljali o vašem procesu.

Pojdiva v stik.