Замените скребок ячеек на высокопроизводительный ультразвуковой аппарат UIP400MTP

Отделение и извлечение адгезивных клеточных линий из многолуночных планшетов для мультиомического анализа является ежедневной задачей в лабораториях. Высокопроизводительная отслойка клеток с использованием многолуночного планшетного ультразвукового аппарата UIP400MTP заменяет ручной соскоб клеток, что приводит к более высокому выходу РНК, общих липидов и общих полярных метаболитов. Новый метод объединяет ультразвуковой аппарат Hielscher UIP400MTP с рабочей станцией Beckman Coulter i7 для работы с жидкостями, обеспечивая высокую производительность, воспроизводимость и эффективность обработки клеток для экстракции РНК, метаболитов и липидов. Представленный метод превосходит традиционные методы ручного соскабливания ячеек за счет достижения превосходной воспроизводимости и выхода при различных типах клеток и экспериментальных условиях.

Оптимизируйте отслойку клеток с помощью ультразвукового аппарата Microplate Sonicator UIP400MTP

Адгезивные системы клеточных культур играют решающую роль в токсикологических и биомедицинских исследованиях. В этом контексте Cruchley-Fuge et al. (2024) рассмотрели важную проблему в проекте PrecisionTox, направленном на использование омиксных технологий для оценки химической опасности. Проект был направлен на высокопроизводительный анализ тысяч образцов, обработанных различными химическими веществами. Чтобы удовлетворить этот спрос, исследователи разработали автоматизированный рабочий процесс, сочетающий ультразвуковой UIP400MTP с установленными протоколами двухфазной экстракции для анализа жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (LC-MS). В их исследовании оценивается эффективность многолуночного ультразвукового аппарата UIP400MTP в отсоединении адгезивных клеток по сравнению с ручным соскабливанием и другими традиционными методами.

Оптимизация мультиомики: автоматизированное извлечение адгезивных клеток с помощью UIP400MTP

Исследовательская группа Лауры Кратли-Фуге из Бирмингемского университета использовала три человеческие клеточные линии: HepG2 (клетки рака печени), HepaRG (дифференцированные гепатоцитоподобные клетки) и H295R (клетки рака надпочечников). Эти клетки культивировали в 24-луночных и 96-луночных планшетах и подвергали воздействию исследуемых химических веществ, таких как афлатоксин B1 и форсколин.

Экспериментальный дизайн:

• Этап 1: Оптимизация настроек мощности ультразвукового аппарата UIP400MTP и сравнение с ручным скребком ячеек и звуковыми водяными банями. Клетки HepG2 использовали для оценки восстановления РНК, метаболитов и липидов.
• Этап 2: Интеграция UIP400MTP в рабочий процесс двухфазной экстракции с использованием системы Beckman Coulter i7. Валидация проводилась с использованием клеток HepaRG и H295R.

Рабочий процесс экстракции: Рабочий процесс включал в себя воздействие химических веществ в многолуночных планшетах, отделение клеток с помощью UIP400MTP и двухфазную экстракцию с помощью шкалы Блая & Дайер (B&Г) метод. Анализ ЖХ-МС проводили с помощью аппарата Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120 на липофильные и полярные соединения. В&Метод D, золотой стандарт количественного определения липидов, включает в себя двухступенчатую экстракцию метанолом, хлороформом и водой, за которой следует количественное определение липидов в фазе хлороформа.

UIP400MTP микропланшетный ультразвуковой аппарат способствует отсоединению адгезивных клеточных линий от многолуночных планшетов и чашек Петри

Результаты:

• Этап 1: Были определены оптимальные условия ультразвука при 60% мощности.
  Этот UIP400MTP обеспечил самое высокое восстановление РНК с исключительной воспроизводимостью по сравнению с ручным выскабливанием и звуковыми ваннами.
  Восстановление полярных метаболитов было одинаковым во всех методах, в то время как восстановление липидов заметно превосходило UIP400MTP.
• Этап 2: Валидация на клетках HepaRG и H295R продемонстрировала высокую воспроизводимость в данных липидомики и метаболомики, о чем свидетельствуют плотно сгруппированные баллы PCA.
  Лечение афлатоксином B1 и форсколином было эффективно дифференцировано от контрольной группы, что подчеркивает чувствительность и надежность метода.

“Ультразвуковое устройство Hielscher UIP400MTP обеспечивает высококачественный и воспроизводимый альтернативный подход к «золотому стандарту» ручного соскабливания клеток, что приводит к более высокому выходу РНК, общих липидов и общих полярных метаболитов.” (Cruchley-Fuge et al., 2024)

Cruchley-Fuge et al. подчеркивают преимущества ультразвукового аппарата UIP400MTP для обработки адгезивных клеток. Заменяя ручной скрейпинг, этот метод повышает воспроизводимость, производительность и выход, что делает его бесценным инструментом для крупномасштабных исследований, таких как PrecisionTox. Интеграция UIP400MTP в автоматизированные рабочие процессы не только снижает вариативность, но и оптимизирует трудоемкие процессы, обеспечивая высококачественный мультиомиксный сбор данных.

Работа Cruchley-Fuge et al. (2024) облегчает и оптимизирует обработку адгезивных клеточных культур для мультиомиксного анализа. Интеграция ультразвукового аппарата UIP400MTP с автоматизированными рабочими процессами обеспечивает стабильную и эффективную подготовку образцов, что делает его идеально подходящим для токсикологических исследований с высокой пропускной способностью.
 

Проектирование, производство и консалтинг – Качество «Сделано в Германии»

Ультразвуковые аппараты Hielscher хорошо известны своими высочайшими стандартами качества и дизайна. Надежность и простота в эксплуатации позволяют без проблем интегрировать наши ультразвуковые аппараты в промышленные объекты. Ультразвуковые аппараты Hielscher легко справляются с суровыми условиями и требовательными условиями окружающей среды.

Hielscher Ultrasonics является компанией, сертифицированной по стандарту ISO, и уделяет особое внимание высокопроизводительным ультразвуковым аппаратам, отличающимся самыми современными технологиями и удобством в использовании. Конечно, ультразвуковые аппараты Hielscher соответствуют требованиям CE и соответствуют требованиям UL, CSA и RoHs.