Ультразвуковое открепление клеток

Ультразвуковое открепление клеток – высокоэффективный и надежный метод подготовки образцов, используемый в различных областях клеточной биологии и биотехнологии. С помощью ультразвуковых волн аппарат для многолуночных планшетов UIP400MTP открепляет адгезивные клетки от поверхностей для культивирования и подготавливает клеточные суспензии для последующих применений. Обработка ультразвуком имеет ряд преимуществ перед традиционными ферментативными, химическими и механическими методами открепления, что делает ее ценным инструментом для исследователей.

Принцип ультразвукового открепления клеток

Ультразвуковое открепление клеток основано на использовании мощного ультразвука для нарушения взаимодействий между клетками и субстратом, к которому они прикреплены. Ультразвуковые волны создают микропузырьки, акустическую кавитацию и колебания в культуральной среде, вызывая механические силы, которые мягко, но эффективно открепляют клетки. Этот процесс обычно выполняют с помощью бесконтактного ультразвукового аппарата UIP400MTP для многолуночных планшетов.

Ниже приведен пример инструкции по откреплению клеток с использованием ультразвукового аппарата UIP400MTP для многолуночных планшетов.
 

Оборудование и материалы для ультразвукового открепления клеток

• Бесконтактный ультразвуковой аппарат UIP400MTP для многолуночных планшетов: Этот высокопроизводительный ультразвуковой аппарат является основным инструментом. Ультразвуковой аппарат UIP400MTP для планшетов подходит для любых стандартных многолуночных и микротитрационных планшетов, а также для чашек Петри. Ультразвуковые волны обеспечивают механическую энергию, необходимую для открепления клеток.
• Планшеты для культивирования клеток или чашка Петри: Стандартные емкости, используемые для выращивания адгезивных клеточных культур.
• Культуральная среда: Жидкая среда, в которой выращивают и поддерживают клетки.
• Стерильный PBS (фосфатно-солевой буфер): Используется для промывания клеток перед откреплением.
• Пробирки для сбора: Для сбора суспензии открепленных клеток.

Протокол ультразвукового открепления с использованием аппарата UIP400MTP для планшетов

1. Подготовка

   – Убедитесь, что все оборудование чистое и стерильное, чтобы предотвратить контаминацию.
   – Предварительно нагрейте культуральную среду и PBS до соответствующей температуры (обычно 37°C).

2. Промывание клеток

   – Аспирируйте культуральную среду из культурального флакона или планшета.
   – Осторожно промойте клетки стерильным PBS, чтобы удалить остатки среды и открепленные клетки.

3. Обработка ультразвуком

   – Добавьте во флакон или планшет небольшой объем PBS или свежей культуральной среды, чтобы покрыть клеточный монослой.
   – Поместите чашку Петри или планшет в ультразвуковой аппарат UIP400MTP.
   – Обрабатывайте ультразвуком в течение заданного времени, обычно от нескольких секунд до нескольких минут, в зависимости от типа клеток и прочности их прикрепления.

4. Сбор клеточной суспензии

   – После обработки ультразвуком осмотрите клетки под микроскопом, чтобы убедиться в их откреплении.
   – Осторожно пипетируйте клеточную суспензию, чтобы собрать открепленные клетки.
   – Перенесите суспензию в пробирку для сбора.

5. Обработка после открепления

   – При необходимости центрифугируйте клеточную суспензию для концентрирования клеток.
   – Ресуспендируйте клетки в свежей культуральной среде или буфере для последующих применений.

Примечания: Параметры (например, время и интенсивность обработки ультразвуком) необходимо оптимизировать для разных типов клеток, чтобы избежать их повреждения. Некоторые типы чувствительных клеток могут быть более восприимчивы к ультразвуковой обработке, что требует тщательной оптимизации.

Практические применения ультразвукового открепления клеток

Ультразвуковое открепление клеток используется в различных исследовательских и клинических условиях:

1. Проточная цитометрия: Подготовка суспензий отдельных клеток для анализа.
2. Подсчет клеток и анализы жизнеспособности: Открепление клеток для точного подсчета и оценки жизнеспособности.
3. Субкультивирование: Перенос клеток из одной культуральной емкости в другую.
4. Молекулярно-биологические эксперименты: Выделение клеток для экстракции ДНК, РНК и белков.

Узнайте здесь, как ультразвуковой аппарат UIP400MTP для 96-луночных планшетов используется для удаления биопленок в анализах биопленок, например по протоколу ASTM E2799!

Почему стоит заменить соскабливание клеток их откреплением с помощью ультразвукового аппарата UIP400MTP для микропланшетов?

Замена соскабливания клеток их откреплением с помощью ультразвукового аппарата UIP400MTP для микропланшетов дает исследователям ряд преимуществ. В отличие от ручного соскабливания, точно контролируемая обработка ультразвуком с помощью UIP400MTP обеспечивает стабильное и мягкое открепление клеток, сводя к минимуму механические повреждения и сохраняя жизнеспособность клеток. UIP400MTP обеспечивает точный контроль параметров обработки ультразвуком, позволяя равномерно обрабатывать все лунки и устраняя вариабельность между образцами. Этот метод быстрее, эффективнее и поддается масштабированию, что делает его идеальным для высокопроизводительных применений при сохранении воспроизводимости и целостности чувствительных клеточных культур. Ознакомьтесь со сравнительным исследованием здесь!