α-синуклеиновые фибриллы и ленты фрагментируются в научных исследованиях для получения более мелких фрагментов фибрилл или даже отдельных белковых молекул, которые можно легче проанализировать с использованием различных экспериментальных методов. Ультразвуковой аппарат VialTweeter является одним из наиболее часто используемых ультразвуковых аппаратов для эффективной и надежной фрагментации альфа-синуклеина.

α-синуклеин в исследованиях

Альфа-синуклеиновые фибриллы представляют собой белковые агрегаты, которые тесно связаны с нейродегенеративными расстройствами, такими как болезнь Паркинсона и некоторые формы деменции, включая деменцию с тельцами Леви. Исследования, сосредоточенные на альфа-синуклеиновых фибриллах, направлены на понимание их роли в прогрессировании заболевания и разработку потенциальных терапевтических вмешательств. Разбивая альфа-синуклеиновые фибриллы на более мелкие фрагменты, исследователи могут исследовать их специфические структурные особенности. Например, фрагментация альфа-синуклеиновых фибрилл позволяет исследователям исследовать их взаимодействие с другими молекулами, такими как белки, липиды или небольшие молекулы. Производя меньшие фрагменты, сайты связывания и сродство к этим взаимодействующим партнерам могут быть исследованы более эффективно. Меньшие оборки и ленты α-Syn также могут проявлять измененную токсичность и биохимические эффекты. Поэтому надежный и эффективный метод фрагментации, который дает воспроизводимые результаты при быстрой и простой обработке образцов, имеет решающее значение.
Ультразвуковая альфа-син фрагментация: Ультразвуковой аппарат VialTweeter - это установленная ультразвуковая система подготовки образцов, которая обрабатывает до 10 флаконов одновременно в одинаковых условиях. Программируемые настройки позволяют легко и быстро повторять одни и те же эксперименты, что дает высоконадежные и воспроизводимые результаты при фрагментации альфа-синуклеиновой фибриллы.

Подготовка образца α-синуклеина с помощью ультразвукового аппарата

Один из подходов к изучению альфа-синуклеиновых фибрилл включает их извлечение и фрагментацию с использованием таких методов, как обработка ультразвуком. Обработка ультразвуком - это процесс, который использует высокоинтенсивные низкочастотные ультразвуковые волны для разрушения и разрушения белковых агрегатов, что приводит к высвобождению более мелких фибрилл или отдельных белковых молекул. Ультразвуковой аппарат VialTweeter является широко используемым устройством в исследованиях, связанных с α-синуклеином для этой цели.

Многочисленные исследования описывают точные протоколы пробоподготовки альфа-синуклеиновых фибрилл ультразвуком, которые используют Hielscher VialTweeter для эффективной и надежной фрагментации фибрилл α-синуклеина. Фрагментируя фибриллы ультразвуком, исследователи могут анализировать полученные продукты и изучать их структуру, токсичность и взаимодействие с другими молекулами. Это исследование дает важную информацию о механизмах, лежащих в основе нейродегенерации, и потенциально определяет новые терапевтические цели. Хорошо зарекомендовавшие себя протоколы обработки ультразвуком α-синуклеина с использованием ультразвукового аппарата VialTweeter позволяют получить надежные и воспроизводимые результаты.

Верхние изображения: нефрагментированные альфа-синуклеиновые фибриллы
Нижние изображения: ультразвуковые фрагментированные фибриллы альфа-синуклеина с ультразвуковым аппаратом VialTweeter
(исследование и изображения: ©Dieriks et al., 2022)

Ультразвуковая фрагментация α-синуклеиновых фибрилл – Протоколы

Поскольку многие исследователи используют ультразвуковой аппарат VialTweeter в качестве предпочтительного метода фрагментации для получения однородных фрагментов фибрилл α-синуклеина, установленные протоколы легко доступны. Ниже вы можете найти несколько примерных протоколов фрагментации.
 

 
Подготовка семян ClearTau: Фибриллы ClearTau разбавляли до 10 мкМ в dH2O и обрабатывали ультразвуком с амплитудой 70% в течение 50 с с циклом 1 с ON 1 s OFF в трубке с использованием ультразвукового аппарата UP200St с с VialTweeter. Семена были охарактеризованы методом электронной микроскопии.
Измерение флуоресценции ThS: Фибриллы ClearTau разбавляли до 2,5 мкМ в dH2O и обрабатывали ультразвуком с амплитудой 70% в течение 50 с с циклом 1 с ON 1 с OFF в трубке с использованием UP200St с с VialTweeter. В качестве контроля использовали полноразмерный мономер Tau 4R2N размером 2,5 мкМ. К реакции 100 мкл добавляли 100 мкл ThS (10 мкМ), в результате чего конечная концентрация белка составляла 1,25 мкМ. Флуоресценцию ThS измеряли с помощью 96 пластин с прозрачным дном, установленных в считывателе микропланшетов FLUOstar Omega, с возбуждением при 445 нм и излучением при 485 нм.
(ср. Лиморенко и др., 2023)
 
Равномерная длина α-синуклеина с использованием ультразвука: Гетерогенность длины α-син фибрилл и лент была уменьшена путем обработки ультразвуком в течение 20 минут на льду в 2-мл пробирках Эппендорфа во флаконере, установленном с амплитудой 75%, импульсами 0,5 с.
(ср. Bousset et al., 2013)
 
Был проведен контроль качества человеческого рекомбинантного мономера WT или S129A a-Syn и фибриллярных полиморфов, которые они генерируют, а также a-Syn 1–110. Впоследствии фибриллярные полиморфы были фрагментированы ультразвуком в течение 20 минут в 2-мл пробирок Эппендорфа в ультразвуковом аппарате VialTweeter для генерации фибриллярных частиц со средним размером 42-52 нм, которые подходят для эндоцитоза.
(ср. Shrivastava et al., 2020)
 

Характеристика пяти фибриллярных α-син полиморфов. (A) Показаны просвечивающие электронные микрофотографии отрицательно окрашенных фибрилл фибриллярных полиморфов α-Syn, лент, фибрилл-91, фибрилл-65 и фибрилл-110 до (верхняя полоса) и после фрагментации с помощью VialTweeter (нижняя полоса). (B) Показано распределение по длине фрагментированных фибриллярных полиморфов. Указано количество (n) фибриллярных сборок, из которых были получены гистограммы.
(исследование и изображения: Shrivastava et al., 2020)

 
Фибриллы α-Syn были фрагментированы ультразвуком в течение 20 минут в 2 мл пробирок Эппендорфа во VialTweeter для генерации фибриллярных частиц со средним размером 42-52 нм по оценке анализа TEM.
(ср. Negrini et al., 2022)
 
Ресуспендированные фибриллы91 (в PBS) были фрагментированы перед добавлением к клеточным культурам путем обработки ультразвуком в течение 20 минут в 2 мл пробирок Эппендорфа с использованием ультразвукового аппарата Vial Tweeter, аликотированного, мгновенно замороженного в жидком азоте и хранящегося до использования при -80 ° C.
(ср. Vajhøj et al., 2021)
 

VialTweeter и лабораторные ультразвуковые аппараты для фрагментации α-syn

Hielscher Ultrasonics является всемирно признанным ведущим производителем передовых ультразвуковых аппаратов. Наши ультразвуковые аппараты, которым доверяют и зарекомендовали себя в крупных исследовательских лабораториях по всему миру, предлагают беспрецедентное качество и производительность для ваших критических экспериментов.
С Hielscher VialTweeter и любым другим ультразвуковым аппаратом Hielscher вы почувствуете беспрецедентный комфорт пользователя, поскольку они тщательно спроектированы для воспроизводимых результатов, простоты использования и бесперебойной работы. Благодаря функциям автоматической записи данных вы можете сосредоточиться на своих исследованиях, в то время как наши ультразвуковые аппараты тщательно записывают важные данные для воспроизводимости и точности.
Достигайте стабильных и воспроизводимых результатов с уверенностью!
Наши ультразвуковые аппараты спроектированы и изготовлены в Германии. Немецкая точность и высочайшее инженерное качество обеспечивают надежную и точную подготовку образцов, такую как фрагментация фибрилл альфа-синуклеина каждый раз. Больше не нужно беспокоиться о противоречивых результатах - наша ультразвуковая технология гарантирует, что ваши исследования останутся на переднем крае научного прогресса.
Но это не всё! Наше стремление к совершенству выходит за рамки нашей продукции. Мы гордимся нашим исключительным обслуживанием клиентов, предоставляя экспертную поддержку для решения любых вопросов или проблем, которые могут у вас возникнуть. Наша преданная команда здесь, чтобы помочь вам на каждом этапе вашего исследовательского путешествия, гарантируя, что вы получите максимальную отдачу от наших ультразвуковых аппаратов.
Выбирайте инновации, надежность и исключительный пользовательский опыт - выбирайте наши лабораторные ультразвуковые аппараты, такие как VialTweeter для фрагментации фибрилл альфа-синуклеина. Воспользуйтесь уже установленными протоколами и вступите в ряды ведущих исследователей, которые доверяют нашей технологии свои критические исследования. Поднимите свои исследования и исследуйте новые рубежи в исследованиях деменции и нейродегенеративных заболеваний с помощью наших современных ультразвуковых аппаратов.

Проектирование, производство и консалтинг – Качество Сделано в Германии

Ультразвуковые аппараты Hielscher хорошо известны своим высочайшим качеством и стандартами дизайна. Надежность и простота в эксплуатации обеспечивают плавную интеграцию наших ультразвуковых аппаратов в промышленные объекты. Жесткие условия и требовательные условия легко обрабатываются ультразвуковыми аппаратами Hielscher.

Hielscher Ultrasonics является сертифицированной компанией ISO и уделяет особое внимание высокопроизводительным ультразвуковым аппаратам, отличающимся самыми современными технологиями и удобством использования. Конечно, ультразвуковые аппараты Hielscher соответствуют требованиям CE и соответствуют требованиям UL, CSA и RoHs.
 
Приведенная ниже таблица дает вам представление о приблизительной производительности наших ультразвуковых аппаратов лабораторного размера: