Preparação de amostras ultrassônicas para análise de THC
- A extração ultrassônica é um método comprovado para a produção de THC, mas também pode ser usada para fins analíticos.
- A ultrassonografia é um método comum de preparação de amostras usado para análise do conteúdo total de THC em produtos de cannabis.
- A extração ultrassônica é aplicada às amostras antes da análise TLC, GC e HPLC.
Extração ultrassônica de THC
O THC, ou tetrahidrocanabinol (delta-9-tetrahidrocanabinol), é a substância química que causa a maioria dos efeitos psicológicos da maconha. Para a espécie de cannabis, podem ser conhecidas mais de 400 estirpes diferentes. Dependendo da estirpe específica da cannabis, a cannabis pode ter apenas 0,3% em peso de THC. Em outras cepas, o teor de THC pode chegar a 20% em massa.
Além disso, os diferentes produtos de cannabis variam significativamente: Portanto, varia a concentração média de THC na maconha entre 1 a 5%; no haxixe, o teor de THC está entre 5 a 15%, e no óleo de haxixe, em média, é de 20%. O THC em doses recreativas de maconha é altamente variável e quanto menor o teor de THC na maconha, mais o usuário deve consumir para experimentar os efeitos desejados.
A preparação de amostras ultrassônicas é usada para analisar o teor de THC
- para controle de qualidade de produtos recreativos de THC,
- para a determinação da qualidade de produtos farmacêuticos de THC,
- para a distinção de cânhamo e cânhamo de fibra.
Para análise de THC, os seguintes métodos cromatográficos são comumente usados: Cromatografia em Camada Fina (TLC), Cromatografia Gasosa (GC) e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC)
Protocolo ultrassônico de preparação de amostras para análise TLC
Preparação da amostra: Para a preparação das amostras, o material vegetal seco deve ser macerado e triturado até obter um pó homogêneo. Para a extração ultrassônica, 500mg do pó da planta de cannabis e 5mL de mistura de metanol-clorofórmio (proporção de 9: 1) são misturados em um frasco. A sonicação pode ser aplicada usando um ultrassonicador com micro ponta, o VialTweeter ou o ultrassônico cuphorn. O tempo de sonicação leva aprox. 5 min. Em seguida, deixe a amostra descansar por pelo menos 5 min. Diluir o sobrenadante límpido com a mistura de extracção (v/v: 1 : 10). THC livre: 1μL na placa TLC
Descarboxilação: 100μL do extrato são evaporados até a secura. O resíduo é aquecido a 180°C por 4 min. Adicione 500μL de metanol-clorofórmio (v/v 9: 1). Sonicar por 5 min. Diluir o sobrenadante límpido com a mistura de extracção (v/v: 1 : 10).
Calibração: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
Gel de sílica TLC F-254, Merck 5729
TLC scanner II, software CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Etilacetato : Toluol : Clorofórmio = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Derivatização pós-cromatográfica: Fast Blue Salt 0,1% em NaOH 0,1 M
Densitometria a 550 nm
Tetrahidrocanabinol (Δ9-THC) para análise e extração
Protocolo ultrassônico da preparação da amostra para a análise do GC
Preparação da amostra: O material vegetal seco é macerado e triturado até obter um pó homogêneo. Para a extração, 500mg do pó da planta de cannabis e 10mL de mistura de metanol-hexano (proporção de 9: 1) são misturados em um frasco. A sonicação pode ser aplicada usando um dispositivo ultrassônico tipo sonda com micro ponta, o VialTweeter ou o ultrassônico cuphorn. Sonicate a amostra por 15-20 min. Agite a amostra e deixe descansar por pelo menos 5 min. Diluir o sobrenadante límpido com a mistura de extracção (v/v 1:20).
Descarboxilação: no inserto
Temperatura do injetor 250 °C
Calibração: 5 ng/μL a 250 ng/μL
GC: HP 6890 com injeção de amostrador automático 5973 MSD e 7683: 1μL, tempo sem divisão: 2 min.
Coluna: HP-5 MS, 30m, diâmetro 250 μm, espessura do filme 0,25 μm
Gás de arraste: He, 35 psi, fluxo constante: 4 mL/min.
Forno: 100°C por 1min.; aumento de temperatura de 15 ° C? min. para 280 ° C; 280 °C por 5 min. MSD: DIGITALIZAÇÃO: m/e 35 – 550
Protocolo de preparação de amostras ultrassônicas para análise de HPLC
Preparação da amostra (análogo à preparação do GC): O material vegetal seco é macerado e triturado até formar um pó homogêneo. Para a extração, 500mg do pó da planta de cannabis e 10mL de mistura de metanol-hexano (proporção de 9: 1) são misturados em um frasco. A sonicação pode ser aplicada usando um ultrassonicador tipo sonda com micro ponta, o VialTweeter ou o ultrassônico cuphorn. Sonicate a amostra por 15-20 min. Agite a amostra e deixe descansar por pelo menos 5 min. Diluir o sobrenadante límpido com a mistura de extracção (v/v 1:20).
VialTweeter para preparação ultrassônica de amostras
Pré-coluna: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Coluna: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluente: isokrático 36% TEAP 25 mmol/L, quantificação de acetonitrila 64% a 210 nm
Calibração: 0,001 – 0,10 μg/μL
Calibração: 0,01 – 0,50 μg/μL
Tempo de retenção: para CBD: 6,2 min.; para CBN: 8,0 min.; para THC: 9,4 min.; para THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St com micro-ponta para sonicação de amostras
Literatura/Referências
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Aplicação 2006.
Fatos, vale a pena conhecer
maconha consiste nas flores secas e folhas e caules subtendidos da planta feminina de Cannabis. Esta é a forma mais consumida e contém aprox. 3% a 20% de THC. Formas específicas e altamente criadas de maconha atingem um teor de THC de mais de 30%. A maconha é o material de origem de todas as outras variedades de produtos de cannabis contendo THC. Para converter o canabinóide mais abundante, o ácido tetrahidrocanabinólico (THCA), no THC psicoativo, um processo de descarbonotilação deve ser iniciado. Portanto, a cannabis e seus extratos devem ser aquecidos ou desidratados para causar descarboxilação.
Kief refere-se a um pó, rico em tricomas, que é peneirado das folhas e flores da cannabis. É consumido em pó ou comprimido e usado em bolos de haxixe.
haxixe ou haxixe é um bolo ou bola de resina concentrada que é produzida a partir de kief prensado ou da resina que é raspada da superfície da planta e enrolada em bolas. Ocorre em várias cores, do preto ao marrom dourado, dependendo da pureza e da fonte. Pode ser consumido por via oral ou fumado, por exemplo, em cachimbo, narguilé, bongo, borbulhador, vaporizador, usando uma faca quente, fumado em baseados, misturado com botões de cannabis ou tabaco, fumado como garrafa ou usado como ingrediente em alimentos.
tintura de cannabis refere-se ao extrato de canabinóides no álcool. Os canabinóides são extraídos da planta de cannabis usando bebidas espirituosas de alta prova (principalmente álcool de cereais) para criar a tintura.
óleo de haxixe é uma matriz resinosa de canabinóides produzida por extração por solvente, formada em uma massa endurecida ou viscosa. O óleo de haxixe é um dos produtos de cannabis mais potentes devido ao seu alto nível de composto psicoativo. O uso de óleo de haxixe extraído em butano e dióxido de carbono supercrítico ganhou recentemente uma popularidade crescente.
Infusões referem-se a diferentes tipos de infusões de cannabis que diferem umas das outras pela ampla variedade de solventes não voláteis que podem ser usados para produzir uma infusão de cannabis. Para preparar essa infusão, a matéria vegetal de cannabis é misturada com um solvente e, em seguida, prensada e filtrada para transferir os óleos da planta para o solvente. Manteiga de cacau, manteiga láctea, óleo de cozinha, glicerina e hidratantes para a pele são solventes comumente usados.
maconha medicinal refere-se ao uso da planta Cannabis como uma terapia fitoterápica recomendada por médicos, bem como THC sintético e canabinóides. Esse uso geralmente requer receita médica e a distribuição geralmente é feita dentro de uma estrutura definida pelas leis locais. Vários estudos de pesquisa mostraram que o uso de cannabis ou seus derivados atua contra, por exemplo, náuseas e vômitos induzidos por quimioterapia, dor neuropática e esclerose múltipla.