Metabolómica facilitada pela sonicação de elevada capacidade de processamento

A metabolómica é a área de investigação que utiliza técnicas de elevada capacidade de processamento para caracterizar e quantificar pequenas moléculas em vários fluidos biológicos, como urina, soro, plasma, fezes e saliva, revelando assinaturas metabólicas únicas. O sonicador UIP400MTP de elevada capacidade de processamento, concebido para placas multipoços, é uma ferramenta potente para a lise de células nestas amostras, facilitando a libertação de metabolitos para análise subsequente. Esta abordagem precisa e fiável é essencial para a metabolómica, na qual um desenho de estudo rigoroso, uma preparação meticulosa das amostras, uma configuração otimizada da plataforma, uma análise abrangente dos dados e uma interpretação biológica significativa são fundamentais. A metabolómica utiliza tanto abordagens direcionadas, que se concentram em classes específicas de moléculas, como hidratos de carbono, lípidos e aminoácidos, como técnicas não direcionadas, que proporcionam uma visão abrangente dos perfis metabólicos de uma amostra, revelando a complexidade intrincada da sinalização metabólica.

Preparação de amostras com elevada capacidade de processamento com o sonicador UIP400MTP para placas de 96 poços

A utilização do sonicador sem contacto UIP400MTP em combinação com placas de 96 poços é um método eficiente de homogeneização e extração de metabolitos com elevada capacidade de processamento. Esta configuração evita o contacto direto com a amostra, reduzindo o risco de contaminação cruzada ao processar várias amostras em simultâneo.

Protocolo passo a passo para homogeneização com o sonicador UIP400MTP para placas de 96 poços

1. Preparação de amostras metabolómicas
   Colocação das amostras: Distribua cada amostra (por exemplo, fezes, tecido intestinal ou conteúdo luminal) pelos poços individuais de uma placa de 96 poços ou microplaca.
   Solvente: Os solventes orgânicos, como metanol, etanol, acetonitrilo, clorofórmio e as suas misturas (aquosas), são essenciais para a extração de metabolitos, ajudando a libertar os metabolitos intracelulares da matriz celular. Utilize 100–300 µL de solvente por poço, garantindo um volume suficiente para submergir completamente a amostra.
   Padrões internos: Opcionalmente, adicione padrões internos a cada poço para normalização durante a análise metabolómica subsequente.
2. Preparação do meio de acoplamento
   Nível da água: Coloque a placa de 96 poços na plataforma de sonicação cheia de água (o meio de acoplamento), conforme descrito no manual.
3. Configuração dos parâmetros do UIP400MTP
   Definições de potência: Ajuste a amplitude ultrassónica para 50–80% da potência máxima para uma homogeneização eficiente.
   Modo de impulsos: Defina o ciclo de sonicação para alternar impulsos (por exemplo, 30 segundos LIGADO, 30 segundos DESLIGADO), permitindo o arrefecimento e evitando o sobreaquecimento das amostras.
   Tempo total: 4–10 minutos, dependendo da complexidade e da resistência da amostra.
   Controlo da temperatura: Utilize um refrigerador de laboratório para manter a água a 4–8°C durante a sonicação, de modo a proteger os metabolitos sensíveis ao calor.
4. Processo de sonicação
   Inicie o UIP400MTP para executar os ciclos de sonicação.
   Monitorize o processo através da interface do UIP400MTP.
   O efeito de cavitação irá homogeneizar as amostras e provocar a lise das células nos poços, libertando os metabolitos intracelulares para o solvente.
5. Após a sonicação
   Centrifugação: Após a sonicação, transfira o conteúdo da placa para tubos de recolha, se necessário. Centrifugue a 4 000–6 000 × g durante 10 minutos para sedimentar os detritos insolúveis e o material celular.
   Recolha do sobrenadante: Transfira cuidadosamente o sobrenadante de cada poço para novos tubos ou placas para análise.
   Secagem opcional: Se for necessário concentrar os sobrenadantes, seque-os utilizando um concentrador de vácuo (por exemplo, SpeedVac) e, em seguida, reconstitua-os num pequeno volume do solvente adequado.

Tire partido da elevada capacidade de processamento do sonicador UIP400MTP para placas multipoços e facilite a sua investigação e análise metabolómicas!

Princípio da sonicação sem contacto com o UIP400MTP

O UIP400MTP aplica ondas ultrassónicas aos poços de uma placa de 96 poços indiretamente, através de um meio de acoplamento (por exemplo, água). Estas ondas criam cavitação, que provoca a rutura celular e liberta metabolitos sem contacto físico entre a sonda do sonicador e a amostra.

Conceção, fabrico e consultoria – Qualidade fabricada na Alemanha

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