Metabolómica facilitada pela sonicação de alto rendimento

A metabolómica é o campo de investigação que emprega técnicas de elevado rendimento para caraterizar e quantificar pequenas moléculas em vários biofluidos, como a urina, o soro, o plasma, as fezes e a saliva, revelando assinaturas metabólicas únicas. O sonicador de alto rendimento UIP400MTP, concebido para placas com vários poços, é uma ferramenta poderosa para lisar células nestas amostras, facilitando a libertação de metabolitos para análise a jusante. Esta abordagem precisa e fiável é essencial para a metabolómica, onde a conceção precisa do estudo, a preparação meticulosa das amostras, a configuração optimizada da plataforma, a análise exaustiva dos dados e a interpretação biológica significativa são fundamentais. A metabolómica emprega tanto abordagens orientadas, que se centram em classes específicas de moléculas como hidratos de carbono, lípidos e aminoácidos, como técnicas não orientadas, que fornecem uma visão geral dos perfis metabólicos numa amostra, revelando a complexidade intrincada da sinalização metabólica.

Preparação de amostras de alto rendimento com o Sonicador de placas de 96 poços UIP400MTP

A utilização do sonicador sem contacto UIP400MTP em combinação com placas de 96 poços é um método eficiente para homogeneização de alto rendimento e extração de metabolitos. Esta configuração evita o contacto direto com a amostra, reduzindo o risco de contaminação cruzada ao processar várias amostras em simultâneo.

Protocolo passo-a-passo para homogeneização com o Sonicator de 96 poços UIP400MTP

1. Preparação de amostras metabolómicas
   Colocação de amostras: Dispensar cada amostra (por exemplo, fezes, tecido intestinal ou conteúdo luminal) em poços individuais de uma placa de 96 poços ou microplaca.
   Solvente: Os solventes orgânicos, como o metanol, etanol, acetonitrilo, clorofórmio e respectivas misturas (aquosas), são essenciais para a extração de metabolitos, ajudando na libertação de metabolitos intracelulares da matriz celular. Utilizar 100-300 µL de solvente por poço, assegurando um volume suficiente para submergir completamente a amostra.
   Normas internas: Opcionalmente, adicionar padrões internos a cada poço para normalização durante a análise metabolómica a jusante.
2. Instalação do meio de acoplamento
   Nível da água: Colocar a placa de 96 poços na plataforma de sonicação cheia de água (o meio de acoplamento), tal como descrito no manual.
3. Configuração dos parâmetros do UIP400MTP
   Definições de potência: Ajustar a amplitude dos ultra-sons para 50-80% da potência máxima para uma homogeneização eficaz.
   Modo de impulsos: Definir o ciclo de sonicação para pulsos alternados (por exemplo, 30 segundos ON, 30 segundos OFF) para permitir o arrefecimento e evitar o sobreaquecimento da amostra.
   Tempo total: 4-10 minutos, dependendo da complexidade e dureza da amostra.
   Controlo da temperatura: Utilizar um refrigerador de laboratório para manter a água a 4-8°C durante a sonicação para proteger os metabolitos sensíveis ao calor.
4. processo de sonicação
   Inicie o UIP400MTP para ciclos de sonicação.
   Monitorizar o processo através da interface UIP400MTP.
   O efeito de cavitação irá homogeneizar as amostras e lisar as células dentro dos poços, libertando metabolitos intracelulares para o solvente.
5. PostSonicação
   Centrifugação: Após a sonicação, transferir o conteúdo da placa para tubos de recolha, se necessário. Centrifugar a 4.000-6.000 × g durante 10 minutos para sedimentar os detritos insolúveis e o material celular.
   Recolha de sobrenadante: Transferir cuidadosamente o sobrenadante de cada poço para novos tubos ou placas para análise.
   Secagem opcional: Secar os sobrenadantes utilizando um concentrador de vácuo (por exemplo, SpeedVac) se for necessária uma concentração e, em seguida, reconstituir num pequeno volume do solvente adequado.

Tire partido da capacidade de processamento de alto rendimento do sonicador de placas multipoços UIP400MTP e facilite a sua investigação e análise metabolómica!

Princípio da Sonicação sem Contacto com UIP400MTP

O UIP400MTP aplica ondas ultra-sónicas aos poços de uma placa de 96 poços indiretamente através de um meio de acoplamento (por exemplo, água). Estas ondas criam cavitação, que rompe as células e liberta metabolitos sem contacto físico entre a sonda do sonicador e a amostra.

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