Bioplēvju atdalīšana ar augstas caurlaidspējas ultraskaņas apstrādes ierīci UIP400MTP
Augstas caurlaidspējas ultraskaņas apstrādes ierīces, kas paredzētas daudziedobju platēm un 96 iedobju platēm, ir būtiski instrumenti bioplēvju pētniecībā, jo īpaši bioplēvju atdalīšanai un noņemšanai no iedobēm, mēģenēm, tapām un Petri traukiem. Šīs ultraskaņas apstrādes ierīces ļauj vienlaikus apstrādāt daudzus paraugus, uzlabojot efektivitāti un rezultātu vienmērīgumu. Hielscher augstas caurlaidspējas ultraskaņas apstrādes ierīce UIP400MTP ir ideāli piemērota daudziedobju plašu, 96 iedobju plašu, vairāku mēģeņu vai Petri trauku apstrādei ar ultraskaņu. Vienmērīgās ultraskaņas svārstības un kavitācija uzticami noņem bioplēves no plates dibena. Tādējādi daudziedobju plašu ultraskaņas apstrādes ierīce UIP400MTP ir ideāls paraugu sagatavošanas instruments bioplēvju noņemšanai, bioplēvju testiem, kā arī baktēriju un mikrobu pētniecībai.
Daudziedobju plašu ultraskaņas apstrādes ierīce UIP400MTP bioplēvju atdalīšanai un noņemšanai augstas caurlaidspējas paraugu sagatavošanā:
- Baktēriju bioplēves
- Eikariotu bioplēves
- Sēņu bioplēves
- Arheju bioplēves
- Polimikrobiālas bioplēves / Jauktu sugu bioplēves
- Zobu bioplēves (aplikums)
- Jūras bioplēves
- Vides bioplēves
- Bioplēves uz medicīniskām ierīcēm
- Kultivētu šūnu suspensijas
UIP400MTP augstas caurlaidspējas ultraskaņas apstrādes ierīce bioplēvju noņemšanai no daudziedobju platēm, 96 iedobju platēm, mēģenēm un Petri traukiem.
Bioplēvju atdalīšana un noņemšana, izmantojot apstrādi ar ultraskaņu
Hielscher augstas caurlaidspējas ultraskaņas apstrādes ierīce UIP400MTP ir īpaši pielāgota uzticamai un vienmērīgai daudziedobju un 96 iedobju plašu apstrādei ar ultraskaņu. Daudziedobju plašu ultraskaņas apstrādes ierīce UIP400MTP, kas ir būtiska bioplēvju pētniecībā, nodrošina uzticamu tehnoloģiju bioplēvju atdalīšanai un noņemšanai no daudziedobju platēm, mēģenēm un Petri traukiem. Nodrošinot augstas caurlaidspējas paraugu sagatavošanu, UIP400MTP uzlabo bioplēvju testu un citu saistīto pētījumu efektivitāti un rezultātu vienmērīgumu, tādēļ šī ultraskaņas apstrādes ierīce ir neaizstājama gan akadēmiskajā, gan rūpnieciskajā mikrobioloģijas pētniecībā.
Bioplēvju noņemšana, izmantojot apstrādi ar ultraskaņu: Lai atdalītu bioplēves, tām ļauj veidoties daudziedobju plates iedobēs kontrolētos apstākļos. Pēc tam plati ievieto ultraskaņas apstrādes ierīcē, kur tādus parametrus kā laiks, amplitūda un frekvence iestata atbilstoši konkrētā bioplēves veida prasībām un eksperimenta mērķiem. Ultraskaņas viļņi katrā iedobē rada kavitāciju, efektīvi sagraujot bioplēves matricu un atdalot šūnas.
Bioplēvju paraugu sagatavošana ar ultraskaņu: Bioplēvju testos augstas caurlaidspējas ultraskaņas apstrādes ierīcēm ir vairāki lietojumi. Pēc apstrādes ar ultraskaņu atdalītās bioplēves šūnas var savākt un kvantitatīvi noteikt, izmantojot dažādus testus, piemēram, krāsošanu ar kristālvioleto, dzīvotspējīgo šūnu skaitīšanu vai biomasas mērīšanu. Turklāt bioplēves var apstrādāt ar pretmikrobu līdzekļiem un pēc tam ar ultraskaņu, lai novērtētu šo līdzekļu efektivitāti bioplēvju sagraušanā. Atdalītās bioplēves šūnas ir noderīgas arī genomikas un proteomikas pētījumos, jo tās var izmantot DNS, RNS un olbaltumvielu ekstrakcijai turpmākai molekulārajai analīzei.
Augstas caurlaidspējas ultraskaņas apstrādes ierīces piedāvā daudzas priekšrocības. Tās ļauj vienlaikus apstrādāt vairākus paraugus, ietaupot laiku un darbu, un nodrošina vienmērīgu visu iedobju apstrādi, samazinot mainīgumu un uzlabojot rezultātu reproducējamību. Šīs ierīces ir piemērotas arī plaša mēroga pētījumiem, ļaujot veikt bioplēvju veidošanās, sagraušanas un apstrādes augstas caurlaidspējas skrīningu.
(A) Plate, kas satur TSB ar 2% glikozes un ko izmanto bioplēvju veidošanai, šūnu atgūšanai un MIC un MBCB noteikšanai; (B) Vāks ar tapām stafilokoku bioplēvju veidošanai.
Uz tapām izveidojušās bioplēves šūnas atdalīja, izmantojot Hielscher ultraskaņas apstrādes ierīci UIP250MTP, 5 min apstrādājot tās 96 iedobju platēs ar svaigu barotni šūnu atgūšanai.
(Attēls un pētījums: ©de Oliveira et al., 2016)
96 iedobju plašu ultraskaņas apstrādes ierīce UIP400MTP mikrotitrēšanas un daudziedobju plašu apstrādei ar ultraskaņu
Bioplēvju noņemšanas ar ultraskaņu nozīme bioplēvju pētniecībā
Bioplēvju noņemšana ar ultraskaņu ir būtiska bioplēvju pētniecībā tās iedarbīguma, konsekvences, efektivitātes un daudzpusības dēļ. Tā nodrošina rūpīgu un vienmērīgu bioplēvju sagraušanu, atvieglojot precīzu un reproducējamu analīzi dažādos bioplēvju testos. Šie testi, tostarp krāsošana ar kristālvioleto, dzīvotspējīgo šūnu skaitīšana, ATP bioluminiscence, XTT reducēšana, mikroskopiskā analīze un nukleīnskābju/olbaltumvielu ekstrakcija, sniedz vispusīgu ieskatu bioplēvju veidošanās procesā, dzīvotspējā, struktūrā un reakcijā uz apstrādi.
Apstrāde ar ultraskaņu saudzīgi atdala un noņem bioplēvi no cietām pamatnēm, piemēram, plašu dibeniem, tapām, tapiņām vai segstikliņiem.
- Efektīva bioplēvju sagraušana:
Kavitācija: ultraskaņas viļņi rada kavitācijas burbuļus, kuri saplokot rada spēcīgus bīdes spēkus, efektīvi sagraujot bioplēvju sarežģīto struktūru.
Rūpīga atdalīšana: nodrošina bioplēves šūnu rūpīgu atdalīšanu no virsmām, kas ir būtiski precīzai kvantitatīvai noteikšanai un analīzei. - Konsekvence un reproducējamība:
Vienmērīga apstrāde: augstas ražības sonikatori nodrošina vienmērīgu ultraskaņas enerģijas sadalījumu visos paraugos, samazinot mainīgumu un uzlabojot reproducējamību.
Standartizācija: ļauj standartizēt bioplēvju sagraušanas protokolus, nodrošinot uzticamākus un salīdzināmākus rezultātus. - Efektivitāte:
Augsta paraugu apstrādes ražība: ļauj vienlaikus apstrādāt vairākus paraugus, ietaupot laiku un palielinot apstrādāto paraugu skaitu bioplēvju pētījumos.
Automatizācija: var viegli integrēt automatizētās darbplūsmās, vēl vairāk paaugstinot efektivitāti un samazinot roku darbu. - Dzīvotspējas un integritātes saglabāšana:
Kontrolēti apstākļi: tādus parametrus kā laiks un intensitāte var precīzi pielāgot, lai sagrautu bioplēves, neietekmējot šūnu dzīvotspēju vai integritāti, kas ir svarīgi turpmākajiem testiem. - Daudzpusība:
Plašas izmantošanas iespējas: piemērots dažādiem bioplēvju veidiem (baktēriju, sēņu, jauktu sugu) un saderīgs ar dažādām bioplēvju pētniecībā izmantotām virsmām un materiāliem.
Daudziedobju plašu sonikators UIP400MTP piedāvā daudzas priekšrocības, kas padara to par neaizstājamu rīku augstas ražības paraugu sagatavošanā.
Hielscher Ultrasonics piedāvā dažādus sonikatoru modeļus, tostarp zondes tipa sonikatorus, bezkontakta sonikatorus un augstas ražības sonikatorus. Sazinieties ar mums jau tagad! Mūsu tehniskie eksperti labprāt pārrunās ar jums jūsu apstrādes prasības un ieteiks vispiemērotāko sonikatoru jūsu darbam ar bioplēvēm.
Mikrotitrēšanas plašu sonikators UIP400MTP tiek izmantots bioplēvju atdalīšanai pētniecības vajadzībām
Literatūra / Atsauces
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Bieži uzdotie jautājumi par bioplēvju pētniecību
Kāda ir visbiežāk izmantotā bioplēvju veidošanās pamatne?
Laboratorijas pētījumos visbiežāk izmantotā bioplēvju veidošanās pamatne ir mikrotitrēšanas plate. Mikrotitrēšanas plates, jo īpaši 96 iedobju formātā, tiek plaši izmantotas to daudzpusības, lietošanas ērtuma un saderības ar dažādām analītiskām metodēm dēļ.
Kāda ir labākā 96 iedobju plate bioplēvēm?
Labākā 96 iedobju plate bioplēvju pētījumiem ir atkarīga no vairākiem faktoriem, tostarp pētāmās bioplēves veida, eksperimenta iekārtojuma un konkrētajām pētījuma prasībām. Tomēr dažas no bioplēvju pētījumiem bieži ieteiktajām 96 iedobju platēm ir:
- Corning® Costar® 3596 96-well Clear Flat Bottom Plate: šo plati bieži izmanto tās augstās optiskās dzidrības dēļ, kas ir noderīga attēlveidošanā un spektrofotometriskajos testos.
- Nunc™ MicroWell™ 96-Well Plates: šīs plates ir pazīstamas ar vienādiem iedobju izmēriem un augstu optisko dzidrību. Tās ir pieejamas ar dažādiem virsmas apstrādes veidiem, lai nodrošinātu dažādu veidu šūnu kultivēšanu.
- Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-Well Microplate: šo plati bieži izmanto bioplēvju pētījumos, jo tā nodrošina nemainīgu kvalitāti visās iedobēs un ir pieejama ar dažādiem virsmas pārklājumiem, piemēram, ar audu kultivēšanai apstrādātām virsmām vai virsmām ar zemu saistīšanas spēju.
- Melnas 96 iedobju plates ar caurspīdīgu dibenu: pētījumiem, kuros nepieciešami fluorescences vai luminiscences mērījumi, melnas plates ar caurspīdīgu dibenu (piem., Corning® 3603) ir ideāli piemērotas, jo tās līdz minimumam samazina signālu savstarpējo ietekmi starp iedobēm un uzlabo signāla noteikšanu.
- Plates ar hidrofobu vai hidrofilu pārklājumu: atkarībā no bioplēves un mikroorganisma īpašībām var būt noderīgas plates ar īpašiem pārklājumiem, kas veicina vai kavē adhēziju. Piemēram, hidrofobas plates var būt piemērotas noteiktu baktēriju veidotām bioplēvēm.
- Īpaši bioplēvēm paredzētas plates: daži ražotāji piedāvā plates, kas īpaši izstrādātas bioplēvju pētniecībai. Šīm platēm bieži ir uzlabotas virsmas īpašības, kas veicina bioplēvju veidošanos, un tās ir optimizētas bioplēvju testiem.
Izvēloties 96 iedobju plati bioplēvju pētījumiem, ņemiet vērā šādus kritērijus:
- Materiāls un virsmas apstrāde: Izvēlieties plates materiālu un virsmas apstrādi, kas veicina pētāmo bioplēvi veidojošo mikroorganismu adhēziju un augšanu.
Optiskais caurspīdīgums: Testiem, kas ietver optiskos mērījumus, nodrošiniet, lai platei būtu augsts optiskais caurspīdīgums. - Iedobju konstrukcija: Ņemiet vērā iedobju formu un dziļumu, kas var ietekmēt bioplēves augšanu un turpmākās apstrādes vai mērījumu efektivitāti.
- Saderība ar aprīkojumu: Pārliecinieties, ka plate ir saderīga ar jūsu ultraskaņas apstrādes ierīci, inkubatoru un jebkuru citu pētījumā izmantoto aprīkojumu. Hielscher vairāku iedobju plašu ultraskaņas apstrādes ierīce ir saderīga ar visām standarta mikrotitrēšanas un vairāku iedobju platēm.
Galu galā labākā izvēle būs atkarīga no jūsu bioplēvju pētījuma konkrētajām prasībām un iesaistīto mikroorganismu īpašībām.
Kādi ir tipiski pētniecībā izmantotie bioplēvju testi?
Pētniecībā un diagnostikā bioplēvju izpētei un klasificēšanai izmanto dažādu veidu testus. Apstrāde ar ultraskaņu ir izplatīts paraugu sagatavošanas posms, kurā bioplēvi noņem no tās cietā substrāta, padarot to pieejamu testiem un analīzei.
- Krāsošana ar kristālvioleto:
Mērķis: kvantitatīvi nosaka bioplēves kopējo biomasu.
Metode: bioplēves iekrāso ar kristālvioleto krāsvielu, pēc tam krāsvielu izšķīdina un tās daudzumu nosaka spektrofotometriski.
Pielietojums: izmanto bioplēvju veidošanās un antimikrobiālo līdzekļu iedarbības novērtēšanai. - Dzīvotspējīgo šūnu skaitīšana (CFU tests):
Mērķis: nosaka dzīvotspējīgo bioplēves šūnu skaitu.
Metode: atdalītās bioplēves šūnas sērijveidā atšķaida un izsēj uz agara, lai saskaitītu koloniju veidojošās vienības (CFU).
Pielietojums: novērtē bioplēves šūnu dzīvotspēju un antimikrobiālo iedarbīgumu. - ATP bioluminiscence:
Mērķis: mēra bioplēves šūnu metabolisko aktivitāti.
Metode: ATP līmeni kvantitatīvi nosaka, izmantojot bioluminiscences testu.
Pielietojums: norāda uz bioplēves dzīvotspēju un metabolisko stāvokli. - XTT reducēšanas tests:
Mērķis: novērtē šūnu metabolisko aktivitāti.
Metode: metaboliski aktīvas šūnas reducē XTT reaģentu, veidojot krāsainu formazāna produktu, kura daudzumu nosaka spektrofotometriski.
Pielietojums: izmanto bioplēves šūnu dzīvotspējas un apstrādes iedarbības novērtēšanai. - Mikroskopiskā analīze:
Mērķis: vizualizē bioplēves struktūru un sastāvu.
Metode: izmantotās metodes ietver gaismas mikroskopiju, konfokālo lāzerskenējošo mikroskopiju (CLSM) un skenējošo elektronu mikroskopiju (SEM).
Pielietojums: sniedz detalizētu ieskatu bioplēves uzbūvē, izplatībā un apstrādes iedarbībā. - DNS, RNS un olbaltumvielu ekstrakcija:
Mērķis: analizē bioplēves šūnu ģenētiskos un proteomiskos profilus.
Metode: bioplēves šūnas lizē, lai ekstrahētu nukleīnskābes un olbaltumvielas turpmākai analīzei (piem., PCR, qPCR, sekvenēšanai, proteomikai).
Pielietojums: pēta gēnu ekspresiju, ģenētisko daudzveidību un olbaltumvielu ekspresiju bioplēvēs. - Bioplēvju veidošanās inhibēšanas un bioplēvju izskaušanas testi:
Mērķis: veic savienojumu skrīningu, lai noteiktu to spēju novērst bioplēvju veidošanos vai izskaust jau izveidojušās bioplēves.
Metode: bioplēves apstrādā ar potenciāliem pretbioplēvju līdzekļiem un to sagraušanu novērtē, izmantojot iepriekš minētos testus.
Pielietojums: zāļu atklāšana un pretbioplēvju terapiju izstrāde.
Hielscher Ultrasonics ražo augstas veiktspējas ultraskaņas homogenizatorus no laboratorijas mēroga līdz rūpnieciskam mērogam.