ბეტა-გლუკანის ამოღება სოკოდან ულტრაბგერითი გამოყენებით
მასალები და აღჭურვილობა
- სოკო (მაგ., 100 გრამი დაჭრილი ან დაჭრილი სოკო)
- ცივი გამოხდილი წყალი (მაგ., 500 მლ)
- ბლენდერი ან საფქვავი
- შუშის ჭიქები ან კოლბები
- ფილტრის ქაღალდი ან ვაკუუმური ფილტრაციის კონფიგურაცია
- ცენტრიფუგა (სურვილისამებრ)
- ალკოჰოლი (მაგ., ეთანოლი) ნალექისთვის
- Მაცივარი
- საშრობი ღუმელი
ბეტა-გლუკანის ექსტრაქციის პროტოკოლი
- გახეხეთ ან დააქუცმაცეთ სოკო (მაგ. ჩაგა ან ლომი’ Mane სოკო) უხეში ნაწილაკებად დაახ. 1-დან 3 მილიმეტრამდე. მაგალითად, გამოიყენეთ 100 გრამი სოკოს გამხმარი ნაწილაკები.
- შემდეგ დაამატეთ სოკოს ნაწილაკები შუშის ჭიქაში ან კოლბაში.
- შემდეგი, დაამატეთ 500 მლ გამოხდილი წყალი ჭიქაში, რომელიც შეიცავს ამოსაღებ სოკოს ნაწილაკებს. წყალ-სოკოს თანაფარდობა შეიძლება განსხვავდებოდეს სოკოს სპეციფიკური ტიპისა და ნაწილაკების ზომის მიხედვით.
- მას შემდეგ, რაც თქვენ აურიეთ ნარევი, აურიეთ ნარევი ულტრაბგერითი ლაბორატორიული ჰომოგენიზატორის გამოყენებით (მაგ., UP400St 22 მმ სონოტროდით 100% ამპლიტუდაზე ან UP200Ht 14 მმ სონოტროდით 100% ამპლიტუდაზე) და შეინარჩუნეთ ტემპერატურა 90°C-ზე დაბლა. დაბალი ტემპერატურა ხელს უწყობს სითბოსადმი მგრძნობიარე ნაერთების შენარჩუნებას, როგორიცაა ბეტა-გლუკანები ექსტრაქციის დროს. Sonicate დაახლოებით. 5-დან 10 წუთამდე UP400St-ის გამოყენებისას და 10-დან წუთამდე UP200Ht-ის გამოყენებისას, შესაბამისად. გთხოვთ გაითვალისწინოთ, რომ ტემპერატურა და მოპოვების დრო შეიძლება განსხვავდებოდეს გამოყენებული ულტრაბგერითი სიმძლავრის მიხედვით. რა თქმა უნდა, უფრო დიდი მოცულობები დასჭირდება გაჟღერების უფრო მეტ დროს.
- გაფილტრეთ გაჟღენთილი ნარევი ფილტრის ქაღალდის მეშვეობით ან გამოიყენეთ ვაკუუმური ფილტრაციის კონფიგურაცია სითხის (გამოღებული ბეტა-გლუკანების შემცველი) გამოსაყოფად სოკოს მყარი ნარჩენებისგან.
- შემდეგ სითხიდან ბეტა-გლუკანები დაასხით ალკოჰოლის (მაგ. ეთანოლის) დამატებით. როგორც წესი, ნალექისთვის შეგიძლიათ გამოიყენოთ 2-3 ტომი ალკოჰოლი.
- ამის შემდეგ შეინახეთ ნარევი მაცივარში რამდენიმე საათის განმავლობაში, რათა ბეტა-გლუკანებმა დაასველონ.
- ნალექის შემდეგ, შეგიძლიათ სითხე ფრთხილად გადაწუროთ და შეაგროვოთ ბეტა-გლუკანის ნალექი.
- ბოლოს, ბეტა-გლუკანები გააშრეთ ღუმელში დაბალ ტემპერატურაზე (მაგ., 40-50°C), სანამ ალკოჰოლი არ მოიხსნება და არ მიიღებთ მშრალ ფხვნილს.
სოკო ავლენს ცვალებადობას მათ მახასიათებლებში. ამრიგად, ბეტა-გლუკანის მოპოვების პროცესი შეიძლება განსხვავდებოდეს ისეთი ფაქტორების მიხედვით, როგორიცაა სოკოს სპეციფიკური სახეობა, სოკოს მდგომარეობა (ხმელი ან ახალი), ნაწილაკების ზომა და მოპოვების ტემპერატურა. თქვენი მოპოვების პროცედურის ოპტიმიზაციისთვის განიხილეთ ექსპერიმენტები სხვადასხვა პარამეტრებზე, მათ შორის მყარი-თხევადი თანაფარდობის ცვალებადობა, ტემპერატურის რეგულირება, სხვადასხვა გამხსნელების შესწავლა და გაჟონვის სხვადასხვა ხანგრძლივობისა და ამპლიტუდის პარამეტრების ტესტირება.
ბეტა-გლუკანის ულტრაბგერითი დახმარებით ფერმენტული ექსტრაქცია
ულტრაბგერითი დახმარებით ფერმენტული ექსტრაქცია არის მეთოდი, რომელიც გამოიყენება სოკოდან ბეტა-გლუკანების ამოღების მიზნით ფერმენტების და ულტრაბგერითი ტალღების კომბინაციის გამოყენებით. ეს პროცესი აძლიერებს ექსტრაქციის ეფექტურობას სოკოს უჯრედის კედლების ნგრევით და ბეტა-გლუკანების გამოყოფის გაადვილებით.
ბეტა-გლუკანის ექსტრაქციის მასშტაბის გაზრდა სოკოდან
მას შემდეგ, რაც შექმნით ბეტა-გლუკანის ექსტრაქციის პროტოკოლს, რომელიც აკმაყოფილებს თქვენს მოთხოვნებს, ექსტრაქციის პროცესის მასშტაბირება შეიძლება იყოს პირდაპირი მცდელობა.
სურათების მოპოვების მასშტაბი
თუ თქვენ გეგმავთ მასშტაბების გაზრდას სერიული მოპოვების მეთოდის გამოყენებით, ჩვენ გირჩევთ გაზარდოთ სერიის მოცულობა, ხოლო მყარი-თხევადი თანაფარდობა და ყველა სხვა პარამეტრი მუდმივი იყოს. თუ გააგრძელებთ იგივე ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორის გამოყენებას, დარწმუნდით, რომ პროპორციულად გაზარდეთ სონიკაციის დრო. 1 ლიტრზე მეტი სერიებისთვის, შეიძლება განიხილოთ ნელი შემრევის ჩართვა ნაწილაკების სუსპენზიის შესანარჩუნებლად და მოპოვების ერთგვაროვნების გასაუმჯობესებლად. ქვემოთ მოყვანილი სურათი გვიჩვენებს 8-ლიტრიანი სერიის მოპოვების კონფიგურაციას UP400St ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორის გამოყენებით ლაბორატორიულ ამრევთან ერთად.
Inline სოკოს ექსტრაქცია
მათთვის, ვინც დაინტერესებულია სოკოდან უფრო დიდი რაოდენობით ბეტა-გლუკანის მოპოვებით, Hielscher Ultrasonics გთავაზობთ ნაკადის უჯრედულ რეაქტორებს, რომლებიც შექმნილია ბოტანიკური მასალის მოპოვებისთვის. თუ ეს ეხება თქვენ, ჩვენ მოგიწოდებთ, დაგვიკავშირდეთ უშუალოდ დამატებითი ინფორმაციისთვის. ჩვენი ტექნიკური გუნდი სიამოვნებით დაგვეხმარება თქვენი კონკრეტული საჭიროებისთვის შესაფერისი კონფიგურაციის დადგენაში. თუმცა, ზემოთ ნახსენები ლაბორატორიული მასშტაბის ექსპერიმენტის ჩატარება თქვენი კონკრეტული სოკოს სახეობებთან შეიძლება იყოს ფასდაუდებელი პროცესის ზუსტი მოთხოვნების გასაგებად. ქვემოთ მოყვანილი სურათი გვიჩვენებს დიდი ნაკადის უჯრედის რეაქტორს UIP4000hdT ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორით ბეტა-გლუკანების მოსაპოვებლად საათში დაახლოებით 50-დან 200 ლიტრამდე სოკოს გამხსნელის ხსნარით.
სოკოს სახეობების ბეტა-გლუკანის ემპირიული კონცენტრაცია
ქვემოთ ნახავთ ბეტა-გლუკანის ემპირიული კონცენტრაციის ჩამონათვალს, რომელიც ამოღებულია სოკოს სხვადასხვა სახეობიდან.
სოკოს სახეობა | სულ 1,3-1,6-β-D-გლუკანი (გ/100გ მშრალი მასა) |
---|---|
ბოლეტუსი პინოფილუსი | 9,8% |
Suillus granulatus | 13,3% |
Craterellus cornucopioides | 4,5% |
Suillus variegatus | 13,7% |
Hydnum repandum | 4,1% |
Gyroporus cyanescens | 14,3% |
Tricholomopsis rutilans | 10,2% |
Agaricus bisporus (portobello) | 4% |
Agaricus bisporus (cremini) | 4% |
Auricularia auricular-judae | 16,8% |
1,3-1,6-β-D-გლუკანის შემცველობა გაანალიზებულ ველურად მზარდ და კულტივირებულ სოკოში, წყარო:Mirończuk-Chodakowska et al. (2017): 1,3-1,6-Β-D-გლუკანის შემცველობის რაოდენობრივი შეფასება საკვები პოლონური სოკოების ველურ-მზარდ სახეობებში. Rocz Panstw Zakl Hig 2017; 68 (3): 281-290.

SonoStation: მობილური ანაზრაურების სისტემა ულტრაბგერითი დამუშავებისთვის – შედგება ულტრაბგერითი დისპერსერებისგან, ტუმბოსგან, შემრევისა და ავზისგან

UIP4000hdT ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორი საათში დაახლოებით 50-დან 200 ლიტრამდე სოკოს გამხსნელის ხსნარის დასამუშავებლად
სოკოს ბეტა-გლუკანის ექსტრაქტის კონცენტრაციის რაოდენობრივი განსაზღვრა
ბეტა-გლუკანის კონცენტრაცია ექსტრაქციის შემდეგ შეიძლება რაოდენობრივად განისაზღვროს სხვადასხვა მეთოდით, ბეტა-გლუკანის ტიპისა და ანალიზის სპეციფიკური მოთხოვნების მიხედვით. ბეტა-გლუკანის კონცენტრაციის რაოდენობრივი განსაზღვრის საერთო მეთოდები ჩამოთვლილია ქვემოთ. რა თქმა უნდა, მეთოდის არჩევანი დამოკიდებულია ისეთ ფაქტორებზე, როგორიცაა საჭირო სიზუსტე და ხელმისაწვდომი აღჭურვილობა.
-
გრავიმეტრიული მეთოდი
- პრინციპი: ეს მეთოდი ეფუძნება ბეტა-გლუკანების ეთანოლთან დალექვას, რასაც მოჰყვება ნალექის გაშრობა და აწონვა.
- პროცედურა: ნიმუშს ხსნიან წყალში, ამუშავებენ ეთანოლს ბეტა-გლუკანების დასალექად და შემდეგ ნალექს აგროვებენ, აშრობენ და აწონიან.
- უპირატესობები: მარტივი და ფართოდ გამოყენებული.
- შეზღუდვები: სხვა მეთოდებთან შედარებით ნაკლებად ზუსტი.
-
კოლორიმეტრული მეთოდები
- პრინციპი: ეს მეთოდები მოიცავს ფერის რეაქციებს სპეციფიკურ რეაგენტებთან, რომლებიც წარმოქმნიან ფერის ცვლილებას ბეტა-გლუკანის კონცენტრაციის პროპორციულად.
-
მაგალითები:
- ფენოლ-გოგირდმჟავას მეთოდი: ეს მეთოდი გულისხმობს ნიმუშის დამუშავებას კონცენტრირებული გოგირდის მჟავით და ფენოლით, რაც ხსნარს ნარინჯისფერს ხდის. ფერის ინტენსივობა ბეტა-გლუკანის კონცენტრაციის პროპორციულია.
- ანთრონის მეთოდი: ანთრონის რეაგენტი რეაგირებს ბეტა-გლუკანებთან და წარმოქმნის ლურჯ-მომწვანო ფერს და იზომება ფერის ინტენსივობა.
- უპირატესობები: მგრძნობიარე და შესაფერისია მაღალი გამტარუნარიანობის ანალიზისთვის.
- შეზღუდვები: ჩარევა სხვა ნაერთებისგან და სპეციფიკური რეაგენტების საჭიროება.
-
ფერმენტული ანალიზები
- პრინციპი: ფერმენტული ანალიზები იყენებენ ფერმენტებს, როგორიცაა β-გლუკანაზა ბეტა-გლუკანების უფრო მარტივ შაქრებად დასაშლელად და გამოთავისუფლებული შაქრების რაოდენობრივი განსაზღვრა.
- უპირატესობები: ძალიან სპეციფიკური და ზუსტი.
- შეზღუდვები: საჭიროებს სპეციალიზებულ აღჭურვილობას და რეაგენტებს.
-
მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფია (HPLC)
- პრინციპი: HPLC გამოყოფს და რაოდენობრივად განსაზღვრავს ნაერთებს ქრომატოგრაფიულ სვეტთან მათი ურთიერთქმედების საფუძველზე.
- პროცედურა: ბეტა-გლუკანები ჰიდროლიზდება მონოსაქარიდებად და მიღებული შაქრები გამოიყოფა და რაოდენობრივად ფასდება HPLC-ით.
- უპირატესობები: ძალიან ზუსტი და შესაფერისია რთული ნიმუშებისთვის.
- შეზღუდვები: საჭიროებს სპეციალიზებულ აღჭურვილობას და გამოცდილებას.
-
სპეციფიკური იმუნოანალიზები
- პრინციპი: იმუნოანალიზები იყენებენ ბეტა-გლუკანებისთვის სპეციფიკურ ანტისხეულებს მათი კონცენტრაციის რაოდენობრივი დასადგენად.
-
მაგალითები:
- ELISA (ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი): ამ მეთოდით ფერმენტთან დაკავშირებული ანტისხეული წარმოქმნის ფერის ცვლილებას ბეტა-გლუკანებთან შეერთებისას.
- გვერდითი ნაკადის ანალიზი: ეს არის სწრაფი ტესტები, რომლებიც იძლევა თვალსაჩინო შედეგს ტესტის ზოლზე.
- უპირატესობები: მაღალი სპეციფიკა და მგრძნობელობა.
- შეზღუდვები: მოითხოვს სპეციფიკურ ანტისხეულებს და შეიძლება უფრო ძვირი იყოს.