Metabolomik Difasilitasi oleh Sonikasi Throughput Tinggi

Metabolomik adalah bidang penelitian yang menggunakan teknik throughput tinggi untuk mengkarakterisasi dan mengukur molekul kecil dalam berbagai biofluida, seperti urin, serum, plasma, tinja, dan air liur, mengungkap tanda tangan metabolisme yang unik. UIP400MTP sonicator throughput tinggi, yang dirancang untuk pelat multi-sumur, adalah alat yang ampuh untuk melisiskan sel dalam sampel ini, memfasilitasi pelepasan metabolit untuk analisis hilir. Pendekatan yang tepat dan andal ini sangat penting untuk metabolomik, di mana desain studi yang akurat, persiapan sampel yang cermat, pengaturan platform yang dioptimalkan, analisis data yang komprehensif, dan interpretasi biologis yang bermakna adalah yang terpenting. Metabolomik menggunakan kedua pendekatan yang ditargetkan, yang berfokus pada kelas molekul tertentu seperti karbohidrat, lipid, dan asam amino, dan teknik non-target, yang memberikan gambaran luas tentang profil metabolisme dalam sampel, mengungkapkan kompleksitas pensinyalan metabolisme yang rumit.

Persiapan Sampel Throughput Tinggi dengan Sonicator Pelat 96 Sumur UIP400MTP

Menggunakan UIP400MTP sonicator non-kontak yang dikombinasikan dengan pelat 96 sumur adalah metode yang efisien untuk homogenisasi throughput tinggi dan ekstraksi metabolit. Pengaturan ini menghindari kontak langsung dengan sampel, mengurangi risiko kontaminasi silang saat memproses beberapa sampel secara bersamaan.

Protokol Langkah demi Langkah untuk Homogenisasi dengan 96-Well Sonicator UIP400MTP

1. Persiapan Sampel Metabolomik
   Penempatan Sampel: Keluarkan setiap sampel (misalnya, tinja, jaringan usus, atau isi luminal) ke dalam sumur individu dari pelat atau pelat mikro 96 sumur.
   Pelarut: Pelarut organik, seperti metanol, etanol, asetonitril, kloroform, dan campuran (air), sangat penting untuk ekstraksi metabolit, membantu pelepasan metabolit intraseluler dari matriks seluler. Gunakan 100–300 μL pelarut per sumur, pastikan volume yang cukup untuk merendam sampel sepenuhnya.
   Standar Internal: Secara opsional, tambahkan standar internal ke setiap sumur untuk normalisasi selama analisis metabolomik hilir.
2. Pengaturan Media Coupling
   Ketinggian air: Tempatkan pelat 96well pada platform sonikasi yang diisi dengan air (media kopling) seperti yang dijelaskan dalam manual.
3. UIP400MTP Konfigurasi Parameter
   Pengaturan Daya: Sesuaikan amplitudo ultrasonik hingga 50–80% dari daya maksimum untuk homogenisasi yang efisien.
   Mode Pulsa: Atur siklus sonikasi ke pulsa alternatif (misalnya, 30 detik ON, 30 detik OFF) untuk memungkinkan pendinginan dan mencegah sample terlalu panas.
   Total waktu: 4–10 menit, tergantung pada kompleksitas dan ketangguhan sampel.
   Kontrol Suhu: Gunakan pendingin laboratorium untuk mempertahankan air pada suhu 4-8 °C selama sonikasi untuk melindungi metabolit yang peka terhadap panas.
4. Proses sonikasi
   Mulai UIP400MTP untuk siklus sonikasi.
   Pantau proses melalui antarmuka UIP400MTP.
   Efek kavitasi akan menghomogenkan sampel dan melisiskan sel di dalam sumur, melepaskan metabolit intraseluler ke dalam pelarut.
5. Pascasonikasi
   Sentrifugasi: Setelah sonikasi, pindahkan isi pelat ke tabung pengumpul jika diperlukan. Centrifuge pada 4.000–6.000 × g selama 10 menit untuk membuat pelet puing-puing yang tidak larut dan bahan seluler.
   Koleksi Supernatan: Pindahkan supernatan dengan hati-hati dari setiap sumur ke dalam tabung atau pelat baru untuk dianalisis.
   Pengeringan opsional: Keringkan supernatan menggunakan konsentrator vakum (misalnya, SpeedVac) jika konsentrasi diperlukan, kemudian larutkan kembali dalam volume kecil pelarut yang sesuai.

Manfaatkan kapasitas pemrosesan throughput tinggi dari sonicator pelat multi-sumur UIP400MTP dan fasilitasi penelitian dan analisis metabolomik Anda!

Prinsip Sonikasi Non-Kontak dengan UIP400MTP

UIP400MTP menerapkan gelombang ultrasonik ke sumur pelat 96 sumur secara tidak langsung melalui media kopling (misalnya, air). Gelombang ini menciptakan kavitasi, yang mengganggu sel dan melepaskan metabolit tanpa kontak fisik antara probe sonicator dan sampel.

Desain, Manufaktur, dan Konsultasi – Kualitas Buatan Jerman

Ultrasonicators Hielscher terkenal dengan kualitas dan standar desainnya yang tertinggi. Ketahanan dan pengoperasian yang mudah memungkinkan integrasi ultrasonicator kami ke dalam fasilitas industri. Kondisi kasar dan lingkungan yang menuntut mudah ditangani oleh ultrasonicator Hielscher.

Hielscher Ultrasonics adalah perusahaan bersertifikat ISO dan memberikan penekanan khusus pada ultrasonicators berkinerja tinggi yang menampilkan teknologi canggih dan keramahan pengguna. Tentu saja, ultrasonicators Hielscher sesuai dengan CE dan memenuhi persyaratan UL, CSA dan RoHs.