Ultraheli proovi ettevalmistamine THC analüüsiks
- Ultraheli ekstraheerimine on tõestatud meetod THC tootmiseks, kuid seda saab kasutada ka analüütilistel eesmärkidel.
- Ultraheli on tavaline proovi ettevalmistamise meetod, mida kasutatakse kanepitoodete THC üldsisalduse analüüsimiseks.
- Ultraheli ekstraheerimine kantakse proovidele enne TLC, GC ja HPLC analüüsi.
Ultraheli THC ekstraheerimine
THC või tetrahüdrokannabinool (delta-9-tetrahüdrokannabinool) on kemikaal, mis põhjustab enamiku marihuaana psühholoogilistest mõjudest. Kanepiliikide puhul võib olla teada rohkem kui 400 erinevat tüve. Sõltuvalt konkreetsest kanepitüvest võib kanepis olla vaid 0,3 massiprotsenti THC-d. Teistes tüvedes võib THC sisaldus ulatuda kuni 20 massiprotsendini.
Ka erinevad kanepitooted varieeruvad märkimisväärselt: Nii ulatub keskmine THC kontsentratsioon marihuaanas vahemikus 1 kuni 5%; hašišis on THC sisaldus vahemikus 5 kuni 15% ja hašišiõlis keskmiselt 20%. THC marihuaana meelelahutuslikes annustes on väga varieeruv ja mida madalam on marihuaana THC sisaldus, seda rohkem peab kasutaja soovitud efektide kogemiseks tarbima.
THC sisalduse analüüsimiseks kasutatakse ultraheli proovi ettevalmistamist
- meelelahutuslike THC-toodete kvaliteedikontrolliks, t
- farmatseutiliste THC-toodete kvaliteedi määramiseks,
- uimasti-kanepi ja kiu-kanepi eristamiseks.
THC-analüüsiks kasutatakse tavaliselt järgmisi kromatograafilisi meetodeid: planaarkromatograafia (TLC), gaasikromatograafia (GC) ja kõrgefektiivne vedelikkromatograafia (HPLC)
TLC analüüsi ultraheli proovi ettevalmistamise protokoll
Proovi ettevalmistamine: Proovide ettevalmistamiseks tuleb kuivatatud taimset materjali leotada ja jahvatada homogeenseks pulbriks. Ultraheli ekstraheerimiseks segatakse viaalis 500 mg kanepitaime pulbrit ja 5 ml metanooli-kloroformi segu (suhe 9 : 1). Sonikatsiooni saab rakendada, kasutades Ultrasonikaator mikrootsaga on VialTweeter või ultraheli kupael. Ultrahelitöötluse aeg võtab aega umbes 5 min. Seejärel laske proovil vähemalt 5 minutit puhata. Läbipaistev supernatant lahjendatakse ekstraheerimisseguga (mahu/maht: 1:10). Vaba THC: 1 μL ÕKK-plaadil
Dekarboksüülimine: 100 μl ekstrakti aurustatakse kuivaks. Jääki kuumutatakse 180 °C juures 4 minutit. Lisatakse 500 μl metanooli ja kloroformi (mahu 9:1). Sonikaati 5 minutit. Läbipaistev supernatant lahjendatakse ekstraheerimisseguga (mahu/maht: 1:10).
Kalibreerimine: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silikageel F-254, Merck 5729
TLC skanner II, tarkvara CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Etüülatsetaat: toluool: kloroform = 3: 17: 0,25 (v/v/v)
Postkromatograafiline derivatiseerimine: kiire sinine sool 0,1% 0,1 M NaOH-s
Densitomeetria lainepikkusel 550 nm
Tetrahüdrokannabinool (Δ9-THC) analüüsiks ja ekstraheerimiseks
Ultraheli proovi ettevalmistamise protokoll GC analüüsi jaoks
Proovi ettevalmistamine: kuivatatud taimset materjali leotatakse ja jahvatatakse homogeenseks pulbriks. Ekstraheerimiseks segatakse viaalis 500 mg kanepitaime pulbrit ja 10 ml metanooli-heksaani segu (suhe 9: 1). Sonikatsiooni saab rakendada kasutades a sondi tüüpi ultraheli seade mikrootsaga on VialTweeter või ultraheli kupael. Sonikeerige proovi 15-20 minutit. Proovi loksutatakse ja lastakse vähemalt 5 minutit seista. Läbipaistev supernatant lahjendatakse ekstraheerimisseguga (mahuvahe 1: 20).
Dekarboksüliatsioon: sisetükis
Injektori temperatur 250°C
Kalibreerimine: 5 ng/μl kuni 250 ng/μl
GC: HP 6890 koos 5973 MSD ja 7683 automaatproovivõtja sissepritsega: 1 μL, jaotuseta aeg: 2 min.
Kolonn: HP-5 MS, 30 m, läbimõõt 250 μm, kile paksus 0,25 μm
Kandegaas: He, 35 psi, pidev vool: 4 ml / min.
Ahi: 100 °C 1 minutit; temperatuuri tõus 15 °C / min kuni 280 °C; 280 °C 5 min. MSD: SKANEERIMINE: m/e 35 – 550
HPLC analüüsi ultraheli proovi ettevalmistamise protokoll
Proovi ettevalmistamine (analoog GC ettevalmistusele): Kuivatatud taimset materjali leotatakse ja jahvatatakse homogeenseks pulbriks. Ekstraheerimiseks segatakse viaalis 500 mg kanepitaime pulbrit ja 10 ml metanooli-heksaani segu (suhe 9: 1). Sonikatsiooni saab rakendada kasutades a sondi tüüpi ultrasonikaator mikrootsaga on VialTweeter või ultraheli kupael. Sonikeerige proovi 15-20 minutit. Proovi loksutatakse ja lastakse vähemalt 5 minutit seista. Läbipaistev supernatant lahjendatakse ekstraheerimisseguga (mahuvahe 1: 20).
VialTweeter ultraheli proovi ettevalmistamiseks
Precolumn: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Veerg: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluent: isokraatne 36% TEAP 25 mmol/l, 64% atsetonitriili kvantifitseerimine 210 nm juures
Kalibreerimine: 0,001 – 0,10 μg/μl
Kalibreerimine: 0,01 – 0,50 μg/μl
Retentsiooniaeg: CBD puhul: 6,2 min.; CBN puhul 8,0 min; THC puhul: 9,4 min.; THC-A puhul: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St mikro-otsaga proovi ultrahelitöötluseks
Kirjandus / viited
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Taotlus 2006.
Faktid, mida tasub teada
marihuaana koosneb kuivatatud lilledest ja emase kanepitaime lehtedest ja vartest. See on kõige laialdasemalt tarbitav vorm ja sisaldab umbes 3–20% THC-d. Marihuaana spetsiifilised, kõrgelt kasvatatud vormid saavutavad THC sisalduse üle 30%. Marihuaana on lähtematerjaliks kõik muud THC-d sisaldavad kanepitooted. Kõige rikkalikuma kannabinoidi, tetrahüdrokannabinoolhappe (THCA) muutmiseks psühhoaktiivseks THC-ks tuleb alustada dekarboylatsiooniprotsessi. Seetõttu tuleb kanepit ja selle ekstrakte dekarboksüülimise tekitamiseks kuumutada või veetustada.
Kief viitab pulbrile, mis sisaldab rohkesti trihhoomi, mis sõelutakse kanepi lehtedest ja lilledest. Seda tarbitakse kas pulbrina või pressitakse ja kasutatakse hašišikookides.
Hašiš või hash on kontsentreeritud vaigukook või pall, mis on toodetud kas pressitud kiefist või vaigust, mis kraabitakse taime pinnalt ja rullitakse pallideks. See esineb erinevates värvides mustast kuldpruunini, sõltuvalt puhtusest ja allikast. Seda võib tarbida suu kaudu või suitsetada, nt torus, vesipiibus, bongis, mullitajas, aurustis, kuuma noa abil, suitsutatud liigestes, segatud kanepipungade või tubakaga, suitsutatud pudelitoksidena või kasutada toidu koostisosana.
Kanepi tinktuur Viitab kannabinoidide ekstraktile alkoholis. Kannabinoidid ekstraheeritakse kanepitaimest, kasutades tinktuuri loomiseks kõrgkindlaid piiritusjooke (enamasti teraviljaalkoholi).
räsiõli on lahustiga ekstraheerimisel toodetud kannabinoidide vaiguline maatriks, mis on moodustatud kõvastunud või viskoosseks massiks. Räsiõli on üks tugevamaid kanepitooteid oma kõrge psühhoaktiivse ühendi sisalduse tõttu. Butaanis ja ülekriitilises süsinikdioksiidis ekstraheeritud räsiõli kasutamine on viimasel ajal üha populaarsemaks muutunud.
Infusioonid viitavad erinevat tüüpi kanepi infusioonidele, mis erinevad üksteisest mitmesuguste lenduvate lahustite poolest, mida saab kasutada kanepi infusiooni valmistamiseks. Sellise infusiooni valmistamiseks segatakse kanepi taimsed ained lahustiga ning seejärel pressitakse ja filtreeritakse, et õlid taimest lahustisse viia. Kakaovõi, piimavõi, toiduõli, glütseriin ja naha niisutajad on tavaliselt kasutatavad lahustid.
meditsiiniline marihuaana viitab kanepitaime kasutamisele arsti soovitatud taimse ravina, samuti sünteetilise THC ja kannabinoididena. See kasutamine nõuab tavaliselt retsepti ja levitamine toimub tavaliselt kohalike seadustega määratletud raamistikus. Mitmed uuringud on näidanud, et kanepi või selle derivaatide kasutamine toimib näiteks kemoteraapiast põhjustatud iivelduse ja oksendamise, neuropaatilise valu ja hulgiskleroosi vastu.