Η μεταβολομική διευκολύνεται με κατεργασία με υπερήχους υψηλής διεκπεραιωτικής ικανότητας

Η μεταβολομική είναι το ερευνητικό πεδίο που χρησιμοποιεί τεχνικές υψηλής διεκπεραιωτικής ικανότητας για τον χαρακτηρισμό και την ποσοτικοποίηση μικρών μορίων σε διάφορα βιολογικά υγρά, όπως ούρα, ορό, πλάσμα, κόπρανα και σάλιο, αποκαλύπτοντας μοναδικές μεταβολικές υπογραφές. Η συσκευή υπερήχων υψηλής διεκπεραιωτικής ικανότητας UIP400MTP, σχεδιασμένη για πλάκες πολλαπλών βοθρίων, αποτελεί ισχυρό εργαλείο για τη λύση των κυττάρων σε αυτά τα δείγματα, διευκολύνοντας την απελευθέρωση μεταβολιτών για επακόλουθη ανάλυση. Αυτή η ακριβής και αξιόπιστη προσέγγιση είναι ουσιώδης για τη μεταβολομική, όπου ο ακριβής σχεδιασμός της μελέτης, η σχολαστική προετοιμασία των δειγμάτων, η βελτιστοποιημένη διαμόρφωση της πλατφόρμας, η ολοκληρωμένη ανάλυση των δεδομένων και η ουσιαστική βιολογική ερμηνεία έχουν πρωταρχική σημασία. Η μεταβολομική χρησιμοποιεί τόσο στοχευμένες προσεγγίσεις, οι οποίες εστιάζουν σε συγκεκριμένες κατηγορίες μορίων, όπως υδατάνθρακες, λιπίδια και αμινοξέα, όσο και μη στοχευμένες τεχνικές, οι οποίες παρέχουν μια ευρεία επισκόπηση των μεταβολικών προφίλ ενός δείγματος, αποκαλύπτοντας τη σύνθετη πολυπλοκότητα της μεταβολικής σηματοδότησης.

Προετοιμασία δειγμάτων υψηλής διεκπεραιωτικής ικανότητας με τη συσκευή υπερήχων UIP400MTP για πλάκες 96 βοθρίων

Η χρήση της συσκευής υπερήχων χωρίς επαφή UIP400MTP σε συνδυασμό με πλάκες 96 βοθρίων αποτελεί αποτελεσματική μέθοδο για ομογενοποίηση και εκχύλιση μεταβολιτών υψηλής διεκπεραιωτικής ικανότητας. Αυτή η διάταξη αποφεύγει την άμεση επαφή με το δείγμα, μειώνοντας τον κίνδυνο διασταυρούμενης επιμόλυνσης κατά την ταυτόχρονη επεξεργασία πολλαπλών δειγμάτων.

Πρωτόκολλο βήμα προς βήμα για ομογενοποίηση με τη συσκευή υπερήχων UIP400MTP για πλάκες 96 βοθρίων

1. Προετοιμασία δειγμάτων για μεταβολομική ανάλυση
   Τοποθέτηση δειγμάτων: Διανείμετε κάθε δείγμα (π.χ. κόπρανα, εντερικό ιστό ή περιεχόμενο του εντερικού αυλού) σε ξεχωριστά βοθρία μιας πλάκας ή μικροπλάκας 96 βοθρίων.
   Διαλύτης: Οι οργανικοί διαλύτες, όπως η μεθανόλη, η αιθανόλη, το ακετονιτρίλιο, το χλωροφόρμιο και τα (υδατικά) μείγματά τους, είναι απαραίτητοι για την εκχύλιση μεταβολιτών, καθώς συμβάλλουν στην απελευθέρωση ενδοκυτταρικών μεταβολιτών από την κυτταρική μήτρα. Χρησιμοποιήστε 100–300 µL διαλύτη ανά βοθρίο, εξασφαλίζοντας επαρκή όγκο για την πλήρη βύθιση του δείγματος.
   Εσωτερικά πρότυπα: Προαιρετικά, προσθέστε εσωτερικά πρότυπα σε κάθε βοθρίο για κανονικοποίηση κατά την επακόλουθη μεταβολομική ανάλυση.
2. Προετοιμασία του μέσου σύζευξης
   Στάθμη νερού: Τοποθετήστε την πλάκα 96 βοθρίων στην πλατφόρμα κατεργασίας με υπερήχους που είναι γεμάτη με νερό (το μέσο σύζευξης), όπως περιγράφεται στο εγχειρίδιο.
3. Διαμόρφωση παραμέτρων της UIP400MTP
   Ρυθμίσεις ισχύος: Ρυθμίστε το πλάτος των υπερήχων στο 50–80% της μέγιστης ισχύος για αποτελεσματική ομογενοποίηση.
   Παλμική λειτουργία: Ρυθμίστε τον κύκλο κατεργασίας με υπερήχους ώστε να εναλλάσσονται παλμοί λειτουργίας και παύσης (π.χ. 30 δευτερόλεπτα λειτουργίας, 30 δευτερόλεπτα παύσης), για να επιτρέπεται η ψύξη και να αποτρέπεται η υπερθέρμανση των δειγμάτων.
   Συνολικός χρόνος: 4–10 λεπτά, ανάλογα με την πολυπλοκότητα και την ανθεκτικότητα του δείγματος.
   Έλεγχος θερμοκρασίας: Χρησιμοποιήστε έναν εργαστηριακό ψύκτη για να διατηρείτε το νερό στους 4–8°C κατά την κατεργασία με υπερήχους, ώστε να προστατεύονται οι θερμοευαίσθητοι μεταβολίτες.
4. Διαδικασία κατεργασίας με υπερήχους
   Θέστε σε λειτουργία την UIP400MTP για τους κύκλους κατεργασίας με υπερήχους.
   Παρακολουθήστε τη διαδικασία μέσω της διεπαφής της UIP400MTP.
   Η δράση της σπηλαίωσης θα ομογενοποιήσει τα δείγματα και θα προκαλέσει λύση των κυττάρων μέσα στα βοθρία, απελευθερώνοντας ενδοκυτταρικούς μεταβολίτες στον διαλύτη.
5. Μετά την κατεργασία με υπερήχους
   Φυγοκέντρηση: Μετά την κατεργασία με υπερήχους, μεταφέρετε το περιεχόμενο της πλάκας σε σωληνάρια συλλογής, εάν χρειάζεται. Φυγοκεντρήστε στα 4.000–6.000 × g για 10 λεπτά, ώστε τα αδιάλυτα υπολείμματα και το κυτταρικό υλικό να σχηματίσουν ίζημα.
   Συλλογή υπερκειμένου: Μεταφέρετε προσεκτικά το υπερκείμενο από κάθε βοθρίο σε νέα σωληνάρια ή πλάκες για ανάλυση.
   Προαιρετική ξήρανση: Ξηράνετε τα υπερκείμενα χρησιμοποιώντας συμπυκνωτή κενού (π.χ. SpeedVac), εάν απαιτείται συμπύκνωση, και στη συνέχεια ανασυστήστε τα σε μικρό όγκο του κατάλληλου διαλύτη.

Αξιοποιήστε την υψηλή διεκπεραιωτική ικανότητα επεξεργασίας της συσκευής υπερήχων UIP400MTP για πλάκες πολλαπλών βοθρίων και διευκολύνετε τη μεταβολομική έρευνα και ανάλυσή σας!

Αρχή της κατεργασίας με υπερήχους χωρίς επαφή με την UIP400MTP

Το UIP400MTP εφαρμόζει κύματα υπερήχων στα βοθρία μιας πλάκας 96 βοθρίων έμμεσα, μέσω ενός μέσου σύζευξης (π.χ. νερού). Αυτά τα κύματα δημιουργούν σπηλαίωση, η οποία προκαλεί κυτταρική διάρρηξη και απελευθερώνει μεταβολίτες χωρίς φυσική επαφή μεταξύ του ακροδέκτη της συσκευής υπερήχων και του δείγματος.

Σχεδιασμός, κατασκευή και συμβουλευτική – Ποιότητα κατασκευασμένη στη Γερμανία

Οι συσκευές υπερήχων της Hielscher είναι ευρέως γνωστές για τα υψηλότερα πρότυπα ποιότητας και σχεδιασμού τους. Η στιβαρότητα και ο εύκολος χειρισμός επιτρέπουν την ομαλή ενσωμάτωση των συσκευών υπερήχων μας σε βιομηχανικές εγκαταστάσεις. Οι συσκευές υπερήχων της Hielscher ανταποκρίνονται με ευκολία σε αντίξοες συνθήκες και απαιτητικά περιβάλλοντα.

Η Hielscher Ultrasonics είναι μια εταιρεία πιστοποιημένη κατά ISO και δίνει ιδιαίτερη έμφαση στις συσκευές υπερήχων υψηλών επιδόσεων που διαθέτουν τεχνολογία αιχμής και είναι φιλικές προς τον χρήστη. Φυσικά, οι συσκευές υπερήχων της Hielscher συμμορφώνονται με τις απαιτήσεις CE και πληρούν τις απαιτήσεις των UL, CSA και RoHs.