Ultrazvuková příprava vzorku pro analýzu THC
- Ultrazvuková extrakce je osvědčená metoda pro výrobu THC, ale lze ji použít i pro analytické účely.
- Ultrazvuku je běžná metoda přípravy vzorku používaná pro analýzu celkového obsahu THC v konopných produktech.
- Ultrazvuková extrakce se aplikuje na vzorky před analýzou TLC, GC a HPLC.
Ultrazvuková extrakce THC
THC, or tetrahydrocannabinol (delta-9-tetrahydrocannabinol), is the chemical that causes most of marijuana’s psychological effects. For the cannabis species, can be more than 400 different strains are known. Depending on the specific cannabis strain, cannabis can have as little as 0.3 wt% THC. In other strains, the THC content can reach up to 20 wt%.
Také různé konopné produkty se výrazně liší: Průměrná koncentrace THC v marihuaně se tedy pohybuje mezi 1 až 5 %; v hašiši se obsah THC pohybuje mezi 5 až 15 % a v hašišovém oleji je to v průměru 20 %. THC v rekreačních dávkách marihuany je velmi variabilní a čím nižší je obsah THC v marihuaně, tím více ho musí uživatel konzumovat, aby pocítil požadované účinky.
K analýze obsahu THC se používá ultrazvuková příprava vzorku
- pro kontrolu kvality rekreačních produktů THC,
- pro stanovení kvality farmaceutických produktů THC,
- pro rozlišení drogy-konopí a vlákna-konopí.
Pro analýzu THC se běžně používají následující chromatografické metody: tenkovrstvá chromatografie (TLC), plynová chromatografie (GC) a vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC)
Ultrazvukový protokol pro přípravu vzorku pro analýzu TLC
Příprava vzorku: Pro přípravu vzorků musí být sušený rostlinný materiál macerován a rozemlet na homogenní prášek. Pro ultrazvukovou extrakci se v lahvičce smíchá 500 mg prášku z rostliny konopí a 5 ml směsi methanolu a chloroformu (poměr 9 : 1). Sonikace může být aplikována pomocí Ultrazvukový přístroj s mikro hrotem, VialTweeter nebo ultrazvukový Roh Poháru. Doba sonikace trvá cca. 5 min. Poté nechte vzorek odpočívat po dobu nejméně 5 minut. Čirý supernatant se zředí extrakční směsí (v/v: 1 : 10). Volné THC: 1 μL na TLC desce
Dekarboxylace: 100 μl extraktu se odpaří do sucha. Zbytek se zahřívá na 180 °C po dobu 4 minut. Přidejte 500 μl methanol-chloroformu (v/v 9 : 1). Sonikovat po dobu 5 min. Čirý supernatant se zředí extrakční směsí (v/v: 1 : 10).
Kalibrace: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silikagel F-254, Merck 5729
TLC skener II, software CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Ethylacetát : Toluol : Chloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Postchromatografická derivatizace: Rychle modrá sůl 0,1 % v 0,1 M NaOH
Denzitometrie při 550 nm
Tetrahydrokanabinol (Δ9-THC) pro analýzu a extrakci
Ultrazvukový protokol pro přípravu vzorku pro analýzu GC
Příprava vzorku: Sušený rostlinný materiál se maceruje a rozemele na homogenní prášek. Pro extrakci se v lahvičce smíchá 500 mg prášku z rostlin konopí a 10 ml směsi methanolu a hexanu (poměr 9 : 1). Sonikace může být aplikována pomocí a Ultrazvukové zařízení typu sondy s mikro hrotem, VialTweeter nebo ultrazvukový Roh Poháru. Sonikujte vzorek po dobu 15-20 min. Vzorek se protřepe a nechá se odpočívat alespoň 5 minut. Čirý supernatant se zředí extrakční směsí (v/v 1: 20).
Dekarboxylace: ve vložce
Teplota vstřikovače 250°C
Kalibrace: 5 ng/μl až 250 ng/μl
GC: HP 6890 s 5973 MSD a 7683 autosampler vstřikování: 1 μl, splitless čas: 2 min.
Kolona: HP-5 MS, 30 m, průměr 250 μm, tloušťka filmu 0,25 μm
Nosný plyn: He, 35 psi, konstantní průtok: 4 ml/min.
Trouba: 100 °C po dobu 1 minuty; zvýšení teploty o 15 °C? min. na 280 °C; 280 °C po dobu 5 min. MSD: SKENOVÁNÍ: m/e 35 – 550
Ultrazvukový protokol přípravy vzorku pro analýzu HPLC
Příprava vzorku (analogie GC prep): Vysušený rostlinný materiál se maceruje a rozemele na homogenní prášek. Pro extrakci se v lahvičce smíchá 500 mg prášku z rostlin konopí a 10 ml směsi methanolu a hexanu (poměr 9 : 1). Sonikace může být aplikována pomocí a ultrazvukový přístroj typu sondy s mikro hrotem, VialTweeter nebo ultrazvukový Roh Poháru. Sonikujte vzorek po dobu 15-20 min. Vzorek se protřepe a nechá se odpočívat alespoň 5 minut. Čirý supernatant se zředí extrakční směsí (v/v 1: 20).
VialTweeter pro ultrazvukovou přípravu vzorků
Prekolona: LiChrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50963)
Sloupec: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluent: izokratický 36% TEAP 25 mmol/l, 64% acetonitril, kvantifikace při 210 nm
Kalibrace: 0,001 – 0,10 μg/μL
Kalibrace: 0,01 – 0,50 μg/μl
Retenční čas: pro CBD: 6,2 min.; pro CBN: 8,0 min.; pro THC: 9,4 min.; pro THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St s mikrohrotem pro sonikaci vzorku
Literatura/Odkazy
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
Fakta, která stojí za to vědět
marihuana se skládá ze sušených květů a subtilních listů a stonků samičí rostliny konopí. Jedná se o nejrozšířenější konzumovanou formu a obsahuje přibližně 3 % až 20 % THC. Specifické, vysoce šlechtěné formy marihuany dosahují obsahu THC více než 30%. Marihuana je zdrojovým materiálem všech ostatních odrůd konopných produktů obsahujících THC. K přeměně nejrozšířenějšího kanabinoidu, kyseliny tetrahydrokanabinolové (THCA), na psychoaktivní THC, musí být zahájen proces dekarboylace. Proto musí být konopí a jeho extrakty zahřáté nebo dehydratované, aby došlo k dekarboxylaci.
Kief Odkazuje na prášek bohatý na trichomy, který se prosévá z listů a květů konopí. Konzumuje se buď ve formě prášku, nebo lisovaný a používá se do hašišových koláčů.
hašiš Nebo hašiš je koncentrovaný pryskyřičný koláč nebo koule, která se vyrábí buď z lisovaného skiefu, nebo z pryskyřice, která se seškrábne z povrchu rostliny a sroluje se do kuliček. Vyskytuje se v různých barvách od černé po zlatohnědou v závislosti na čistotě a zdroji. Může být konzumován perorálně nebo kouřen, např. v dýmce, vodní dýmce, bongu, bublinkovači, vaporizéru, pomocí horkého nože, uzen v jointech, smíchán s konopnými pupeny nebo tabákem, kouřit jako lahve nebo použit jako přísada do potravin.
konopná tinktura odkazuje na extrakt kanabinoidů v alkoholu. Kanabinoidy se extrahují z rostliny konopí pomocí vysoce odolných lihovin (většinou obilného alkoholu) k vytvoření tinktury.
hašišový olej je pryskyřičná matrice kanabinoidů produkovaná extrakcí rozpouštědlem, zformovaná do ztvrdlé nebo viskózní hmoty. Hašišový olej je jedním z nejúčinnějších konopných produktů díky vysokému obsahu psychoaktivních látek. Použití hašišového oleje extrahovaného v butanu a superkritickém oxidu uhličitém si v poslední době získává stále větší oblibu.
Infuze Odkazují na různé druhy konopných nálevů, které se od sebe liší širokou škálou netěkavých rozpouštědel, která lze použít k výrobě konopného nálevu. Pro přípravu takového nálevu se rostlinná hmota konopí smíchá s rozpouštědlem a poté se lisuje a filtruje, aby se oleje z rostliny přenesly do rozpouštědla. Kakaové máslo, mléčné máslo, kuchyňský olej, glycerin a zvlhčovače pokožky jsou běžně používaná rozpouštědla.
Lékařská marihuana odkazuje na použití rostliny konopí jako lékařsky doporučené bylinné terapie, stejně jako syntetické THC a kanabinoidy. Toto použití obecně vyžaduje lékařský předpis a distribuce se obvykle provádí v rámci definovaném místními zákony. Několik výzkumných studií prokázalo, že užívání konopí nebo jeho derivátů působí např. proti nevolnosti a zvracení vyvolaným chemoterapií, neuropatické bolesti a roztroušené skleróze.