Produkující Biologicky rozložitelné nanočástice
Úvod
Biologicky rozložitelný mikro- a nanočástice (MS, NS) z poly (laktid-koglykolid) (PLGA) a další materiály jsou velmi účinným přípravkem a podání antigenu systémy s vlastní potenciál pro drogy a antigen cílení. Současné metody pro produkci PLGA NS jsou typické dávkové procesy a trpí obtížemi zvýšení rozlišení za sterilních podmínek. Zde jsme představit nový a elegantní způsob vyrábět PLGA NS v kontinuální, bezkontaktní a bez kontaminace proces , které mohou být snadno spouštět za sterilních podmínek. V průběhu celého výrobního procesu, je výrobek v přímém styku pouze se sterilním skla a Teflon® trubek. Tento proces může probíhat v uzavřeném systému, aby se zabránilo jakékoliv kontaminaci životního prostředí.
Metody
PLGA50: 50 nanočástic (Resomer® RG503H, Boehringer Ingelheim), byly vyrobeny s použitím modifikovaného rozpouštědla proces extrakce / evaporace [1]. PLGA se rozpustí v dichlormethanu (2 nebo 5%) se disperguje ve vodném 0,5% (m / m) PVA roztoku pomocí nových Experimentální sestava zahrnující bezkontaktní průtokový ultrazvuku buňka, Hrubý O / W-disperze se nejprve předem smísena magnetickým míchadlem a poté homogenizovány v ultrazvukové průtokové buňky (Průtoky O- a W-fáze se v poměru 1: 8). Původně vytvořeného PLGA-rozpouštědlo nanodroplets postupně tuhne během průchodu v trubkách, aby se stal PLGA nanočástic. Konečné vytvrzení částic bylo dosaženo většího objemu 0,5% roztoku PVA.
Obr. 1: Experimentální uspořádání pro výrobu PLGA nanosfér
Obr. 2: Konstrukce ultrazvukové průtokové buňky
Výsledek
Nanočástice se středním průměrem 485 nm bylo snadno připravit z 2% roztoku PLGA v DCM při 32W sonikaci výkonu (tab. 1). Distribuce velikosti bylo mono-modální s mírným stopek (obr. 3A). Velikost nanočástic rozšířena od 175 do 755 nm, v závislosti na 10 a 90% percentilu. Opakovatelnost výrobního procesu byla trvale dobrý, což se odráží pouze menší variabilitu střední průměr částic. Sklopení emulze je doba pobytu v sonickém poli od 14 do 7 let měla pouze malý dopad na velikost nanočástic. Snížení výkonu ultrazvuku z 32 na 25 W vedlo k významnému zvýšení průměrné velikosti částic z 485 na 700 nm, způsobené výraznějším zakončením kalibrační křivky (obr. 3A). Méně prominentní, ačkoli významné zvýšení průměrné velikosti částic od 485 do 600 nm bylo zjištěno při použití 5% místo 2% roztoku PLGA.
Konečně, další hydrofilní PLGA se vymění za více hydrofobní a nižší PLA molekulové hmotnosti, aniž by přitom byly pozorovatelné změny v částice střední velikosti a distribuce velikosti. Nebyly pozorovány žádné rozdíly v morfologii různých šarží částice připravené z 2% roztoky polymeru. Všichni vykazovaly dokonale kulový tvar a hladký povrch (obr. 3b). Částice vyrobené z 5% roztoku PLGA však byly méně kulovité, ukázala mírně vrásčitý povrch, a fúze dvou nebo někdy více částic (obr. 3C).
Tabulka 1. Střední průměr PLGA50: 50 nanočástice připravené za různých podmínek. Průměr dvou šarží ± absolutní odchylky.
Obr. 3: PLGA nanočástice. (A): Distribuce velikosti částic připravených na koncentraci polymeru / sonikace výkonu 2% / 32W, 5% / 32 W, a 2% / 25W%; doba zdržení = 14 s. (B), (C): SEM snímky částic připravených z 2 až 5% polymerní roztoky, resp. Doba zdržení = 14s; sonikace výkon = 32W. Sloupce představují 1 mikrometr.
Diskuse a závěry
Tá ultrazvukové průtokové buňky bylo zjištěno, že je vhodný pro výrobu na bázi emulze-extrakce rozpouštědlem / odpařování biodegradovatelných polymerních nanosfér. Budoucí výzkum bude směřovat k rozšiřování-up procesu a zvýšení příkonu, čímž se získá ještě jemnější emulze. Navíc vhodnost buňky pro přípravu vody v oleji emulze, Např. pro další zpracování do mikrosfér léčivem, budou studovány.
Literatura
Freitas, S .; Hielscher, G .; Merkle, H. P .; Gander, B .:Rychlý a jednoduchý způsob pro výrobu Biologicky rozložitelný nanočástice, v: European Cells and Materials, Vol. 7. Suppl. 2, 2004 (strana 28)
Tato informace byla prezentována na švýcarské společnosti biomateriálů