تطبيقات الموجات فوق الصوتية في فيروس جدري القرود

الموجات فوق الصوتية هي طريقة معالجة مهمة لعزل فيروس جدري (MPXV) من العينات التحليلية ، لتجزئة الحمض النووي للفيروس وكذلك في تصنيع لقاح جدري. لإعداد العينة قبل التشخيص والتحليل (PCR ، ELISA ، إلخ) يتم استخدام الموجات فوق الصوتية لتحلل الخلايا من أجل إطلاق فيروس جدري من داخل الخلية و / أو لتفتيت الحمض النووي. في إنتاج اللقاح ، تتراوح التطبيقات من تحضير جسيمات الفيروس / الحمض النووي ، والتغليف في ناقلات الأدوية وصياغة اللقاح.
أدناه يمكنك العثور على معلومات مفصلة حول إعداد عينة من فيروس جدري بالموجات فوق الصوتية وكذلك إنتاج لقاح MPXV بمساعدة الموجات فوق الصوتية.

 

ما ستجده في هذه الصفحة:

طلب معلومات




لاحظ لدينا سياسة الخصوصية.


الموجات فوق الصوتية عالية الأداء هي أداة معالجة حاسمة في إنتاج العديد من اللقاحات.

يتم تثبيت هذا النظام من الموجات فوق الصوتية 2x 1kW لعملية التدفق المستمر في منشأة إنتاج اللقاح.

التحلل بالموجات فوق الصوتية وتجزئة الحمض النووي قبل تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)

يتم الكشف عن عدوى فيروس جدري عن طريق اختبار تضخيم الحمض النووي (NAAT) ، باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي أو التقليدي (PCR) ، للكشف عن التسلسلات الفريدة للحمض النووي الفيروسي. تحتوي العينة (على سبيل المثال من مبادلة البلعوم الأنفي أو خزعات الجلد) على الفيروس في الخلايا.
للتحليل ، يجب إطلاق الفيروس من الخلايا ويجب تجزئة الحمض النووي الفيروسي من أجل تفاعل البوليميراز المتسلسل.

التحلل بالموجات فوق الصوتية:

Ultrasonicator UP200Ht مع microtip S26d2 للتحلل بالموجات فوق الصوتية من العينات البيولوجيةيعد تعطيل / تحلل الخلايا بالموجات فوق الصوتية طريقة موثوقة وفعالة لعزل الفيروسات من عينات الخلايا ، وبالتالي فهي تقنية مفضلة على العوامل الكيميائية ، مثل الليزوزيم والبروتيناز K والمنظفات المختلفة التي تستخدم بدلا من ذلك لتحقيق تحلل الخلايا وإطلاق الحمض النووي.
ومع ذلك ، فإن استخدام هذه الكواشف الكيميائية يتطلب تحضير عينة تستغرق وقتا طويلا في عدة خطوات قبل تحليل تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل لمنع تثبيط تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل. نظرا لأن مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل تؤثر على كفاءة التضخيم ، فإن الاختلافات الصغيرة في كمية المثبطات التي لم تتم إزالتها يمكن أن تؤدي إلى اختلافات كبيرة في تضخيم منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (دياكو ، 1995).
ميزة الموجات فوق الصوتية للتحلل هي أن الاضطراب الكامل للهياكل الخلوية وإطلاق الحمض النووي دون الحاجة إلى كواشف التحلل وإعداد العينات التي تستغرق وقتا طويلا أمر مرغوب فيه. (راجع Fykse et al. ، 2003)

تجزئة الحمض النووي بالموجات فوق الصوتية:

تجزئة الحمض النووي بالموجات فوق الصوتية بسيطة وموثوقة كما هو ينتج شظايا الحمض النووي قابل للضبط في الطول (basepairs ، bp). باستخدام الموجات فوق الصوتية ، يمكن تجزئة الحمض النووي بشكل فعال إلى طول الحمض النووي المستهدف. التحكم الدقيق في المعلمات بالموجات فوق الصوتية وخيارات التبريد المتطورة تمنع تدهور الحمض النووي.
اقرأ المزيد عن تجزئة الحمض النووي بالموجات فوق الصوتية!

 

يظهر الفيديو نظام إعداد العينة بالموجات فوق الصوتية UIP400MTP ، والذي يسمح بإعداد عينة موثوقة من أي لوحات قياسية متعددة الآبار باستخدام الموجات فوق الصوتية عالية الكثافة. وتشمل التطبيقات النموذجية للUIP400MTP تحلل الخلية، الحمض النووي، الحمض النووي الريبي، والقص الكروماتين، فضلا عن استخراج البروتين.

Ultrasonicator UIP400MTP لسونيكيشن لوحة متعددة الآبار

صورة مصغرة للفيديو

طلب معلومات




لاحظ لدينا سياسة الخصوصية.


تطبيقات الموجات فوق الصوتية في لقاح فيروس جدري

يستخدم الموجات فوق الصوتية لإنتاج لقاحات مثل لقاحات جدري. اللقاحات المستخدمة ضد فيروس جدري القردة هي حاليا لقاحات فيروس حي. قد تستخدم اللقاحات المطورة حديثا منصات أخرى مثل اللقاحات القائمة على الحمض النووي يحتوي حاليا على لقاح Vaccinia Ankara viurs المعدل ، وهو فيروس أورثوبوكس موهن وغير قابل للتكاثر. كما أنه يحتوي على تريس (تريس أمينوميثان) وكلوريد الصوديوم. قد يحتوي اللقاح أيضا على كميات صغيرة من الحمض النووي والبروتين من خلايا الخلايا الليفية لجنين الدجاج ، والتي تستخدم لزراعة فيروس اللقاح والبنزوناز ومركبات المضادات الحيوية مثل الجنتاميسين والسيبروفلوكساسين.

يستخدم التجانس بالموجات فوق الصوتية في إنتاج لقاحات الفيروسات الحية الموهنة ، ولقاحات الحمض النووي ، وكوكتيلات الحمض النووي متعددة التكافؤ ، ولقاحات mRNA ، ولقاحات البروتين المؤتلف ، ولقاحات الجسيمات الشبيهة بالفيروسات ، إلخ.

تتراوح تطبيقات الموجات فوق الصوتية في إنتاج اللقاحات من

  • تشتت جزيئات الفيروس وعوامله
  • استحلاب
  • تعطيل الفيروسات
  • صياغة حامل الدواء (NLC ، SLN)
  • التغليف
  • حل الوكلاء
  • إعداد المواد المساعدة
  • التفريغ / نزع التهوية

 

يمكنك العثور على مزيد من المعلومات المتعمقة حول تطبيقات الموجات فوق الصوتية لتحسين تصنيع اللقاحات!

بروتوكول عزل فيروس جدري بالموجات فوق الصوتية

استخدم فريق البحث في Stittelaar (2005) التحلل بالموجات فوق الصوتية لإطلاق فيروس جدري من مزرعة الخلايا المضيفة للنمو وكذلك من الخلايا التي تم الحصول عليها عن طريق مقايضة الحلق من الرئيسيات المصابة.

تحضير لقاح جدري:

نمت فيروسات جدري على خلايا الخلايا الليفية لجنين الدجاج الخالية من مسببات الأمراض. بعد الحضانة لمدة 1-2 أيام ، تم حصاد تعليق الخلية الفيروسية عن طريق جولة واحدة من ذوبان الجليد ثم تركز عن طريق الطرد المركزي. تم إعادة تعليق الحبيبات وتعريضها لعدة جولات من التجانس بالموجات فوق الصوتية.

عزل فيروس جدري من المكاك الملقحة:

تم إذابة العينات بالتجميد ثلاث مرات وصوتيها في CupHorn بالموجات فوق الصوتية. تم استخدام تخفيفين (1:10 و 1: 100) في وسط النقل المكمل بمصل بقري جنيني بنسبة 1٪ لتلقيح أحاديات خلايا فيرو في ألواح من ستة آبار. بعد ساعة واحدة من الحضانة عند 37 درجة مئوية ، تمت إزالة اللقاح واستبداله بوسط استزراع مكمل بمصل بقري جنيني بنسبة 1٪. تم استزراع الطبقات الأحادية لمدة 5 أيام عند 37 درجة مئوية وصبغها بمحلول بنفسجي بلوري.
(راجع ستيتيلار وآخرون، 2005)

في هذا الفيديو نعرض لك نظام الموجات فوق الصوتية 2 كيلووات للتشغيل المضمن في خزانة قابلة للتطهير. Hielscher لوازم معدات الموجات فوق الصوتية لجميع الصناعات تقريبا، مثل الصناعة الكيميائية، والأدوية، ومستحضرات التجميل، وعمليات البتروكيماويات وكذلك لعمليات استخراج المذيبات القائمة. تم تصميم هذه الخزانة المصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ القابلة للتطهير للتشغيل في المناطق الخطرة. لهذا الغرض ، يمكن للعميل تطهير الخزانة المختومة بالنيتروجين أو الهواء النقي لمنع الغازات أو الأبخرة القابلة للاشتعال من دخول الخزانة.

2x 1000 واط الموجات فوق الصوتية في خزانة قابلة للتطهير للتركيب في المناطق الخطرة

صورة مصغرة للفيديو

الموجات فوق الصوتية لتحليل الفيروسات وإنتاج اللقاحات

Hielscher الموجات فوق الصوتية واسعة محفظة المنتجات يقدم الموجات فوق الصوتية المثالية للمختبرات البحثية والتحليلية وكذلك لتصنيع اللقاحات الصناعية.
Hielscher Ultrasonics متخصصة في تصميم وتصنيع وتوزيع الموجات فوق الصوتية عالية الأداء والمفاعلات الحيوية سونو لاستخدامها في مختبرات البحوث والتحليل، وكذلك للتنفيذ في إنتاج اللقاحات الصناعية (على سبيل المثال. لقاحات, واجهات برمجه التطبيقات).
تحكم دقيق في معلمات عملية الموجات فوق الصوتية من قبل Hielscher Ultrasonics' برنامج ذكييمكن تطبيق Sonication على الأوعية المفتوحة والمفاعلات المغلقة التي يتم تحريكها باستمرار ومفاعلات التدفق المستمر. جميع أجزاء أنظمة الموجات فوق الصوتية ، التي تتلامس مع الوسط السائل ، مصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ أو التيتانيوم أو الزجاج. تضمن الأجزاء القابلة للتعقيم والتجهيزات الصحية الإنتاج تحت شروط فارما.
تسجيل البيانات التلقائي: برنامج ذكي يسجل معلمات عملية صوتنة تلقائيا على بطاقة الذاكرة SD المدمجة. يضمن التحكم الدقيق في جميع معلمات العملية التكاثر, توحيد الإنتاج، ويسهل الوفاء بمعايير سلامة المنتجات الصيدلانية.
HIELSCHER الفوق’ المعالجات بالموجات فوق الصوتية موثوقة للغاية ويمكن التحكم فيها بدقة. يمكن تعديل جميع الموجات فوق الصوتية الصناعية لتقديم مجموعة كاملة من السعات المنخفضة إلى العالية جدا. متانة أنظمة الموجات فوق الصوتية Hielscher يسمح لعملية 24/7 تحت الثقيلة وفي البيئات الصعبة.

الجدول أدناه يعطيك مؤشرا على قدرة المعالجة التقريبية لultrasonicators لدينا:

حجم الدفعة معدل التدفق الأجهزة الموصى بها
لوحات متعددة الآبار / ميكروتيتر غير متوفر UIP400MTP
1 إلى 500ML 10 إلى 200ML / دقيقة UP100H
10 إلى 2000ML 20 إلى 400ML / دقيقة Uf200 ः ر, UP400St
00.1 إلى 20L 00.2 إلى 4L / دقيقة UIP2000hdT
10 إلى 100L 2 إلى 10L / دقيقة UIP4000hdT
غير متوفر 10 إلى 100L / دقيقة UIP16000
غير متوفر أكبر مجموعة من UIP16000

اتصل بنا! / اسألنا!

اطلب المزيد من المعلومات

يرجى استخدام النموذج أدناه لطلب معلومات إضافية حول المعالجات بالموجات فوق الصوتية والتطبيقات والسعر. سنكون سعداء لمناقشة العملية الخاصة بك معك ونقدم لكم نظام الموجات فوق الصوتية تلبية الاحتياجات الخاصة بك!









يرجى ملاحظة لدينا سياسة الخصوصية.


الخالطات بالموجات فوق الصوتية موثوقة لقص الحمض النووي

قص الحمض النووي بالموجات فوق الصوتية
مقتبس من Jkwchui تحت CC-BY-SA.03



الأدب / المراجع

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidov in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

حقائق تستحق العلم

فيروس جدري

جدري (MPV أو MPXV أو hMPXV) هو نوع من فيروسات الحمض النووي مزدوجة الشريط ، والتي تسبب مرضا حيوانيا فيروسيا. يعرف هذا المرض باسم عدوى جدري ويمكن أن يحدث في البشر. إنه ينتمي إلى جنس Orthopoxvirus في عائلة Poxviridae. فيروس جدري هو أحد فيروسات الجدري البشري جنبا إلى جنب مع فيروسات الجدري (VARV) وجدري البقر (CPX) واللقاح (VACV). تتميز فيروسات Orthopoxvirus بجزيئات فيروسية كبيرة على شكل قرميد ، تحتوي على جينوم DNA مزدوج الشريط يبلغ حوالي 200000 نقطة أساس.

مقايسة إليسا

ELISA تعني مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم وهي مقايسة مناعية مصنفة تعتبر المعيار الذهبي للمقايسات المناعية. ELISA هو اختبار مناعي ، يقدر بحساسيته التشخيصية العالية ، ويستخدم للكشف عن الجزيئات وتحديدها ، بما في ذلك الأجسام المضادة والمستضدات والبروتينات والبروتينات السكرية والهرمونات. يعتمد مبدأ ELISA على تفاعل المستضد والجسم المضاد. من خلال هذا التفاعل بين مولد الضد والجسم المضاد، ترتبط الأجسام المضادة المحددة بمولد الضد المستهدف. فقط عندما يحدث التفاعل ، يمكن أن ترتبط الركيزة بالإنزيم ويمكن ملاحظة تحويل الركيزة اللاحق ، مما يعني الحصول على نتيجة إيجابية.


الفوق صوتيات عالية الأداء! تغطي مجموعة منتجات Hielscher الطيف الكامل من المعمل المدمج فوق الصوتيات على وحدات أعلى مقاعد البدلاء إلى أنظمة الموجات فوق الصوتية الصناعية الكاملة.

Hielscher الفوق صوتيات بتصنيع عالية الأداء المجانسة بالموجات فوق الصوتية من مختبر إلى حجم الصناعية.


سنكون سعداء لمناقشة العملية الخاصة بك.

دعونا الحصول على اتصال.