Biologik parchalanadigan nanosferalarni ishlab chiqarish
Biologik parchalanadigan mikro va nanosferalar doimiy, kontaktsiz va ifloslanishsiz jarayonda ishlab chiqarilishi mumkin, ular steril sharoitlarda oson ishlaydi.
Kirish
Poli(laktid-koglikolid) (PLGA) yoki boshqa materiallardan tayyorlangan biologik parchalanadigan mikro- va nanosferalar (MS, NS) dori va antigenni nishonga olish uchun o'ziga xos potentsialga ega bo'lgan juda kuchli dori va antigen etkazib berish tizimlaridir. PLGA NS ishlab chiqarishning hozirgi usullari odatiy partiyaviy jarayonlar bo'lib, steril sharoitda o'sishda qiyinchiliklarga duch keladi. Bu erda biz PLGA NS ni uzluksiz, kontakt- va ishlab chiqarish uchun yangi va oqlangan usulni taqdim etamiz ifloslanishsiz jarayon Bu steril sharoitda osonlik bilan ishlashi mumkin. Butun ishlab chiqarish jarayonida mahsulot faqat steril shisha va Teflon® naychalari bilan bevosita aloqada bo'ladi. Atrof-muhit ifloslanishining oldini olish uchun jarayon yopiq tizimda amalga oshirilishi mumkin.
usullari
PLGA50:50 nanopartikullari (Resomer® RG503H, Boehringer Ingelheim) o'zgartirilgan erituvchini ekstraksiya qilish/bug'lanish jarayoni [1] yordamida ishlab chiqarilgan. Dixlorometanda (2 yoki 5%) eritilgan PLGA kontaktsiz oqimni o'z ichiga olgan yangi eksperimental o'rnatish orqali suvli 0,5% (w/w) PVA eritmasida tarqatildi. ultratovushli hujayra. Dag'al O/W-dispersiyasi avval magnit aralashtirgich bilan oldindan aralashtiriladi va keyin bir hil holga keltiriladi. ultratovushli oqim o'tkazuvchi hujayra (O- va W-fazalarining oqim tezligi 1: 8 da edi). Dastlab hosil bo'lgan PLGA-erituvchi nanodropletlar PLGA nanozarralari bo'lish uchun naychalardagi o'tish paytida asta-sekin qotib qoldi. Zarrachalarning yakuniy qattiqlashishiga katta hajmdagi 0,5% PVA eritmasida erishildi.
1-rasm: PLGA nanosferalarini ishlab chiqarish uchun eksperimental o'rnatish
2-rasm: Dizayn ultratovushli oqim o'tkazuvchi hujayra
Natijalar
O'rtacha diametri 485 nm bo'lgan nanozarrachalar DCMdagi 2% PLGA eritmasidan 32 Vt sonikatsiya kuchida tayyorlandi (1-tab.). Hajmi taqsimoti engil quyqa bilan mono-modal edi (3A-rasm). Nanozarrachalar o'lchamlari 10 va 90% persentillarga muvofiq 175 dan 755 nm gacha uzaytirildi. Ishlab chiqarish jarayonining takrorlanishi doimiy ravishda yaxshi edi, chunki o'rtacha zarracha diametrining faqat kichik o'zgaruvchanligi aks ettirilgan. Pastga tushirish emulsiya tovush maydonida 14 dan 7 soniyagacha bo'lgan vaqt nanozarrachalar hajmiga ozgina ta'sir qildi. Sonikatsiya quvvatining 32 dan 25 Vt gacha kamayishi, o'rtacha zarracha hajmining 485 dan 700 nm gacha sezilarli darajada oshishiga olib keldi, bu esa o'lchamlarni taqsimlash egri chizig'ining yanada aniq ko'rinishi tufayli yuzaga keldi (3A-rasm). 2% PLGA eritmasi o'rniga 5% dan foydalanilganda zarrachalarning o'rtacha hajmining 485 dan 600 nm gacha sezilarli o'sishi kamroq sezilarli bo'lgan.
Nihoyat, ko'proq hidrofilik PLGA zarrachalarning o'rtacha hajmi va hajmi taqsimotida sezilarli o'zgarishlarsiz ko'proq hidrofobik va past molekulyar og'irlikdagi PLA ga almashtirildi. 2% li polimer eritmalaridan tayyorlangan zarrachalarning turli partiyalarining morfologiyasida farqlar kuzatilmadi. Ularning barchasi mukammal sharsimon shakllar va silliq sirtlarni ko'rsatdi (3B-rasm). 5% PLGA eritmasidan tayyorlangan zarralar esa kamroq sharsimon bo'lib, bir oz ajinlangan yuzalarni va ikki yoki ba'zan undan ko'p zarrachalarning sintezini ko'rsatdi (3C-rasm).
Jadval 1. Turli sharoitlarda tayyorlangan PLGA50:50 nanosferalarining o'rtacha diametri. Ikki partiyaning o'rtacha qiymati ± mutlaq og'ish.
3-rasm: PLGA nanozarrachalari. (A): 2% / 32W, 5% / 32W va 2% / 25W% polimer konsentratsiyasi/sonikatsiya quvvatida tayyorlangan zarrachalarning hajmi taqsimoti; yashash vaqti = 14 s. (B), (C): 2 va 5% polimer eritmalaridan tayyorlangan zarrachalarning SEM rasmlari. Yashash vaqti = 14s; sonikatsiya quvvati = 32 Vt. Barlar 1 mikronni bildiradi.
Muhokama va xulosalar
The ultratovushli oqim o'tkazuvchi hujayra biologik parchalanadigan polimerik nanosferalarni emulsiya-erituvchi ekstraksiya/bug‘lanish asosida ishlab chiqarish uchun juda mos ekanligi aniqlandi. Kelajakdagi tadqiqotlar jarayonni kengaytirish va yanada nozik emulsiyalarni olish uchun quvvat sarfini oshirishga yo'naltiriladi. Bundan tashqari, yog'da suvni tayyorlash uchun hujayraning yaroqliligi Emulsiyalar, masalan, dori yuklangan mikrosferalarga keyingi qayta ishlash uchun, o'rganiladi.
Adabiyot
Freitas, S.; Hielscher, G.; Merkle, HP; Gander, B.:Biologik parchalanadigan nanosferalarni ishlab chiqarishning tez va oddiy usuli, Evropa hujayralari va materiallari jild. 7. Suppl. 2, 2004 yil (28-bet)
Ushbu ma'lumot Shveytsariya biomateriallar jamiyatida taqdim etildi