Lysbuffertar kan effektivt och snabbt förberedas med hjälp av ultraljud vävnad homogenisatorer. Eftersom ultrasonicators är ett drömverktyg för blandning, upplösning och spridning, möjliggör de en pålitlig och användarvänlig beredning av lysbuffertar.

Ultraljud beredning av lysbuffertar

Ultraljud vävnad homogenisatorer är ett vanligt verktyg för cell störningar, lys och extraktion, därför finns i de flesta laboratorier. En sekundär applikation för sond-typ ultrasonicators är beredningen av lysbuffertar.

Lysbuffert är en lösning som används för att bryta upp (lysera) celler och frigöra deras innehåll för nedströmsanalys. Den specifika sammansättningen av lysbufferten kan variera beroende på vilken typ av celler som lyseras och nedströmsapplikationen. En typisk lysbuffert innehåller emellertid komponenter såsom tvättmedel, salter och proteashämmare. Buffringsalter (t.ex. Tris-HCl) och jonsalter (t.ex. NaCl) används ofta för att reglera lysatets pH och osmolaritet.
För att göra en lysbuffert blandas komponenterna i lämpliga koncentrationer och pH. Blandningen omröres eller skakas vanligtvis tills komponenterna är upplösta och lösningen är homogen.
Ultraljud homogenisering är en metod som kan användas för att göra en bra lysbuffert genom att förbättra blandning och upplösning av komponenterna. I denna metod, ultraljudsvågor – normalt i intervallet 20 till 30 kHz – appliceras på blandningen, vilket skapar kavitationsbubblor som kollapsar och genererar intensiv lokal energi, vilket leder till mekanisk skjuvning och blandning av komponenterna.
Ultraljud homogeniseringsprocessen kan bidra till att bryta isär eventuella klumpar eller aggregat av komponenterna, och se till att lösningen är jämnt blandad. Följaktligen kan en sådan förbättrad lysbuffert leda till effektivare cellstörningar och högre utbyten av extraherat material. Dessutom, ultraljud homogenisering kan minska den tid som krävs för att göra en lysbuffert jämfört med traditionella omrörnings- eller skakningsmetoder.
Sammantaget är ultraljud homogenisering ett kraftfullt verktyg för att förbättra kvaliteten och effektiviteten av lysbuffertberedning.

Protokoll för ultraljud Lysis buffert förberedelse

Detta är ett allmänt protokoll för att göra en lysbuffert med hjälp av en sond-typ ultrasonicator:
 
Material:

• Valfritt tvätt- och rengöringsmedel (t.ex. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Valfritt salt(er) (t.ex. NaCl, KCl)
• Proteashämmare (t.ex. PMSF, aprotinin, leupeptin)
• ultraljud
• Omrörare
• Avjoniserat vatten
• pH-mätare eller pH-remsor

 
 
Steg-för-steg-instruktioner:

1. Bestäm sammansättningen av lysbufferten baserat på cellerna eller vävnaden du kommer att lysera och de nedströmsapplikationer du kommer att använda lysatet för. Bered stamlösningarna av tvättmedel, salter och proteashämmare vid önskade koncentrationer.
2. Tillsätt stamlösningarna av rengöringsmedel, salter och proteashämmare i en bägare eller kolv.
3. Tillsätt avjoniserat vatten för att få upp volymen till önskad mängd buffert.
4. Blanda komponenterna med en omrörare för att få en förblandningslösning.
5. Mät buffertens pH med hjälp av en pH-mätare eller pH-remsor och justera pH-värdet efter behov med små mängder syra eller bas.
6. Använd sond-typ ultrasonicator för att homogenisera förblandningslösningen så att en mycket homogen lösning erhålls. Därför, sonikera lösningen i några sekunder tills lösningen är grundligt blandas och eventuella klumpar eller aggregat bryts ner. Varaktigheten och kraften i ultraljudsbehandling kan optimeras baserat på den specifika lysbufferten och ultraljudsapparaten som används.
7. Efter ultraljud, mäta buffertens pH och justera vid behov.
8. Filtrera bufferten genom ett 0,2 mikron filter för att avlägsna eventuella skräp eller aggregat som kan ha bildats under ultraljudsbehandling.
9. Lysbufferten är nu klar att användas.

 
Anmärkning: Den exakta sammansättningen och pH-värdet för lyseringsbufferten kan variera beroende på vilka celler eller vävnader som lyseras och vilka tillämpningar som utförs nedströms. Ovanstående protokoll är en allmän riktlinje och kan behöva optimeras för specifika applikationer.
 
Ultraljud homogenisatorer används ofta för cell störningar och utvinning av intracellulära molekyler. Därför använder många lysapplikationer sond-typ ultraljudsbehandling inte bara för beredning av lysbufferten, men också för mekanisk cellstörning und extraktion.
Detta gör ultraljud vävnad homogenisatorer ett mångsidigt verktyg för laboratorier och förklarar den breda användningen av ultrasonicators inom mikrobiologi, bioteknik och biovetenskap.

ultraljud Lab Homogenisatorer

Hielscher Ultrasonics tillverkar och levererar ultraljud homogenisatorer och sonder (sonotrodes) vid olika effektvärden och prov volymer. Detta gör att vi kan erbjuda dig den mest lämpliga ultraljudsstöraren för din provberedning. Vi fokuserar på högsta kvalitet, enastående användarkomfort och pålitlig ultraljudsbehandling resultat. Alla digitala ultrasonicators har smart programvara, programmering och förinställning av ultraljudsbehandling protokoll, webbläsare fjärrkontroll, temperaturkontroll, prov belysning samt automatisk datainspelning på ett inbyggt SD-kort.

Design, tillverkning och rådgivning – Kvalitet tillverkad i Tyskland

Hielscher ultrasonicators är kända för sina högsta kvalitets- och designstandarder. Robusthet och enkel användning möjliggör smidig integration av våra ultrasonicators i industrianläggningar. Tuffa förhållanden och krävande miljöer hanteras enkelt av Hielscher ultrasonicators.

Hielscher Ultrasonics är ett ISO-certifierat företag och lägger särskild vikt vid högpresterande ultrasonicators med state-of-the-art teknik och användarvänlighet. Naturligtvis är Hielscher ultrasonicators CE-kompatibla och uppfyller kraven i UL, CSA och RoHs.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: