Odbojniki za lyzo so lahko učinkovito in hitro pripravljeni z uporabo ultrazvočnih homogenizatorjev tkiv. Ker so ultrasonicatorji sanjsko orodje za mešanje, raztapljanje in razpršanje, omogočajo zanesljivo in uporabniku prijazno pripravo lysis puferjev.

Ultrazvočna priprava odbojnikov za lyzo

Ultrazvočni tkivni homogenizatorji so skupno orodje za motnje celic, lysis in ekstrakcijo, zato na voljo v večini laboratorijev. Sekundarna aplikacija za ultrasonicatorje tipa sonde je priprava odbojnikov za lizo.

Lysis pufer je raztopina, ki se uporablja za razbitek odprtih (lyse) celic in sproščanje njihove vsebine za nadaljnjo analizo. Posebna sestava odbojnika za lyzo se lahko razlikuje glede na vrsto celic, ki se lysed in nadaljnjo uporabo. Vendar pa tipični blažilnik vsebuje komponente, kot so detergenti, soli in zaviralci proteaz. Za uravnavanje pH in osmolarnosti lysata se pogosto uporabljajo puferne soli (npr. Tris-HCl) in ionske soli (npr. NaCl).
Za izločitev lizinega blažilnika se komponente mešajo skupaj v ustreznih koncentracijah in pH. Mešanico običajno mešamo ali pretresamo, dokler se sestavine ne raztopijo, raztopina pa homogena.
Ultrazvočna homogenizacija je metoda, ki jo lahko uporabimo za pomoč pri izboljševanju mešanja in raztapljanja sestavnih delov. Pri tej metodi ultrazvočni valovi – običajno v območju od 20 do 30 kHz – se uporabljajo za mešanico, ki ustvarja kavitacijo mehurčki, ki sesuvajo in ustvarjajo intenzivno lokalno energijo, kar vodi do mehanskega omejevanja in mešanja komponent.
Ultrazvočni proces homogenizacije lahko pomaga raztrgati vse napihnjenosti ali agregate komponent, in zagotoviti, da je rešitev enakomerno mešana. Zato lahko tak izboljšani blažilnik za lyzo povzroči učinkovitejše motnje celic in večje donose iz izvlečenega materiala. Poleg tega lahko ultrazvočna homogenizacija zmanjša čas, potreben za pripravo odbojnika za lizo v primerjavi s tradicionalnimi metodami mešanja ali trenja.
Na splošno je ultrazvočna homogenizacija zmogljivo orodje za izboljšanje kakovosti in učinkovitosti priprave odbojnika za lyzo.

Protokol za ultrazvočno pripravo odbojnika za lyzo

To je splošni protokol za izdelavo odbojnika za lysis z ultrazvočnim senzorjem tipa sonde:
 
Materialov:

• Detergent(-i) po izbiri (npr. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Sol(-e) po izbiri (npr. NaCl, KCl)
• Zaviralci proteaze (npr. PMSF, aprotinin, leupeptin)
• ultrazvočni
• Mešalo
• Deionizirana voda
• pH meter ali pH trakovi

 
 
Navodila po korakih:

1. Določite sestavo odbojnika za lysis glede na celice ali tkivo, ki ga boste lysing, in downstream aplikacije, ki jih boste uporabili za lysate. Pripravite stalež raztopine detergentov, soli in zaviralcev proteaze v želenih koncentracijah.
2. V posodo ali bučko dodajte raztopine detergentov, soli in zaviralcev proteaze.
3. Dodajte deionizirano vodo, da prostornino do želene količine odbojnika.
4. Komponente zmešajte s stirrerjem, da boste dobili raztopino za predhodno mešanje.
5. Izmerite pH puferja s pomočjo pH metra ali pH trakov in po potrebi prilagodite pH z majhnimi količinami kisline ali osnove.
6. Z ultrasonikatorjem tipa sonde homogenizirajte raztopino, tako da dobimo zelo homogeno raztopino. Zato raztopino raztopino omehčajte za nekaj sekund, dokler raztopina ne bo temeljito zmešana in se razčlenijo vse nevšečnice ali agregati. Trajanje in moč sonikacije je mogoče optimizirati na podlagi posebnega odbojnika za lizo in ultrasonicator, ki se uporablja.
7. Po ultrasonikacijo ponovno izmerite pH puferja in se po potrebi prilagodite.
8. Filtrirajte pufer skozi 0,2 mikron filtra, da odstranite vse ostanke ali agregate, ki so se lahko tvorjeni med sonication.
9. Odbojnik za lyzo je zdaj pripravljen za uporabo.

 
Opomba: Točna sestava in pH odbojnika za lyzo se lahko razlikujeta glede na celice ali tkivo, ki se lysed in nadaljnje aplikacije. Zgornji protokol je splošna smernica in bo morda treba optimizirati za določene aplikacije.
 
Ultrazvočni homogenizatorji se običajno uporabljajo za motnje celic in ekstrakcijo znotrajceličnih molekul. Zato številne aplikacije za lizo uporabljajo sondo tipa sonication ne samo za pripravo lizinega puferja, ampak tudi za mehanske motnje celice in ekstrakcijo.
Zaradi tega so ultrazvočni tkivni homogenizatorji vsestransko orodje za laboratorije in pojasnjuje široko uporabo ultrazvočnihtorjev v mikrobiologiji, biotehnologiji in znanosti o življenju.

ultrazvočni lab homogenizatorji

Hielscher Ultrasonics proizvaja in dobavlja ultrazvočne homogenizatorje in sonde (sonotrodes) pri različnih ocenah moči in obsegu vzorcev. To nam omogoča, da vam ponudimo najbolj primeren ultrazvočni motilec za pripravo vzorca. Osredotočamo se na najvišjo kakovost, izjemna uporabniška udobja in zanesljive rezultate sonication. Vsi digitalni ultrasonicatorji vključujejo pametno programsko opremo, programiranje in prednastavitev protokolov sonication, daljinski upravljalnik brskalnika, nadzor temperature, osvetlitev vzorcev kot tudi avtomatsko snemanje podatkov na vgrajeni SD kartici.

Oblikovanje, izdelava in svetovanje – Kakovost izdelana v Nemčiji

Hielscher ultrasonicatorji so dobro znani po svojih najvišjih standardih kakovosti in oblikovanja. Robustnost in enostavno delovanje omogočata nemoteno vključitev naših ultrazvočnihtorjev v industrijske objekte. Z grobimi pogoji in zahtevnimi okolji lahko ravnajo Hielscher ultrasonicatorji.

Hielscher Ultrasonics je iso certificirano podjetje in dal poseben poudarek na visokozmogiji ultrasonicators, ki vključujejo najmotejšo tehnologijo in prijaznost uporabnika. Seveda, Hielscher ultrasonicators so CE skladni in izpolnjujejo zahteve UL, CSA in RoHs.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: