Metabolomika uľahčená vysokopriepustnou sonikáciou

Metabolomika je výskumná oblasť, ktorá využíva vysokopriepustné techniky na charakterizáciu a kvantifikáciu malých molekúl v rôznych biologických tekutinách, ako sú moč, sérum, plazma, stolica a sliny, a odhaľuje jedinečné metabolické charakteristiky. Vysokopriepustný sonikátor UIP400MTP, navrhnutý pre viacjamkové platničky, je výkonným nástrojom na lýzu buniek v týchto vzorkách a uľahčuje uvoľňovanie metabolitov na následnú analýzu. Tento presný a spoľahlivý prístup je nevyhnutný pre metabolomiku, v ktorej majú prvoradý význam presný návrh štúdie, dôkladná príprava vzoriek, optimalizované nastavenie platformy, komplexná analýza údajov a zmysluplná biologická interpretácia. Metabolomika využíva cielené prístupy, ktoré sa zameriavajú na konkrétne triedy molekúl, ako sú sacharidy, lipidy a aminokyseliny, aj necielené techniky, ktoré poskytujú široký prehľad o metabolických profiloch vo vzorke a odhaľujú zložitú komplexnosť metabolickej signalizácie.

Vysokopriepustná príprava vzoriek pomocou sonikátora UIP400MTP pre 96-jamkové platničky

Použitie bezkontaktného sonikátora UIP400MTP v kombinácii s 96-jamkovými platničkami je účinnou metódou vysokopriepustnej homogenizácie a extrakcie metabolitov. Toto usporiadanie zabraňuje priamemu kontaktu so vzorkou, čím znižuje riziko krížovej kontaminácie pri súčasnom spracovaní viacerých vzoriek.

Podrobný protokol homogenizácie pomocou sonikátora UIP400MTP pre 96-jamkové platničky

1. Príprava metabolomických vzoriek
   Umiestnenie vzoriek: Každú vzorku (napr. stolicu, črevné tkanivo alebo obsah črevného lúmenu) nadávkujte do jednotlivých jamiek 96-jamkovej platničky alebo mikroplatničky.
   Rozpúšťadlo: Organické rozpúšťadlá, ako sú metanol, etanol, acetonitril, chloroform a ich (vodné) zmesi, sú nevyhnutné na extrakciu metabolitov a napomáhajú uvoľňovaniu vnútrobunkových metabolitov z bunkovej matrice. Na každú jamku použite 100–300 µL rozpúšťadla, pričom zabezpečte dostatočný objem na úplné ponorenie vzorky.
   Interné štandardy: Voliteľne pridajte do každej jamky interné štandardy na normalizáciu pri následnej metabolomickej analýze.
2. Príprava média na prenos ultrazvukovej energie
   Hladina vody: Umiestnite 96-jamkovú platničku na sonikačnú platformu naplnenú vodou (médiom na prenos ultrazvukovej energie) podľa pokynov v návode.
3. Konfigurácia parametrov UIP400MTP
   Nastavenie výkonu: Na účinnú homogenizáciu nastavte amplitúdu ultrazvuku na 50–80% maximálneho výkonu.
   Pulzný režim: Nastavte sonikačný cyklus na striedanie impulzov a prestávok (napr. 30 sekúnd ZAPNUTÉ, 30 sekúnd VYPNUTÉ), aby sa umožnilo chladenie a zabránilo prehriatiu vzorky.
   Celkový čas: 4–10 minút v závislosti od komplexnosti a odolnosti vzorky.
   Regulácia teploty: Počas sonikácie používajte laboratórne chladiace zariadenie na udržiavanie teploty vody na 4–8°C, aby ste chránili metabolity citlivé na teplo.
4. Proces sonikácie
   Spustite UIP400MTP na vykonanie sonikačných cyklov.
   Sledujte proces prostredníctvom rozhrania UIP400MTP.
   Kavitačný účinok zhomogenizuje vzorky a spôsobí lýzu buniek v jamkách, čím sa vnútrobunkové metabolity uvoľnia do rozpúšťadla.
5. Po sonikácii
   Centrifugácia: Po sonikácii v prípade potreby preneste obsah platničky do zberných skúmaviek. Centrifugujte pri 4 000–6 000 × g počas 10 minút, aby sa nerozpustné zvyšky a bunkový materiál usadili vo forme pelety.
   Odber supernatantu: Opatrne preneste supernatant z každej jamky do nových skúmaviek alebo platničiek na analýzu.
   Voliteľné sušenie: Ak je potrebná koncentrácia, vysušte supernatanty pomocou vákuového koncentrátora (napr. SpeedVac) a potom ich rekonštituujte v malom objeme vhodného rozpúšťadla.

Využite kapacitu vysokopriepustného spracovania sonikátora UIP400MTP pre viacjamkové platničky a uľahčite si metabolomický výskum a analýzu!

Princíp bezkontaktnej sonikácie pomocou UIP400MTP

UIP400MTP prenáša ultrazvukové vlny do jamiek 96-jamkovej platničky nepriamo prostredníctvom väzbového média (napr. vody). Tieto vlny vyvolávajú kavitáciu, ktorá narúša bunky a uvoľňuje metabolity bez fyzického kontaktu medzi sondou sonikátora a vzorkou.

Návrh, výroba a poradenstvo – kvalita vyrobená v Nemecku

Ultrazvukové prístroje Hielscher sú známe najvyššími štandardmi kvality a konštrukcie. Robustnosť a jednoduchá obsluha umožňujú bezproblémové začlenenie našich ultrazvukových prístrojov do priemyselných prevádzok. Ultrazvukové prístroje Hielscher ľahko zvládajú drsné podmienky a náročné prostredia.

Hielscher Ultrasonics je spoločnosť s certifikáciou ISO a kladie osobitný dôraz na vysokovýkonné ultrazvukové prístroje s najmodernejšou technológiou a jednoduchým používaním. Ultrazvukové prístroje Hielscher samozrejme spĺňajú požiadavky CE a požiadavky UL, CSA a RoHs.