Метаболомика, облегченная высокопроизводительной ультразвуковой обработкой

Метаболомика — это область исследований, в которой используются высокопроизводительные методы для характеристики и количественного определения малых молекул в различных биожидкостях, таких как моча, сыворотка, плазма, фекалии и слюна, раскрывая уникальные метаболические сигнатуры. Высокопроизводительный ультразвуковой UIP400MTP, предназначенный для многолуночных планшетов, является мощным инструментом для лизирования клеток в этих образцах, облегчая высвобождение метаболитов для последующего анализа. Этот точный и надежный подход имеет важное значение для метаболомики, где первостепенное значение имеют точный дизайн исследования, тщательная подготовка образцов, оптимизированная настройка платформы, всесторонний анализ данных и содержательная биологическая интерпретация. Метаболомика использует как целевые подходы, которые сосредоточены на конкретных классах молекул, таких как углеводы, липиды и аминокислоты, так и нецелевые методы, которые обеспечивают широкий обзор метаболических профилей в образце, раскрывая сложную сложность метаболической сигнализации.

Высокопроизводительная пробоподготовка с помощью 96-луночного планшетного ультразвукового аппарата UIP400MTP

Использование бесконтактного ультразвукового UIP400MTP в сочетании с 96-луночными планшетами является эффективным методом высокопроизводительной гомогенизации и экстракции метаболитов. Такая конфигурация позволяет избежать прямого контакта с образцом, снижая риск перекрестного загрязнения при одновременной обработке нескольких образцов.

Пошаговый протокол гомогенизации с помощью 96-луночного ультразвукового аппарата UIP400MTP

1. Подготовка метаболомных образцов
   Размещение образца: Диспенсируйте каждый образец (например, кал, ткань кишечника или содержимое люминала) в отдельные лунки 96-луночного планшета или микропланшета.
   Растворитель: Органические растворители, такие как метанол, этанол, ацетонитрил, хлороформ и их (водные) смеси, необходимы для экстракции метаболитов, способствуя высвобождению внутриклеточных метаболитов из клеточного матрикса. Используйте 100–300 μл растворителя на лунку, обеспечивая достаточный объем для полного погружения образца.
   Внутренние стандарты: При необходимости добавьте внутренние стандарты в каждую лунку для нормализации во время последующего метаболомного анализа.
2. Настройка соединительной среды
   Уровень воды: Поместите пластину 96well на платформу для ультразвуковой обработки, заполненную водой (соединительной средой), как описано в руководстве.
3. UIP400MTP Настройка параметров
   Настройки питания: Отрегулируйте амплитуду ультразвука до 50–80% от максимальной мощности для эффективной гомогенизации.
   Импульсный режим: Установите цикл ультразвуковой обработки на чередование импульсов (например, 30 секунд ВКЛ, 30 секунд ВЫКЛ), чтобы обеспечить охлаждение и предотвратить перегрев образца.
   Общее время: 4–10 минут, в зависимости от сложности и прочности образца.
   Контроль температуры: Используйте лабораторный охладитель для поддержания температуры воды на уровне 4–8 °C во время ультразвуковой обработки для защиты чувствительных к теплу метаболитов.
4. Процесс обработки ультразвуком
   Запустите UIP400MTP для циклов ультразвуковой обработки.
   Контролируйте процесс через интерфейс UIP400MTP.
   Эффект кавитации гомогенизирует образцы и лизирует клетки в лунках, высвобождая внутриклеточные метаболиты в растворитель.
5. Постультразвуковая обработка
   Центрифугирование: После ультразвуковой обработки при необходимости переложите содержимое пластины в пробирки для сбора. Центрифугируйте при 4 000–6 000 × г в течение 10 минут для гранулирования нерастворимого мусора и клеточного материала.
   Коллекция надосадочной жидкости: Осторожно переложите надосадочную жидкость из каждой лунки в новые пробирки или планшеты для анализа.
   Дополнительная сушка: Высушите надосадочную жидкость с помощью вакуумного концентратора (например, SpeedVac), если требуется концентрация, затем восстановите в небольшом объеме соответствующий растворитель.

Воспользуйтесь преимуществами высокопроизводительной вычислительной мощности многолуночного ультразвукового аппарата UIP400MTP и упростите свои метаболомные исследования и анализ!

Принцип бесконтактной ультразвуковой обработки с UIP400MTP

UIP400MTP подает ультразвуковые волны на лунки 96-луночной пластины опосредованно через связующую среду (например, воду). Эти волны создают кавитацию, которая разрушает клетки и высвобождает метаболиты без физического контакта между зондом ультразвукового аппарата и образцом.

Проектирование, производство и консалтинг – Качество «Сделано в Германии»

Ультразвуковые аппараты Hielscher хорошо известны своими высочайшими стандартами качества и дизайна. Надежность и простота в эксплуатации позволяют без проблем интегрировать наши ультразвуковые аппараты в промышленные объекты. Ультразвуковые аппараты Hielscher легко справляются с суровыми условиями и требовательными условиями окружающей среды.

Hielscher Ultrasonics является компанией, сертифицированной по стандарту ISO, и уделяет особое внимание высокопроизводительным ультразвуковым аппаратам, отличающимся самыми современными технологиями и удобством в использовании. Конечно, ультразвуковые аппараты Hielscher соответствуют требованиям CE и соответствуют требованиям UL, CSA и RoHs.