Cum se utilizează omogenizatoarele de țesuturi cu ultrasunete Hielscher
Înainte de purificarea sau caracterizarea macromoleculelor intracelulare, cum ar fi proteinele, organitele, enzimele sau compușii activi, este esențial să se utilizeze o metodă eficientă pentru liza țesuturilor și dezintegrarea celulelor. Ultrasonicarea este o tehnică extrem de eficientă pentru prepararea celulelor, eliberând rapid materialele intracelulare într-o soluție tampon. Forțele mecanice de forfecare generate în timpul omogenizării ultrasonice a țesuturilor pot fi ajustate precis pentru a se potrivi materialelor specifice. Acest lucru permite atât prepararea delicată a țesuturilor moi sau forfecarea ADN/ARN printr-o sonicare mai blândă, cât și cavitația ultrasonică intensă pentru dezintegrarea distructivă a celulelor (de ex., pentru nannochloropsis, drojdie).
Mai jos găsiți o selecție de țesuturi, celule și alte materiale biologice, cu protocoale de sonicare recomandate și ghiduri pentru prepararea eficientă a probelor dumneavoastră cu un omogenizator de țesuturi cu ultrasunete sau un dezintegrator celular.
Ultrasonicator de laborator UP200Ht (200W, 26kHz) pentru sarcini de pregătire a probelor
Cum să vă pregătiți lizatele, omogenatele și extractele din materiale biologice
În ordine alfabetică:
Acetobacter suboxydans
Actinomyces
Dezintegrare și extracție de proteine în 3–5 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Activitatea ALP și LDH
Determinarea activității ALP și LDH și a conținutului de proteine
Probele de celule congelate au fost decongelate timp de 20 min pe gheață, după care a urmat liza celulară cu PBS conținând 1% Triton X-100 timp de 50 min pe gheață. În timpul lizei celulare, fiecare probă a fost sonicată timp de 1 min la 80 W cu un procesor ultrasonic UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Bernhardt, A. și colab. (2008): Colagenul mineralizat – o matrice osoasă extracelulară artificială – îmbunătățește diferențierea osteogenică a celulelor stromale ale măduvei osoase.
Fosfat tricalcic amorf (ATCP)
Nanoparticulele de ATCP, care reprezintă un precursor excepțional de reactiv pentru formarea hidroxiapatitei, au fost dispersate în cloroform conținând 5 % (w/w) Tween20 raportat la PLGA, cu ajutorul dispozitivului ultrasonic Hielscher UP400S la 320W timp de 5 min., aplicând intervale pulsate (50%) pentru a permite relaxarea particulelor.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Referință/ Lucrare de cercetare:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Umpluturile sferice de nanoparticule de fosfat de calciu permit prelucrarea polimerică a dispozitivelor de fixare osoasă cu bioactivitate ridicată. Biblioteca gratuită 01 mai 2010. 21 ianuarie 2014.
Antocianine
Antociani: di-glucozide, mono-glucozidă, monoglucozide acilate și di-glucozide acilate ale peonidinei, malvidinei, cianidinei, petunidinei și delfinidinei: extracție din pielița strugurilor în 40 sec.; pH 5,0; raport material/solvent de extracție de 1:6.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Antrachinone
Extracția antrachinonelor din rădăcinile de Morinda citrifolia
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Semințe de cais
Pretratament ultrasonic înainte de extracția uleiului din semințele de Jatropha curcas L., pentru îmbunătățirea extracției.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Artemisia selengensis Turcz
Extracția rutinului (1,0g probă măcinată în 30 mL metanol) la 25°C în 5–10 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Aspergillus flavus
Inactivarea ultrasonică a Aspergillus flavus în mediu de cultură Sabouraud
Recomandare de dispozitiv:
UP200S
B. sphaericus / Bacillus sphaericus
Spori de Bacillus anthracis sterne 34F2
Îndepărtarea ultrasonică a sporilor de Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 și Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Utilizarea a 150 ppm de hipoclorit de sodiu împreună cu ultrasunetele a dus la inactivarea sporilor.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S la amplitudine de 100%
Referință/ Lucrare de cercetare:
Pamarthi, S.R. et al.: Eficacitatea ultrasunetelor în desolarea sporilor Bacillus spp încorporați în matrice alimentare complexe atașate la diferite suprafețe de contact.
Spori de Bacillus cereus ATCC 21281
Îndepărtarea ultrasonică a sporilor de Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 și Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Utilizarea a 150 ppm de hipoclorit de sodiu împreună cu ultrasunetele a dus la inactivarea sporilor.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S la amplitudine de 100%
Referință/ Lucrare de cercetare:
Pamarthi, S.R. et al.: Eficacitatea ultrasunetelor în desolarea sporilor Bacillus spp încorporați în matrice alimentare complexe atașate la diferite suprafețe de contact.
Bacillus subtilis
Ultrasunetele de mare putere și joasă frecvență aplicate în volume mici de suspensie bacteriană duc la o reducere continuă a numărului de celule bacteriene, adică predomină rata de distrugere. În volume mai mari, sonicarea duce la o creștere inițială a numărului de celule, ceea ce sugerează desfacerea aglomerărilor de bacterii, însă această creștere inițială scade apoi pe măsură ce desfacerea aglomerărilor se încheie și rata de distrugere devine mai importantă.
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Referință/ Lucrare de cercetare:
Joyce, E .; Phull, S. S .; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Dezvoltarea și evaluarea ultrasunetelor pentru tratamentul suspensiilor bacteriene. Un studiu al frecvenței, puterii și timpului de sonicare pe speciile de Bacillus cultivate. Ultrason. Sonochem. 10/2003. pp. 315-318.
Alfa-amilaza din orz
Stimularea sau inhibarea activității alfa-amilazei din orz: proba (10 g semințe de orz) a fost dispersată în 80 ml apă de la robinet prin sonicare directă la o intensitate ultrasonică de 20, 60 și 100% amplitudine, ciclu de 50% și cu agitare suplimentară. Sonotroda a fost imersată aproximativ 9 mm în soluție. Soluția a fost procesată la temperatura constantă de 30C° timp de 5, 10 și 15 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S, amplitudini: 20, 60 și 100%; ciclu de 50%; sonotrodă S3, 30C°.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Yaldagard et al. (2008): Efectul puterii ultrasunetelor asupra activității alfa-amilazei din orz în urma tratării semințelor după semănat
Larve nauplius de ciripede
Dezintegrarea celulelor/ distrugerea mezozooplanctonului: prin sonicare în următoarele condiții, cu patru debite (200, 400, 520 și 800 lh-1) și patru amplitudini (25, 50, 75 și 100 %), s-a obținut o rată de distrugere între 61 și 97 %.
Recomandare de dispozitiv:
UIP2000hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Tulpini de bifidobacterii: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. lactis (BB-12), B. longum (BB-46)
Distrugerea celulelor bacteriene și eliberarea ß-galactozidazei din tulpini de Bifidobacteria: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL de lapte pasteurizat amestecat cu cultură bacteriană au fost tratați cu ultrasunete. Cavitația provoacă distrugerea celulelor bacteriene și, în același timp, eliberarea ß-galactozidazei.
Recomandare de dispozitiv:
UIP1000hd: amplitudine: 10%, putere: 80W, amplitudine: 100%, putere: 200W; sonotrodă BS2d34; 15–30 min.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Hung et al. (2009): Fermentarea iaurtului asistată cu ultrasunete cu probiotice.
Celule BL21(DE3) pAtHNL (celule de Arabidopsis thaliana)
Dezintegrarea celulelor: 15 g de celule BL21-(DE3)_pAtHNL au fost suspendate lent în tampon fosfat de potasiu 50 mM (pH 7,5) la 0 degC.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S + sonotrodă S14D: la 70W/cm2 (4 x 5 min), cu răcire într-o baie de gheață
Referință/ Lucrare de cercetare:
Okrob, D. et al (2009): Hidroxinitril liază din Arabidopsis thaliana: Identificarea parametrilor de reacție pentru sinteza cianohidrinei enantiopure prin catalizator pur și imobilizat. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 – 2408.
Celule sanguine (roșii și albe)
Boldină din frunze de boldo (Peumus boldus Molina)
Un compus activ important din boldo este boldina ((S)-2,9-dihydroxy-1,10-dimethoxiaporphine), care, alături de catechină ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroxy-phenyl)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopyran-3,5,7-triol), reprezintă principalele componente ale fracțiunii de alcaloizi și flavonoide din frunzele de boldo. Boldina este un agent antioxidant puternic care suferă daune peroxidative mediate de radicali liberi și acționează ca un captator eficient de radicali hidroxil.
Procedura de extracție: Pentru o procedură tipică de extracție, probele de frunze de boldo au fost extrase cu 1L de apă distilată la presiune atmosferică, utilizând ultrasonicatorul UIP1000hd în regim discontinuu (batch) și în flux continuu. Timpul de extracție variază între 10 și 40 min., cu o intensitate ultrasonică de 10 până la 23 W/cm2, și un interval de temperatură de 10 până la 70°C. Cele mai bune rezultate au fost obținute în următoarele condiții: intensitate ultrasonică de 23 W/cm2 timp de 40 min. la o temperatură de 36°C
Rezultate: Rezultatele analizei arată că sonicarea de mare putere îmbunătățește eliberarea analiților din materialul matricei vegetale de boldo la rate semnificativ mai bune comparativ cu metoda convențională: același randament a fost eliberat prin sonicare în 30 min., în timp ce timpul de extracție convențională a fost de 2h.
Chemat (2013) și colaboratorii au arătat că extracția asistată de ultrasunete îmbunătățește eficiența extracției din plante, reducând totodată timpul de extracție, la o concentrație crescută a extractelor (aceeași cantitate de solvent și de material vegetal). Analiza a arătat că condițiile optimizate au fost: putere de sonicare 23 W/cm2 cu UIP1000hd timp de 40 min. și o temperatură de 36°C. Parametrii optimizați ai extracției cu ultrasunete asigură o extracție mai bună comparativ cu macerarea convențională în ceea ce privește durata procesului (30 min. în loc de 120 min.), randament mai mare, eficiență energetică mai mare, curățenie îmbunătățită, siguranță mai mare și calitate mai bună a produsului.
Recomandare de dispozitiv:
UIP1000hd cu sonotrodă BS2d34 și celulă de flux
Referință/ Lucrare de cercetare:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Extracția asistată cu ultrasunete în lot și continuă a frunzelor de boldo (Peumus boldus mol.). Jurnalul Internațional de Științe Moleculare 14, 2013. 5750-5764.
Albumină serică bovină (BSA)
Microîncapsulare în poli(acid lactic-co-glicolic) în 40 sec.
Recomandare de dispozitiv:
GDmini
Referință/ Lucrare de cercetare:
Freitas et al. (2005): Emulsionare cu ultrasunete flow-through combinată cu micromixare statică pentru producția aseptică de microsfere prin extracție cu solvent.
Trunchi cerebral + glandă suprarenală
Dispersie și analiză de nucleotide; dimensiunea probei: probe de 10 mg în 10 ml de lichid.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Candida albicans
Carbohidrați, polizaharide și alți compuși funcționali
Extracția carbohidraților, polizaharidelor și a altor compuși funcționali
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Acid carnosic din rozmarin
Extracția acidului carnosic, un compus activ, din rozmarin.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Capsaicinoide
Extracția capsaicinoidelor (capsaicină, nordihidrocapsaicină) din ardei iuți: capsaicinoidele din ardeii Capsicum frutescens au fost obținute prin extracție cu ultrasunete în următoarele condiții: solvent: etanol 95% (v/v), raport solvent/ masă de 10 ml/g, timp de extracție prin sonicare de 40 min., temperatură de extracție de 45°C. Randamentul extractului: 85% din capsaicinoide
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Carotenoide, beta-carotenoide
cDNA
ARN-ul poli-A a fost purificat cu kitul de purificare a ARNm Dynabeads (Invitrogen), conform instrucțiunilor producătorului, și a fost tratat timp de 30 min la 37°C cu TURBO DNase (Ambion; 0,2 unități/1 μg de ARN). Sinteza primei și a celei de-a doua catene a urmat protocolul producătorului. Aproximativ 500ng de ADNc dublu catenar au fost fragmentați prin sonicare cu dispozitivul Hielscher UTR200. ADN-ul a fost separat în gel de agaroză de înaltă rezoluție 2% și au fost decupate fragmente de 230–270 bp.
Recomandare de dispozitiv:
UTR200 sau TD_CupHorn
Referință/ Lucrare de cercetare:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq oferă noi perspective asupra răspunsurilor transcriptomului induse de agentul cancerigen Benzo[a]pyrene. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427–439.
Caryophanon latum
Extracția glucozaminei, acidului muramic, alaninei, acidului glutamic și lizinei din caryophanon datum.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Celuloză
Omogenizare/ prepararea celulozei omogene izotopic.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S; într-o baie de gheață
Referință/ Lucrare de cercetare:
Laumer et al. (2009): O abordare nouă pentru omogenizarea celulozei pentru a utiliza microcantități pentru analizele izotopice stabile.
Nanocristale de celuloză (CNC) preparate din CNC de celuloză de eucalipt
Nanocristalele de celuloză (CNC) preparate din CNC de celuloză de eucalipt au fost modificate prin reacția cu clorură de metil adipoil, CNCm, sau cu un amestec de acid acetic și sulfuric, CNCa. Prin urmare, CNC-urile liofilizate, CNCm și CNCa au fost redispersate în solvenți puri (EA, THF sau DMF) la 0,1 wt%, prin agitare magnetică peste noapte la (24 ± 1) C, urmată de 20 min într-o baie de sonicare folosind UP100H Hielscher Ultrasonics (Germania), echipat cu o sonotrodă de 130 W/cm2, la 24 ± 1 degC. După aceea, CAB a fost adăugat la dispersia de CNC, astfel încât concentrația finală de polimer a fost de 0,9 wt%.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H; la 24 degC timp de 20 min.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Blachechen, L. S. et al (2013): Interacțiunea stabilității coloidale a nanocristalelor de celuloză și dispersabilitatea lor în matricea de butirat de acetat de celuloză. Celuloză 2013.
Celuloză din bagasă de trestie de zahăr
Extracția celulozei din bagasa de trestie de zahăr
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Test ChIP
Ultrasonicarea este utilizată pentru liza celulară, în vederea eliberării cromatinei. Sonicarea blândă (pulsată) este utilizată pentru fragmentarea cromatinei. În plus, ultrasunetele accelerează rata de legare a anticorpilor de proteinele țintă și reduc astfel timpul de imunoprecipitare.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Basselet, P. et al. (2008): Prelucrarea probelor pentru analiza bazată pe matricea cipurilor ADN a Escherichia coli enterohemoragică (EHEC).
Lauri, A. (2005): Analiza moleculară a dezvoltării petalelor prin X-ChIP și tehnologia bi-hibridă. Disertație Universitatea din Köln, 2005.
Cromatină
Forfecarea cromatinei
Recomandare de dispozitiv:
UP400S; la 30% amplitudine și ciclu 0,5; pe gheață.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver.
Extracția cromatinei
Lizatul de celule MEL DS19 a fost sonicat în 10 runde de câte 20 s, la 70% din puterea maximă, folosind procesorul ultrasonic Hielscher UP200H de 200W
Recomandare de dispozitiv:
UP200H; 70% din puterea maximă; mod pulsat: 10 cicluri de câte 20 sec.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 reglează localizarea CP2c și formarea complexului promotor activ în expresia a-globinei specifice celulelor eritroide. Acizi nucleici Res. 38/ 16, 2010. pp. 5456-5471.
Cromatografie
Sonicarea adsorbantului în solvent elimină aglomeratele în câteva secunde și pregătește o coloană uniformă, ușor de împachetat. Relevant pentru prepararea adsorbantului (de ex. silicagel) înainte de cromatografia pe coloană.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Cladocere
Dezintegrarea celulelor de mezozooplancton
Recomandare de dispozitiv:
UP2000hd cu celulă de flux
Referință/ Lucrare de cercetare:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Copepode adulte și copepodite
Dezintegrarea celulelor de mezozooplancton: prin sonicare în următoarele condiții, cu patru debite (200, 400, 520 și 800 lh-1) și patru amplitudini (25, 50, 75 și 100%), s-a obținut o rată de distrugere între 87 și 99%.
Recomandare de dispozitiv:
UIP2000hd cu celulă de flux
Referință/ Lucrare de cercetare:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Larve nauplius de copepode
Dezintegrarea celulelor de mezozooplancton: prin sonicare în următoarele condiții, cu patru debite (200, 400, 520 și 800 lh-1) și patru amplitudini (25, 50, 75 și 100%), s-a obținut o rată de distrugere între 87 și 99%.
Recomandare de dispozitiv:
UIP2000hd cu celulă de flux
Referință/ Lucrare de cercetare:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Celule COS7
Liză în 400 μl de tampon
Recomandare de dispozitiv:
UP200S; 7 cicluri
Referință/ Lucrare de cercetare:
Zaim (2005): Analyse von Nesprin-2 Defizienten Mäusen.
Cryptosporidium parvum
Inactivarea ultrasonică a Cryptosporidium parvaum (protozoare) în apă.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Referință/ Lucrare de cercetare:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K .; Maeda, Y. (2004): Inactivarea Saccharomyces cerevisiae prin iradiere cu ultrasunete. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. pp. 61-65.
Cubozomi
Cubozomii – fie goi, fie dopați cu molecule de fluorofor – au fost preparați prin dispersarea cantității corespunzătoare de monooleină într-o soluție de Pluronic F108, utilizând ultrasonicatorul UP100H. Pentru a obține cubozomi fluorescenți, fluoroforul a fost dispersat în monooleina topită prin sonicare blândă înainte de dispersarea în Pluronic F108. Aceeași procedură a fost urmată atunci când cubozomii fluorescenți au fost încărcați și cu quercetină.
Probă: dimensiunea probei: 4 mL – aprox. 96,4 wt% apă, 3,3 wt % monooleină, 0,3 wt% Pluronic F108. Procentul de fluorofor a fost de 2,5 × 10−3 și 2,8 × 10−3 wt%. Cantitatea de quercetină adăugată: 6,4 × 10−6 wt%.
Sonicare: UP100H, amplitudine 90%, ciclu de puls 0,9, timp de 10 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Murgia, S .; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S .; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J .; Talmon, Y .; Caltagirone, C. (2013): Cubozomi fluorescenți încărcați cu medicamente: nanoparticule versatile pentru aplicații teranostice potențiale. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Dekkera bruxellensis
Inactivarea ultrasonică a Dekkera bruxellensis în apă
Recomandare de dispozitiv:
UIP1500hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
Borthwick, K. A. J .; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B .; Nowotny, H.; Beneș, E.; Grfschl, . M (2005): Dezvoltarea unui nou sonicator compact pentru perturbarea celulelor. J. Microbio. Metamfetamină. 60/2005. pp. 207-216. / Lörincz, A. (2004): Perturbarea celulară cu ultrasunete a drojdiei în suspensii pe bază de apă. Bioză. 89/ 2004. pp. 297-308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K .; Maeda, Y. (2004): Inactivarea Saccharomyces cerevisiae prin iradiere cu ultrasunete. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 61-65.
Dekkera/ Brettanomyces bruxellensis
Inactivare în 90–120 sec.
Recomandare de dispozitiv:
UIP1500hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
vezi mai sus
ADN
Fragmentarea ADN-ului: sonicare de 2 min. a 100μL cu UP100H sau sonicare de 4 min. a 100μL cu UTR200.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H, UTR200 sau VialTweeter
Referință/ Lucrare de cercetare:
Larguinho M. et al. (2010): Dezvoltarea unei strategii rapide și eficiente bazate pe ultrasunete pentru fragmentarea ADN-ului.
Celule S2 de Drosophila melanogaster
Extracția proteinelor celulare din celule Drosophila melanogaster S2: celulele S2 congelate (1,56108) au fost lizate în 1 mL de tampon de omogenizare răcit cu gheață (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) și lăsate pe gheață timp de 10 min. Liza celulară a fost finalizată prin ultrasonicare pe gheață (6615 impulsuri, puls de 0,5 s; intensitate 75%) cu un procesor ultrasonic Hielscher UP200S.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S (200W), intensitate 75%; mod pulsat: 6615 impulsuri, puls de 0,5 s.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Schwientek, T. et al. (2007): O abordare serială a lectinei la glicoproteomul O-glicoproteom de tip mucină al celulelor Drosophila melanogaster S2. Proteomică 7, 2007. pp. 3264-3277.
Derivați de E. coli
Dezintegrarea celulelor derivatelor de E. coli: peleții congelați corespunzători volumului de probă Vculture = 4/OD mL au fost resuspendați în 580 μL de tampon fosfat de potasiu 10 mM pH 7, 1 mM EDTA. S-au adăugat 20 μL de lizozim (concentrație de 1 g L-1), iar suspensia de celule a fost incubată pe gheață timp de aproximativ 30 min. Ulterior, celulele au fost dezintegrate prin ultrasonicare continuă cu un ultrasonicator (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) pe gheață, la o amplitudine de 50 % timp de 20 sec. Fracțiunile celulare solubile și insolubile au fost separate prin centrifugare la 13.000 rpm timp de 20 min. Proteinele insolubile au fost spălate de două ori cu tampon fosfat de potasiu 10 mM pH 7, 1 mM EDTA și depozitate la –20°C.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S cu amplitudine de 50%
Referință/ Lucrare de cercetare:
HA (2005): Optimizarea producției active de proteine recombinante, explorând impactul proteinelor mici de șoc termic ale Escherichia coli, IbpA și IbpB, asupra reactivării in vivo a corpurilor de incluziune.
Antigen de Echinococcus granulosus
Liză celulară și dezintegrare: proba omogenizată de proteină solubilă din E. granulosus matur, preparată prin congelare-decongelare în azot lichid și la 42◦C, a fost sonicată la 110V, 170W timp de 3×15 sec pe gheață. După aceea, proba a fost centrifugată timp de 15min la 10.000g. Concentrația de proteine a fost măsurată prin metoda Bradford, iar proba a fost depozitată la -20◦C.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S; 170W, răcire pe gheață; 3 x 15 sec.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Tabar et al. (2010): Serodiagnosticul hidatidozei ovine cu lichid hidatic, Protoscolex și întregul corp al antigenului Echinococcus granulosus.
Escherichia coli Gram-negativă
Inactivarea ultrasonică a Escherchia coli Gr- în lapte și sucuri.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplicarea procesării termice asistate cu ultrasunete pentru conservarea și păstrarea calității alimentelor lichide. J Produse alimentare Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Escherichia coli Gram-negativă în soluție salină
Inactivarea ultrasonică a Escherchia coli Gr- în soluție salină.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Duckhouse, H.; Mason, T. J .; Phull, S. S .; Lorimer, J. P. (2004): Efectul sonicare asupra dezinfecției microbiene folosind hipoclorit. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. pp. 173-176.
Escherichia coli Gram-negativă în apă
Inactivarea ultrasonică a Escherchia coli Gr- în apă.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K .; Maeda, Y. (2004): Inactivarea Escherichia coli prin iradiere cu ultrasunete. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 57-60.
Glaucom, capul nervului optic
Fragmentarea ARN-ului din papilele nervului optic (din ochi de șobolan): papila nervului optic (ONH) a fost congelată pe gheață carbonică și depozitată la 80°C înainte de extracție. ARN-ul a fost izolat prin sonicarea papilelor nervului optic congelate în tamponul de extracție al kitului, folosind o sondă MS 0,5 (UP50H), și apoi conform instrucțiunilor furnizate de kitul Arcturus, inclusiv tratamentul cu DNază pentru îndepărtarea oricărui ADN. ARN-ul purificat a fost cuantificat.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H cu sonda MS0.5
Referință/ Lucrare de cercetare:
Johnson et al. (2007): Global Changes in Optic Nerve Head Gene Expression after Exposure to Elevated Intraocular Pressure in a Rat Glaucoma Model.
Glicozaminoglicanul condroitin sulfat (CS)
Determinarea CS prin testul cu albastru de dimetilmetilen
Resuspendarea celulelor: peleții de CS din tuburile de microcentrifugă au fost resuspendați în 0,5 ml de soluție de papaină 0,1mg/ml în soluție salină echilibrată Hank (HBSS), folosind impulsuri de la o sonotrodă ultrasonică (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Germania) la ciclu 1 și amplitudine de 100 % timp de 3 sec. Ulterior, digestia a avut loc la 60 °C timp de 24 h.
Pentru testul imunoenzimatic ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay), celulele au fost apoi suspendate în apă distilată și deionizată la o concentrație de 106 celule/ml și au fost păstrate într-un congelator la –70°C peste noapte, pentru a facilita liza celulară. Celulele au fost apoi omogenizate prin ultrasonicare timp de 40 sec. folosind omogenizatorul de țesuturi cu ultrasunete Hielscher UP100H.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Vandrovcova et al. (2011): Influența acoperirilor cu colagen și sulfat de condroitină (CS) asupra poli-(lactide-co-glicolidă) (PLGA) asupra celulelor asemănătoare osteoblastelor MG 63. Fiziol. Res. 60; 2011. 797-813.
Celule HaCaT
Liza celulelor HaCaT pentru imunoprecipitarea cromatinei (ChIP): celulele HaCaT au fost fixate cu formaldehidă 1% timp de 10 minute la 37uC. Celulele fixate au fost lizate în tamponul RIPA și sonicate pe gheață cu un dispozitiv ultrasonic de 100W la amplitudine = 1 și ciclu de lucru = 100%, în 12 impulsuri de câte un minut (12 x 1 min.).
Recomandare de dispozitiv:
UP100H; timp de 12 min. pe gheață,
Referință/ Lucrare de cercetare:
Zhang et al. (2007): Basonuclin reglează un subset de gene ARN ribozomale în celulele HaCaT.
Heparină: depolimerizarea heparinei
Metoda ultrasonică permite producerea unei heparine cu greutate moleculară mică (LMWH). În acest scop, heparina este supusă unei depolimerizări radicalice catalizate de peroxid de hidrogen. Reacția este foarte rapidă și durează mai puțin de 1 oră, în timp ce procesul de depolimerizare fizico-chimică se bazează pe condiții de reacție blânde, nu necesită reactivi agresivi sau toxici și oferă un produs lipsit de artefacte chimice. Astfel, procesul ultrasonic este foarte potrivit pentru producția la scară largă de LMWH, dar și de analogi produși din polizaharide sulfatate naturale.
Procedura ultrasonică:
Pentru depolimerizarea fizico-chimică a heparinei nefracționate prin depolimerizare radicalică asistată de ultrasunete, heparina a fost dizolvată în apă până la o concentrație finală de 25 mg/mL (5 mL). Amestecul de reacție a fost sonicat cu un ultrasonicator cu sondă UP50H. Ultrasonicatorul a fost echipat cu o sondă (microvârf MS3) cu diametrul de 3mm, care a asigurat o amplitudine de 180μm. Procesorul a generat vibrații mecanice longitudinale cu o frecvență de 30 kHz, produse prin excitație electrică. Amestecul de reacție a fost menținut la 60°C într-un reactor Radleys®, iar undele ultrasonice au fost aplicate sub forma unui puls de 0,5sec pentru a preveni încălzirea amestecului. O alicotă de timp zero (250μl) a fost prelevată din soluție înainte de declanșarea reacției prin adăugarea simultană a peroxidului de hidrogen și aplicarea undelor ultrasonice. Peroxidul de hidrogen a fost adăugat pentru a obține un raport final peroxid de hidrogen/heparină (w/w) de 0,15 (3,75 mg/mL).
Recomandare de dispozitiv:
UP50H cu sonotrodă MS3
Referință/ Lucrare de cercetare:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Prepararea asistată cu ultrasunete a unei heparine cu greutate moleculară mică (LMWH) cu activitate anticoagulantă. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684–689.
Hamei
Extracția compușilor activi / extracte din plante în apă și etanol.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Lactobacillus (liză/izolarea ADN-ului din diverse tulpini de Lactobacillus)
Tulpini de Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis și L. reuteri, L. sp.
Procedură: pentru izolarea ADN-ului din colonii individuale a fost dezvoltat un protocol de liză cu ultrasunete. O colonie (diametru de 2–3 mm) a fost suspendată în 100μl de tampon de liză (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidină-HCl, 250 mM NaCl). Celulele au fost lizate prin 1 min de ultrasonicare cu un ultrasonicator cu sondă UP50H. După adăugarea a 150μl de etanol rece (-20°C), amestecul a fost centrifugat pe o coloană de centrifugare a kitului QIAamp tissue și, în final, eluat cu 60μl de tampon (10 mM Tris [pH 7,5]).
Pentru a dispune de un instrument de identificare rapidă și fiabilă a culturilor pure individuale, testul PCR a fost combinat cu o procedură rapidă de izolare a ADN-ului. Procedurile de liză enzimatică consumatoare de timp și susceptibilitatea variabilă a bacteriilor la lizozim au fost depășite prin tratarea cu ultrasunete a celulelor, urmată de purificare și concentrare prin legarea ADN-ului de o matrice de silice. S-a constatat că materialul celular al unei singure colonii este suficient pentru PCR.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Müller, M. R. A. (2000): Caracterizarea ecosistemului microbian al fermentațiilor de cereale folosind metode biologice moleculare. Disertație Universitatea din Köln, 2000.
Lactobacillus acidophilus Gr+
Inactivarea ultrasonică a Lactobacillus acidophilus Gr+ în lapte și sucuri.
Recomandare de dispozitiv:
UIP500hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplicarea procesării termice asistate cu ultrasunete pentru conservarea și păstrarea calității alimentelor lichide. J Produse alimentare Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Legionella pneumophila Gr+ în mediu diluat
Inactivarea ultrasonică a Legionella pneumophila Gr+ în mediu diluat.
Recomandare de dispozitiv:
UIP500hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S .; Nakamura, S .; Shimizu N. (2006): Dezinfectarea Legionella pneumophila prin tratament cu ultrasunete cu TiO2. Rezoluția apei 40/2006. pp.1137-1142.
Leuconostoc mesenteroides
Activitatea lizozimului leucocitar în leucemia mielocitară: suspensia de celule a fost sonicată timp de 15 min., iar probele au fost analizate pentru activitatea lizozimului. A fost determinată concentrația de lizozim a leucocitelor ug./10 celule.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Activitatea izoenzimelor leucocitare în leucemia mielocitară
Prepararea probelor: suspensia de celule a fost tratată cu ultrasunete, iar probele au fost analizate pentru activitatea lizozimului. A fost determinată concentrația de lizozim a leucocitelor ug/106.
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Lipozomi
Formarea SUV-urilor
Faceți clic aici pentru a citi mai multe despre prepararea lipozomilor cu ultrasunete!
Recomandare de dispozitiv:
UP50H; 3 cicluri a câte 5 min; într-o baie de gheață.
Verde de malachit
Degradarea sonofotocatalitică a verdelui malachit (un bactericid puternic): degradarea fotocatalitică singură este considerabil mai rapidă decât degradarea sonolitică, iar eficiența poate fi îmbunătățită prin cuplarea celor două procese. Verdele malachit, un bactericid puternic, este foarte ecotoxic pentru bacteriile marine, dar este transformat în compuși organici mai puțin toxici sau netoxici.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Acilarea mangiferinei
Mangiferina (1,3,6,7-Tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]xanthen-9-one; formulă: C19H18O11) este un polifenol cu structură de C-glicozilxantonă care se găsește în multe specii de plante. Mangiferina prezintă diverse activități farmacologice. Acilarea regioselectivă a mangiferinei poate fi catalizată foarte eficient de lipază sub ultrasonicare. Comparativ cu metodele convenționale, cataliza asistată de ultrasunete se remarcă prin avantajele unui timp de reacție mai scurt și ale unor randamente mai mari. Condițiile optime pentru acilarea ultrasonică a mangiferinei au fost următoarele:
lipază: PCL, donor de acil: acetat de vinil; solvent de reacție: DMSO, temperatura de reacție: 45 degC, putere ultrasonică: 200W; raportul substraturilor: donor de acil/mangiferină 6/1, încărcare enzimatică: 6 mg/ml
Randamentul acilării regioselective a fost de până la 84%.
Recomandare de dispozitiv:
UP200St sau UP200Ht
Referință/ Lucrare de cercetare:
cp.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Efectul ultrasunetelor asupra acilării regioselective catalizate de lipază a mangiferinei în solvenți neapoși. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Extracția moleculelor
Protocol de extracție pentru extracția din gips, rheolite, bazalt, cenușă edfell și sticlă de obsidian:
O probă de 1g de regolit sau rocă zdrobită este supusă extracției lichide sub iradiere ultrasonică pentru a extrage și solubiliza moleculele țintă. În acest scop, s-au adăugat 3ml MeOH P80 la 1g de probă analog într-o eprubetă de sticlă, iar amestecul a fost sonicat timp de 20 de minute cu un dispozitiv ultrasonic cu sondă UP50H setat la 40% amplitudine. Amestecul a fost lăsat în repaus timp de 10 minute, iar supernatantul tulbure format deasupra probei analog sedimentate a fost decantat în tuburi de centrifugă de 1,5 ml. Pentru a minimiza pierderea componentelor extrase prin adsorbție pe suprafețele tuburilor de centrifugă din polimer hidrofob, tuburile au fost mai întâi blocate cu 0,5% (w/v) BSA în 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatantele au fost clarificate prin centrifugare la 17.000 G timp de 10 minute și depozitate la 2 – 8°C în flacoane de sticlă până la testarea în imunotest.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Rix, C. (2012): Detectarea vieții pe Marte și cipul markerului de viață: teste de anticorpi pentru detectarea moleculelor organice în extracte lichide din probe marțiene. Disertație Universitatea Cranfield 2012.
Sedimente de ficat de șoarece
Peleții au fost spălați și sonicați timp de 5 min cu încă 0,5 mL de LB2 și centrifugați la 12.000 g încă 20 min, iar cele două fracțiuni de supernatant rezultate au fost colectate. În final, peleții au fost dizolvați cu 0,5 mL de tampon conținând 40 mM tris bază, 5 M uree, 2 M tiouree, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolyte 3-10 (LB3) și au fost sonicați și centrifugați la 12.000 g timp de 20 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S; timp de 5min.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Suspensie de ficat de șoarece
Omogenizarea probelor pentru obținerea lizatului celular.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S; timp de 3 x 20 sec.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Penicillium digitatum
Inactivarea ultrasonică a Penicillium digitatum (un patogen al plantelor) în mediu de cultură Sabouraud.
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Referință/ Lucrare de cercetare:
López-Malo, A.; Palou, E .; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Inactivare fungică multifactorială care combină termosonicarea și antimicrobienele. J. Food Eng. 67/ 2005. pp. 87-93.
Ficocianină din Spirulina platensis (Arthrospira platensis)
Extracția ficocianinei din celulele de Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Celule și țesuturi vegetale
Celulele vegetale compactate 30% (W/V) și apa distilată sunt dezintegrate prin sonicare timp de 1–15 min.; dezintegrarea țesuturilor vegetale: 1 g de țesut uscat suspendat în alcool este dezintegrat în timpul unei sonicări de aproximativ 5 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Trombocite
Prepararea lizatului plachetar: dezintegrare în 1–5 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP200Ht
Pleurotus tuberregium
Extracția polizaharidelor din ciuperca comestibilă Pleurotus tuberregium
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Acid poli(lactic-co-glicolic) (PLGA)
Prepararea de poli(acid lactic-co-glicolic) (PLGA) încărcat cu albumină serică bovină (BSA) prin sonicare în 40 sec.
Recomandare de dispozitiv:
Dmini; timp de 40sec.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Freitas et al. (2005): Emulsionare cu ultrasunete flow-through combinată cu micromixare statică pentru producția aseptică de microsfere prin extracție cu solvent.
Polifenoli din mere
Extracția ultrasonică a polifenolilor din mere. Solvent: apos. Randament crescut cu 6%; intensitatea sonicării: 20–75Ws/ml; temperatura procesului: încălzire la 80 degC.
Recomandare de dispozitiv:
UIP2000hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
Vilkhu, K .; Manase, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperarea cu ultrasunete și modificarea ingredientelor alimentare. În: Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss (2011): Tehnologii cu ultrasunete pentru alimente și bioprocesare. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenoli din ceai negru
Extracția ultrasonică a polifenolilor din ceai negru. Solvent: apos. Randament crescut cu 6–18%; intensitatea sonicării: 8–10Ws/ml; presiune ambientală, temperatura procesului: încălzire la 90 degC.
Recomandare de dispozitiv:
UIP2000hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
Vilkhu, K .; Manase, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperarea cu ultrasunete și modificarea ingredientelor alimentare. În: Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss (2011): Tehnologii cu ultrasunete pentru alimente și bioprocesare. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenoli din tescovină de struguri roșii
Extracția ultrasonică a polifenolilor din tescovina de struguri roșii. Solvent: apos. Randament crescut cu 11–35%; intensitatea sonicării: 20–75Ws/ml; presiune ambientală.
Recomandare de dispozitiv:
UIP2000hd
Referință/ Lucrare de cercetare:
Vilkhu, K .; Manase, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperarea cu ultrasunete și modificarea ingredientelor alimentare. În: Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss (2011): Tehnologii cu ultrasunete pentru alimente și bioprocesare. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenoli, aminoacid și cofeină din ceai verde
Extracția compușilor activi din ceaiul verde în apă
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Carne de porc: saramurarea cotletelor de porc
Pentru saramurarea asistată de ultrasunete, bucăți de mușchi de porc (Longissimus dorsi) au fost imersate în saramură de clorură de sodiu (40 g L−1) și tratate la 5°C cu ultrasunete de joasă frecvență (20 kHz) la intensitate scăzută (2–4 W/cm−2). A fost investigat efectul sărării asistate de ultrasunete asupra microstructurii țesutului de porc, denaturării proteinelor, capacității de legare a apei (WBC), capacității de reținere a apei (WHC), coeficientului de difuzie a clorurii de sodiu (D) și profilului textural al cărnii (TPA). Rezultatele au arătat că tratamentul cu ultrasunete a provocat modificări microstructurale favorabile în țesutul cărnii. Capacitatea de reținere a apei și proprietățile texturale au fost îmbunătățite prin tratamentul cu ultrasunete comparativ atât cu probele tratate prin malaxare (tumbling), cât și cu cele saramurate static. Totuși, aceste efecte pozitive au depins în mare măsură de intensitatea ultrasonică. Intensitățile mai mari și/sau timpii de tratament mai lungi au provocat denaturarea proteinelor. Modelul cu coeficient de difuzie constant a putut descrie precis cinetica difuziei NaCl în timpul saramurării. Tratamentul cu ultrasunete a intensificat semnificativ difuzia sării comparativ cu probele saramurate în condiții statice, iar coeficientul de difuzie a crescut exponențial odată cu creșterea intensității ultrasonice.
Recomandare de dispozitiv:
UP200Ht cu sonotrodă S26d40
Referință/ Lucrare de cercetare:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Aplicarea unei tehnici de întărire asistată cu ultrasunete pentru îmbunătățirea difuziei clorurii de sodiu în carnea de porcine. Jurnalul de Inginerie Alimentară 91/2, 2009. 353–362.
Porphyra yezoensis
Degradarea ultrasonică a polizaharidelor din Porphyra yezoensis: 50mL de soluție de polizaharide de porphyra yezoensis de 1,0 g/100mL (greutate uscată) au fost sonicați timp de 4 hr cu un UP400S.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S; ultrasunete pulsate (cicluri: 2 sec pornit/ 2 sec oprit) la 20°C.
Pulberi
Măcinare, dezaglomerare și dispersie până la o dimensiune a particulelor mică, relativ uniformă.
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Oase de șobolan
Ficat de șobolan
Dezintegrare și omogenizare a țesuturilor cu un UP400S.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S; de 3 ori timp de 30 sec.; pe gheață.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver. Journal of Biological Chemistry 2003.
Piele de șobolan
Rauvolfia serpentina
Rebaudiozidă A
Probe de 10g de frunze de stevia uscate și măcinate au fost extrase în 100mL de apă sub agitare continuă (cu un agitator magnetic). Valoarea pH-ului a fost controlată cu fosfat de sodiu 0,01 M pH 7. Proba a fost pusă într-un pahar Berzelius de sticlă de 150 mL și sonicată cu un ultrasonicator cu sondă (UIP500hd, 20kHz, 500W). Vârful sonotrodei a fost imersat aproximativ 1,5 cm în suspensia de frunze de stevia. Dispozitivul ultrasonic a fost setat la o putere de ieșire de 350W. Un tratament de sonicare blând de 350 W timp de 5–10 min. la o temperatură constantă a procesului de 30°C a dus la un randament de rebaudiozidă A de 30–34g la 100g de probă. După sonicare, soluția de extract a fost centrifugată și filtrată printr-o membrană microporoasă de 0,45 μm; filtratul a fost preluat pentru analiza conținutului total de rebaudiozidă A. Randamentul de extracție al conținutului total de rebaudiozidă A a fost analizat prin HPLC.
Prin extracția asistată de ultrasunete fără solvenți, s-a obținut un randament ridicat de rebaudiozidă A în comparație cu metodele tradiționale de extracție, cum ar fi extracția la cald sau macerarea.
Recomandare de dispozitiv:
UIP500hd
Amidon de orez
Dezintegrare, izolarea amidonului și ruperea legăturilor necovalente dintre proteine și amidon într-o suspensie de făină de orez (33%) în 20 – 40 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP500hd; 20 – 40 min.
Rotifere
Dezintegrarea celulelor de mezozooplancton: prin sonicare în următoarele condiții, cu patru debite (200, 400, 520 și 800lh-1) și patru amplitudini (25, 50, 75 și 100%), s-a obținut o rată de distrugere între 58 și 85%.
Recomandare de dispozitiv:
UP2000 cu celulă de flux
Referință/ Lucrare de cercetare:
Viitaslo et al. (2005): Ozonul, lumina ultravioletă, ultrasunetele și peroxidul de hidrogen ca metode de tratare a apei de balast – Experimente cu mezozooplancton în apă salmastră cu salinitate scăzută. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35-55.
S. fragilis
Saccharomyces cerevisiae
Dezintegrare
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Referință/ Lucrare de cercetare:
Guerrero, S,; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Efectul ultrasunetelor asupra supraviețuirii Saccharomyces cerevisiae: influența temperaturii, pH-ului și amplitudinii. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31–39.
Saccharomyces cerevisiae
Inactivarea ultrasonică a Saccharomyces cerevisiae în mediu de cultură Sabouraud și în soluție salină.
Recomandare de dispozitiv:
UP400S
Referință/ Lucrare de cercetare:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Studii privind aplicarea ultrasunetelor de mare putere pentru curățarea și dezinfectarea butoaielor și a plăcilor. Austr. NZ praf de vin. J. 22(3)/ 2007. pp. 96-104.
Șofran, Crocus sativus
Extracția compușilor activi (arome și coloranți).
Faceți clic aici pentru a citi mai multe despre extracția din șofran!
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Kadkhodaee et al. (2007): Extracția cu ultrasunete a compușilor activi din șofran. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Salmonella Senftenberg 775W Gr-
Inactivarea ultrasonică a Salmonella Senftenberg 775W Gr- în tampon citrat-fosfat McIlvaine sau bulion nutritiv.
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Referință/ Lucrare de cercetare:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inactivarea Salmonella Senftenberg 775W prin unde ultrasonice sub presiune la diferite activități acvatice. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218–225.
Salvia miltiorrhiza Bunge
Extracția compușilor biologic activi: Danshensu sodic și patru tanshinone (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone și tanshinone IIA).
Recomandare de dispozitiv:
UP100H
Salvia officinalis
Extracția compușilor activi din Salvia Officinalis (salvie) în mai puțin de 2hr.
Recomandare de dispozitiv:
UP50H
Ser
Ficat și plămâni de oaie cu chisturi și sânge pozitiv (antigene de Echinococcus granulosus)
Ficat și plămâni chistici de oaie și sânge pozitiv (antigeni de Echinococcus granulosus la miei): proba a fost apoi sonicată timp de 2 × 15 sec pe gheață până când nu au mai fost vizibili protoscolecși intacți.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S; 2 x 15 sec.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Tabar et al. (2009): Răspunsul anticorpilor împotriva lichidului hidatic, protoscolexului și întregului corp de antigene Echinococcus granulosus la miei. Journal of Veterinary Research, volumul 10, numărul 3; 2009. 283-288.
Trioleat de sorbitan, etanol (ca solvent) și pulbere de Bi-2212
Dezaglomerarea unei suspensii care conține dispersantul Sorbitant Trioleate, etanol (ca solvent) și pulbere de Bi-2212.
Recomandare de dispozitiv:
UP200S; timp de 3 min.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Mora et al. (2009): Fabricarea acoperirilor supraconductoare pe plăci ceramice structurale.
Izoflavone din soia
extracția ultrasonică a izoflavonelor din soia în apă și solvent. Randament crescut cu până la 15% în eficiența extracției.
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Referință/ Lucrare de cercetare:
Rostagno et al. (2003), citat de Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperarea cu ultrasunete și modificarea ingredientelor alimentare. În: Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss (2011): Tehnologii cu ultrasunete pentru alimente și bioprocesare. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Proteine din soia
Extracția ultrasonică a proteinei din soia în apă și alcali (hidroxid de sodiu). Randament crescut cu 53%. Sonicarea inline s-a dovedit mai eficientă decât extracția în regim batch (sonicarea inline a dat un randament cu 23% mai mare decât sonicarea în regim batch).
Recomandare de dispozitiv:
UIP1000hd pentru regim batch/ pahar Berzelius și cu reactor cu celulă de flux pentru sonicarea inline.
Referință/ Lucrare de cercetare:
Moulton și Wang (1982), citat de Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperarea cu ultrasunete și modificarea ingredientelor alimentare. În: Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss (2011): Tehnologii cu ultrasunete pentru alimente și bioprocesare. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Capete de spermatozoizi umani
Cozi de spermatozoizi umani
Stevia rebaudiana Bert.
Extracția ultrasonică a glicozidei steviozidă din probe de 10 g de frunze uscate de Stevia rebaudiana cu patru dimensiuni ale particulelor (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm și frunze uscate zdrobite), care au fost amestecate cu diferiți solvenți: apă distilată și amestecuri apă/etanol (55% și 70%), cu diferite rapoarte între masa probei și volumul solventului: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v), apoi expuse la ultrasunete la temperatura camerei. Timp de sonicare: < 5 min.
Recomandare de dispozitiv:
UP200St
Contactați-ne! / Întrebați-ne!
Ultrasonicatoare de înaltă performanță pentru orice dimensiune
Dezintegratoarele celulare și omogenizatoarele de țesuturi Hielscher Ultrasonics sunt disponibile în orice dimensiune, pentru orice volum. Fie că trebuie să sonicați probe de dimensiuni mici, probe în masă precum plăcile cu 96 de godeuri, volume medii sau încărcături de camion pe oră, portofoliul nostru oferă ultrasonicatorul ideal pentru aplicația dumneavoastră. Omogenizatoarele ultrasonice compacte, ținute în mână, sunt optime pentru laborator și cercetare, în timp ce seria noastră industrială acoperă tot intervalul de la 0,5kW la 16kW per procesor ultrasonic. Datorită posibilității de instalare în clustere, cu ultrasonicatoarele Hielscher puteți procesa practic orice volum. Robustețea echipamentelor ultrasonice Hielscher permite funcționarea 24/7 în regim intens și în medii solicitante.
Software-ul sofisticat și inteligent permite cel mai înalt control al procesului și confort maxim pentru operator. Toate datele de sonicare sunt înregistrate automat pe un card SD încorporat. Alte funcții inteligente includ presetarea și salvarea parametrilor de sonicare, conexiunea LAN și controlul de la distanță prin browser.
Tabelul de mai jos vă oferă o indicație privind capacitatea aproximativă de procesare a sonicatoarelor noastre de laborator pentru omogenizarea țesuturilor și alte sarcini de pregătire a probelor:
| Dispozitive recomandate | Volum per lot | Debit |
|---|---|---|
| Sonicator pentru plăci cu 96 de godeuri UIP400MTP | plăci multi-godeu / plăci de microtitrare | n.a. |
| CupHorn ultrasonic | CupHorn pentru flacoane sau pahar Berzelius | n.a. |
| GDmini2 | micro-reactor ultrasonic cu flux | n.a. |
| VialTweeter | 0,5 până la 1,5mL | n.a. |
| UP100H | 1 până la 500mL | 10 până la 200mL/min |
| UP200Ht, UP200St | 10 până la 1000mL | 20 până la 200mL/min |
| UP400St | 10 până la 2000mL | 20 până la 400mL/min |
| Agitator ultrasonic pentru site | n.a. | n.a. |
Ultrasonicatorul UP200Ht cu microvârf S26d2 de 2mm pentru sonicarea probelor mici