Ultrasone monstervoorbereiding voor THC-analyse
- Ultrasone extractie is een bewezen methode voor de productie van THC, maar kan ook gebruikt worden voor analytische doeleinden.
- Ultrasoon maken is een veelgebruikte methode om monsters voor te bereiden voor de analyse van het totale THC-gehalte in cannabisproducten.
- Ultrasone extractie wordt toegepast op de monsters vóór TLC-, GC- en HPLC-analyse.
Ultrasone THC-extractie
THC, of tetrahydrocannabinol (delta-9-tetrahydrocannabinol), is de chemische stof die de meeste psychologische effecten van marihuana veroorzaakt. Er zijn meer dan 400 verschillende cannabis soorten bekend. Afhankelijk van de specifieke cannabissoort kan cannabis slechts 0,3% THC bevatten. In andere soorten kan het THC-gehalte oplopen tot 20 wt%.
Ook de verschillende cannabisproducten verschillen aanzienlijk: Zo varieert de gemiddelde THC-concentratie in marihuana tussen de 1 en 5%; in hasj ligt het THC-gehalte tussen de 5 en 15%, en in hasjolie is het gemiddeld 20%. THC in recreatieve doses marihuana is zeer variabel en hoe lager het THC-gehalte in de marihuana, hoe meer de gebruiker moet consumeren om de gewenste effecten te ervaren.
Ultrasone monstervoorbereiding wordt gebruikt om het THC-gehalte te analyseren.
- voor kwaliteitscontrole van recreatieve THC-producten,
- voor kwaliteitsbepaling van farmaceutische THC-producten,
- voor het onderscheid tussen drugshennep en vezelhennep.
Voor THC-analyse worden gewoonlijk de volgende chromatografische methoden gebruikt: Dunnelaagchromatografie (TLC), gaschromatografie (GC) en hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC).
Ultrasoon monsterpreparatieprotocol voor TLC-analyse
Monstervoorbereiding: Voor de voorbereiding van de monsters moet het gedroogde plantmateriaal worden gemacereerd en vermalen tot een homogeen poeder. Voor de ultrasone extractie worden 500 mg poeder van de cannabisplant en 5 ml methanol-chloroformmengsel (verhouding 9 : 1) gemengd in een flesje. Sonificatie kan worden toegepast met een Ultrasoon met microtip, de VialTweeter of de ultrasone kopshoorn. De sonificatietijd duurt ongeveer 5 min. Laat het monster daarna minstens 5 minuten rusten. Verdun het heldere supernatant met het extractiemengsel (v/v: 1 : 10). Vrije THC: 1 μl op de TLC-plaat
Decarboxylering: 100μL van het extract wordt ingedampt tot droogte. Het residu wordt verwarmd bij 180℃ gedurende 4 minuten. Voeg 500 μl methanol-chloroform (v/v 9 : 1) toe. Sonificeer gedurende 5 minuten. Verdun het heldere supernatant met het extractiemengsel (v/v: 1 : 10).
Kalibratie: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silicagel F-254, Merck 5729
TLC-scanner II, software CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Ethylacetaat : Toluol : Chloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Postchromatografische derivatisering: Snelblauwzout 0,1% in 0,1 M NaOH
Densitometrie bij 550 nm
Tetrahydrocannabinol (Δ9-THC) voor analyse en extractie
Ultrasoon monsterpreparatieprotocol voor GC-analyse
Monstervoorbereiding: Het gedroogde plantmateriaal wordt gemacereerd en vermalen tot een homogeen poeder. Voor de extractie worden 500 mg poeder van de cannabisplant en 10 ml methanol-hexanmengsel (verhouding 9 : 1) gemengd in een flacon. Sonificatie kan worden toegepast met een ultrasoon apparaat van het probe-type met microtip, de VialTweeter of de ultrasone kopshoorn. Sonificeer het monster gedurende 15-20 minuten. Schud het monster en laat het minstens 5 minuten rusten. Verdun het heldere supernatant met het extractiemengsel (v/v 1: 20).
Decarboxylering: in het inzetstuk
Injector temperatuur 250℃
Kalibratie: 5 ng/μL tot 250 ng/μL
GC: HP 6890 met 5973 MSD en 7683 autosampler injectie: 1μL, splitless tijd: 2 min.
Kolom: HP-5 MS, 30 m, diameter 250 μm, filmdikte 0,25 μm
Draaggas: He, 35 psi, constante stroom: 4 ml/min.
Oven: 100℃ gedurende 1min.; temperatuurverhoging van 15℃/min. tot 280℃; 280℃ gedurende 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Ultrasoon monsterpreparatieprotocol voor HPLC-analyse
Monstervoorbereiding (analoog aan GC-voorbereiding): Het gedroogde plantmateriaal wordt gemacereerd en vermalen tot een homogeen poeder. Voor de extractie worden 500 mg poeder van de cannabisplant en 10 ml methanol-hexanmengsel (verhouding 9 : 1) gemengd in een flacon. Sonificatie kan worden toegepast met een ultrasone sonde met microtip, de VialTweeter of de ultrasone kopshoorn. Sonificeer het monster gedurende 15-20 minuten. Schud het monster en laat het minstens 5 minuten rusten. Verdun het heldere supernatant met het extractiemengsel (v/v 1: 20).
VialTweeter voor ultrasone monstervoorbereiding
Voorkolom: LiChrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50963)
Kolom: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829).
Eluent: isokratisch 36% TEAP 25 mmol/L, 64% acetonitril kwantificering bij 210nm
Kalibratie: 0,001 – 010 μg/μL
Kalibratie: 0,01 - 0,50 μg/μL
Retentietijd: voor CBD: 6,2 min.; voor CBN: 8,0 min.; voor THC: 9,4 min.; voor THC-A: 11,0 min.
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St met microtip voor sonicatie van monsters
Literatuur/referenties
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische analyse van THC-haltigem Hanfkraut. Van DC via GC naar HPLC-methode. Toepassing 2006.
Wetenswaardigheden
marihuana bestaat uit de gedroogde bloemen en de bladeren en stengels van de vrouwelijke Cannabisplant. Dit is de meest geconsumeerde vorm en bevat ongeveer 3% tot 20% THC. Specifieke, sterk veredelde vormen van marihuana bereiken een THC-gehalte van meer dan 30%. Marihuana is het bronmateriaal voor alle andere soorten THC-houdende cannabisproducten. Om de meest voorkomende cannabinoïde, tetrahydrocannabinolzuur (THCA), om te zetten in de psychoactieve THC, moet een decarboyleringsproces in gang worden gezet. Daarom moeten de cannabis en de cannabisextracten worden verhit of gedehydrateerd om decarboxylering te veroorzaken.
kief verwijst naar een poeder, rijk aan trichomen, dat gezeefd wordt uit de cannabisbladeren en -bloemen. Het wordt geconsumeerd in poedervorm of samengeperst en gebruikt in hasjcakes.
hasj of hasj is een geconcentreerde harskoek of -bal die wordt gemaakt van geperste kief of van de hars die van het oppervlak van de plant wordt geschraapt en tot ballen wordt gerold. Het komt in verschillende kleuren voor, van zwart tot goudbruin, afhankelijk van de zuiverheid en de bron. Het kan oraal geconsumeerd of gerookt worden, bijvoorbeeld in een pijp, waterpijp, waterpijp, bubbler, verdamper, met een heet mes, gerookt in joints, gemengd met cannabistoppen of tabak, gerookt als bottle tokes of gebruikt als ingrediënt in voedsel.
cannabistinctuur verwijst naar het extract van cannabinoïden in alcohol. De cannabinoïden worden uit de cannabisplant geëxtraheerd met sterke sterke drank (meestal graanalcohol) om de tinctuur te maken.
hasjolie is een harsachtige matrix van cannabinoïden geproduceerd door middel van solventextractie, gevormd tot een verharde of stroperige massa. Hasjolie is een van de krachtigste cannabisproducten vanwege het hoge gehalte aan psychoactieve stoffen. Het gebruik van hasjolie geëxtraheerd in butaan en superkritische kooldioxide is recentelijk steeds populairder geworden.
Infusies verwijzen naar verschillende soorten cannabisthee die van elkaar verschillen door de grote verscheidenheid aan niet-vluchtige oplosmiddelen die kunnen worden gebruikt om een cannabisthee te maken. Om een dergelijke infusie te bereiden, wordt cannabis plantmateriaal gemengd met een oplosmiddel en vervolgens geperst en gefilterd om de oliën van de plant in het oplosmiddel over te brengen. Cacaoboter, zuivelboter, bakolie, glycerine en vochtinbrengende crèmes voor de huid zijn veelgebruikte oplosmiddelen.
medische marihuana verwijst naar het gebruik van de Cannabisplant als door een arts aanbevolen kruidentherapie en naar synthetische THC en cannabinoïden. Voor dit gebruik is meestal een recept nodig en de distributie vindt meestal plaats binnen een kader dat wordt bepaald door lokale wetten. Verschillende onderzoeken hebben aangetoond dat het gebruik van cannabis of zijn derivaten werkt tegen bijvoorbeeld door chemotherapie veroorzaakte misselijkheid en braken, neuropathische pijn en multiple sclerose.