Metabolomica vereenvoudigd door sonicatie met hoge verwerkingscapaciteit

Metabolomica is het onderzoeksgebied dat technieken met hoge verwerkingscapaciteit gebruikt om kleine moleculen in verschillende biologische vloeistoffen, zoals urine, serum, plasma, feces en speeksel, te karakteriseren en te kwantificeren en zo unieke metabole signaturen bloot te leggen. De sonicator UIP400MTP met hoge verwerkingscapaciteit, ontworpen voor multiwellplaten, is een krachtig hulpmiddel voor het lyseren van cellen in deze monsters, waardoor metabolieten vrijkomen voor vervolganalyse. Deze nauwkeurige en betrouwbare aanpak is essentieel voor metabolomica, waarbij een nauwkeurige onderzoeksopzet, zorgvuldige monstervoorbereiding, een geoptimaliseerde platformconfiguratie, uitgebreide gegevensanalyse en betekenisvolle biologische interpretatie van het grootste belang zijn. Metabolomica gebruikt zowel gerichte benaderingen, die zich richten op specifieke klassen moleculen zoals koolhydraten, lipiden en aminozuren, als niet-gerichte technieken, die een breed overzicht bieden van de metabole profielen binnen een monster en de ingewikkelde complexiteit van metabole signalering blootleggen.

Monstervoorbereiding met hoge verwerkingscapaciteit met de sonicator UIP400MTP voor 96-wellplaten

Het gebruik van de contactloze sonicator UIP400MTP in combinatie met 96-wellplaten is een efficiënte methode voor homogenisatie en metabolietextractie met hoge verwerkingscapaciteit. Deze opstelling vermijdt direct contact met het monster en vermindert zo het risico op kruisbesmetting terwijl meerdere monsters tegelijkertijd worden verwerkt.

Stapsgewijs protocol voor homogenisatie met de sonicator UIP400MTP voor 96-wellplaten

1. Voorbereiding van monsters voor metabolomica
   Plaatsing van monsters: Breng elk monster (bijv. feces, darmweefsel of luminale inhoud) in een afzonderlijke well van een 96-wellplaat of microplaat.
   Oplosmiddel: Organische oplosmiddelen, zoals methanol, ethanol, acetonitril, chloroform en hun (waterige) mengsels, zijn essentieel voor metabolietextractie en helpen intracellulaire metabolieten uit de cellulaire matrix vrij te maken. Gebruik 100–300 µL oplosmiddel per well en zorg voor voldoende volume om het monster volledig onder te dompelen.
   Interne standaarden: Voeg desgewenst interne standaarden toe aan elke well voor normalisatie tijdens de daaropvolgende metabolomische analyse.
2. Opstelling van het koppelmedium
   Waterniveau: Plaats de 96-wellplaat op het sonicatieplatform dat met water (het koppelmedium) is gevuld, zoals beschreven in de handleiding.
3. Configuratie van de parameters van de UIP400MTP
   Vermogensinstellingen: Stel de ultrasone amplitude in op 50–80% van het maximale vermogen voor efficiënte homogenisatie.
   Pulsmodus: Stel de sonicatiecyclus in op afwisselende pulsen (bijv. 30 seconden AAN, 30 seconden UIT) om koeling mogelijk te maken en oververhitting van de monsters te voorkomen.
   Totale tijd: 4–10 minuten, afhankelijk van de complexiteit en taaiheid van het monster.
   Temperatuurregeling: Gebruik een laboratoriumkoeler om het water tijdens de sonicatie op 4–8°C te houden en zo warmtegevoelige metabolieten te beschermen.
4. Sonicatieproces
   Start de UIP400MTP voor de sonicatiecycli.
   Volg het proces via de interface van de UIP400MTP.
   Het cavitatie-effect homogeniseert de monsters en lyseert de cellen in de wells, waardoor intracellulaire metabolieten in het oplosmiddel vrijkomen.
5. Na de sonicatie
   Centrifugatie: Breng de inhoud van de plaat na de sonicatie indien nodig over in opvangbuisjes. Centrifugeer gedurende 10 minuten bij 4.000–6.000 × g om onoplosbare resten en cellulair materiaal als pellet te laten bezinken.
   Verzamelen van het supernatant: Breng het supernatant uit elke well voorzichtig over in nieuwe buisjes of platen voor analyse.
   Optioneel drogen: Droog de supernatanten met een vacuümconcentrator (bijv. SpeedVac) als concentratie nodig is en los ze vervolgens opnieuw op in een klein volume van het geschikte oplosmiddel.

Benut de hoge verwerkingscapaciteit van de sonicator UIP400MTP voor multiwellplaten en vereenvoudig uw metabolomisch onderzoek en uw analyses!

Principe van contactloze sonicatie met de UIP400MTP

De UIP400MTP brengt ultrasone golven indirect via een koppelmedium (bijv. water) over op de wells van een 96-wellplaat. Deze golven veroorzaken cavitatie, die cellen ontsluit en metabolieten vrijmaakt zonder fysiek contact tussen de sonicatorprobe en het monster.

Ontwerp, productie en advies – Kwaliteit gemaakt in Duitsland

De sonicatoren van Hielscher staan bekend om hun hoogste kwaliteits- en ontwerpnormen. Robuustheid en eenvoudige bediening maken een soepele integratie van onze sonicatoren in industriële installaties mogelijk. De sonicatoren van Hielscher kunnen zware omstandigheden en veeleisende omgevingen gemakkelijk aan.

Hielscher Ultrasonics is een ISO-gecertificeerd bedrijf en legt bijzondere nadruk op sonicatoren met hoge prestaties, met geavanceerde technologie en gebruiksvriendelijkheid. Uiteraard voldoen de sonicatoren van Hielscher aan CE en aan de eisen van UL, CSA en RoHs.