מיקרו-פלטה סוניקטורס חדשה לפירוק ביופילמים עקשניים
, קתרין היילשר, פורסם ב-Hielscher News
ביופילמים – קהילות מיקרוביאליות צפופות הנצמדות למשטחים – הם בין האתגרים הקשים ביותר במיקרוביולוגיה ובאבחון קליני. המיקרו-פלטה הסוניקטורית החדשה UIP400MTP מאפשרת הכנת דגימות בתפוקה גבוהה. ניתוחים של מחקרים שנבדקו על ידי עמיתים מראים כי מערכות אולטראסוניות בעלות ביצועים גבוהים, כגון סוניקטורים רב-תאיים של Hielscher, הופכות לכלי מעבדה חיוניים להסרת מבנים עקשניים אלה מלוחות MBEC™, מה שמאפשר בדיקות אנטי-מיקרוביאליות מדויקות יותר ותהליכי מחקר מהירים יותר.
ניתוק ביופילם באמצעות סוניקציה
מדענים מסתמכים יותר ויותר על סוניקציה של צלחות רב-תאיות, מכיוון שביופילמים יכולים להיות עמידים לאנטיביוטיקה פי מאות מונים יותר מאשר חיידקים פלנקטוניים צפים, על פי שני מחקרים מרכזיים על Staphylococcus aureus, סטפילוקוקים שליליים לקואגולאז ו-Staphylococcus saprophyticus ביופילמים. כאשר הם מוטמעים במטריצת ביופילם, מיקרואורגניזמים אלה מציגים ריכוזים מינימליים מעכבים (MIC) וריכוזים מינימליים קוטלי חיידקים (MBC) גבוהים באופן דרמטי, לעתים קרובות מעבר לרמות התרופות הניתנות להשגה קלינית.
אך בדיקה יעילה מתחילה בהפרדה יעילה ואמינה של תאי הביופילם. – ובזה מתבלט ה-UIP400MTP.
ניתוק תרבויות תאים דבקים מכל מיקרו-פלטה סטנדרטית: הכנת דגימות בתפוקה גבוהה באמצעות מכשיר הסוניקציה UIP400MTP
ביופילמים: מגן נסתר מפני אנטיביוטיקה
בשני המחקרים שצוטטו, החוקרים תיעדו עלייה דרמטית בעמידות לאנטיביוטיקה כאשר החיידקים נבדקו בצורת ביופילם:
ערכי MIC עלו פי 2 עד 32, ולעיתים אף יותר, בהשוואה לתאים פלנקטוניים.
איזולטים מסוימים עברו ממצב של רגישות לאנטיביוטיקה למצב של עמידות מוחלטת לאחר שהגיעו למצב של ביופילם.
חלק מהביופילמים דרשו רמות MBC מעבר לריכוזים הגבוהים ביותר שנבדקו, מה שמדגיש את הסבילות הקיצונית שלהם.
ממצאים אלה מדגישים מדוע פירוק הביופילמים הוא קריטי: פרופיל מדויק של עמידות לתרופות תלוי בשחרור התאים מהמטריצה המגנה, כדי שניתן יהיה לבדוק אותם בנפרד.
הפתרון: מכשיר הסוניקציה למיקרו-פלטה UIP400MTP
בשני המחקרים נעשה שימוש במכשיר הסוניקציה רב-תאי UIP250MTP של Hielscher כדי לנתק ביופילמים שצמחו על מכשירים מיוחדים מסוג MBEC™ pin-lid. סוניקציה של המגש הרב-תאי במשך 5 דקות הצליחה לנתק את תאי הביופילם לתוך מדיום טרי, מה שאפשר לחוקרים למדוד MICB ו-MBCB ברמת שעתוק גבוהה.
טכניקה זו אומצה באופן נרחב מכיוון:
- הוא מטפל בכל הבארות בו-זמנית ובאופן אחיד, דבר חיוני לבדיקות אנטי-מיקרוביאליות השוואתיות.
- קביטציה אקוסטית מפרקת ביעילות את המטריצה החוץ-תאית מבלי להרוס תאים.
- הוא פועל בצורה חלקה עם פלטפורמות MBEC pin-lid המשמשות במחקר על עמידות ביופילם.
תכונות מרכזיות שישכנעו את החוקרים באופן מיידי
- 400 וואט של עוצמת קולי (20 kHz) להסרה מהירה ויסודית של ביופילם
- שליטה מלאה בפרמטרים, כולל צריכת אנרגיה (Ws/mL), משרעת, טמפרטורה וזמן
- מחליף חום מובנה עם משאבת מחזור לשמירה על צלחות קרירות במהלך תהליך הסוניקציה
- מצבים ניתנים לתכנות עבור תהליכי עבודה חוזרים ואוטומטיים
- סוניקציה אחידה על פני כל הצלחות. צפו בסרטון המצורף!
בדיקת האחידות מאשרת באופן ויזואלי את שדה הקוויטציה ההומוגני הנדרש לפירוק ביופילם סטנדרטי. – אתגר ידוע באמבטיות אולטראסוניות בעלות הספק נמוך.
סוניק צלחת רב באר UIP400MTP לביצוע בדיקות MBEC יעילות
מדוע זה חשוב לבתי חולים, מעבדות ופיתוח אנטיביוטיקה
זיהומים הקשורים לביופילם – מזיהומים בדרכי השתן ועד זיהומים בדם הקשורים לצנתר – ידועים כקשים לטיפול. המחקרים מראים:
- בדיקות אנטיביוטיות קונבנציונליות על תאים פלנקטוניים ממעיטות בערכן של העמידות הקיימת במציאות.
- סוניקציה באיכות גבוהה חיונית להכנת דגימות מדויקות שמקורן בביופילם.
- כלים כמו ה-UIP400MTP עוזרים לגשר על הפער בין בדיקות מעבדה למציאות הקלינית.
עם העלייה המתמשכת בעמידות לאנטיביוטיקה, טכנולוגיות המשפרות את השחזור והאמינות במחקר על ביופילם עשויות למלא תפקיד מכריע בפיתוח טיפולים חדשים.
המחקרים המצורפים מובילים למסקנה אחת ברורה: חיידקים היוצרים ביופילם דורשים גישות בדיקה חדשות, ושימוש בסוניקציה בצלחות רב-תאיות. – במיוחד עם מערכות אולטרה-סוניות עוצמתיות במיוחד, המופצות באופן אחיד, כמו Hielscher UIP400MTP. – הופך במהירות לסטנדרט הזהב להסרת ביופילמים מלוחות MBEC.
עבור מעבדות מיקרוביולוגיה, מפתחי תרופות וחוקרים קליניים, מכשירים אלה כבר אינם רק אמצעי נוחות. – הם הופכים לכלי חיוני למדידה מדויקת של העמידות האמיתית לאנטיביוטיקה של פתוגנים המוטמעים בביופילם.
הפניות נוספות
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.


