La sonicación de alto rendimiento facilita la metabolómica

La metabolómica es el campo de investigación que emplea técnicas de alto rendimiento para caracterizar y cuantificar moléculas pequeñas en diversos fluidos biológicos, como orina, suero, plasma, heces y saliva, y revelar firmas metabólicas únicas. El sonicador de alto rendimiento UIP400MTP, diseñado para placas multipocillo, es una potente herramienta para lisar las células de estas muestras y facilitar la liberación de metabolitos para su posterior análisis. Este enfoque preciso y fiable es esencial para la metabolómica, donde son fundamentales un diseño riguroso del estudio, una preparación meticulosa de las muestras, una configuración optimizada de la plataforma, un análisis exhaustivo de los datos y una interpretación biológica significativa. La metabolómica emplea tanto enfoques dirigidos, que se centran en clases específicas de moléculas como los carbohidratos, los lípidos y los aminoácidos, como técnicas no dirigidas, que proporcionan una visión amplia de los perfiles metabólicos de una muestra y revelan la intrincada complejidad de la señalización metabólica.

Preparación de muestras de alto rendimiento con el sonicador para placas de 96 pocillos UIP400MTP

El uso del sonicador sin contacto UIP400MTP en combinación con placas de 96 pocillos es un método eficiente para la homogeneización y la extracción de metabolitos de alto rendimiento. Esta configuración evita el contacto directo con la muestra, lo que reduce el riesgo de contaminación cruzada al procesar varias muestras simultáneamente.

Protocolo paso a paso para la homogeneización con el sonicador para placas de 96 pocillos UIP400MTP

1. Preparación de muestras para metabolómica
   Distribución de las muestras: Dispense cada muestra (p. ej., heces, tejido intestinal o contenido luminal) en pocillos individuales de una placa o microplaca de 96 pocillos.
   Disolvente: Los disolventes orgánicos, como el metanol, el etanol, el acetonitrilo, el cloroformo y sus mezclas (acuosas), son esenciales para la extracción de metabolitos, ya que favorecen la liberación de metabolitos intracelulares de la matriz celular. Utilice 100–300 µL de disolvente por pocillo y asegúrese de que el volumen sea suficiente para sumergir completamente la muestra.
   Patrones internos: De forma opcional, añada patrones internos a cada pocillo para la normalización durante el posterior análisis metabolómico.
2. Preparación del medio de acoplamiento
   Nivel de agua: Coloque la placa de 96 pocillos sobre la plataforma de sonicación llena de agua (el medio de acoplamiento), tal como se describe en el manual.
3. Configuración de los parámetros del UIP400MTP
   Ajustes de potencia: Ajuste la amplitud ultrasónica al 50–80% de la potencia máxima para lograr una homogeneización eficiente.
   Modo pulsado: Configure el ciclo de sonicación con pulsos alternos (p. ej., 30 segundos de activación y 30 segundos de desactivación) para permitir el enfriamiento y evitar el sobrecalentamiento de las muestras.
   Tiempo total: 4–10 minutos, según la complejidad y la resistencia de la muestra.
   Control de temperatura: Utilice un enfriador de laboratorio para mantener el agua a 4–8 °C durante la sonicación y proteger los metabolitos sensibles al calor.
4. Proceso de sonicación
   Ponga en marcha el UIP400MTP para realizar los ciclos de sonicación.
   Supervise el proceso mediante la interfaz del UIP400MTP.
   El efecto de cavitación homogeneizará las muestras y lisará las células dentro de los pocillos, liberando los metabolitos intracelulares en el disolvente.
5. Después de la sonicación
   Centrifugación: Después de la sonicación, transfiera el contenido de la placa a tubos de recogida si es necesario. Centrifugue a 4.000–6.000 × g durante 10 minutos para sedimentar los restos insolubles y el material celular.
   Recogida del sobrenadante: Transfiera con cuidado el sobrenadante de cada pocillo a tubos o placas nuevos para su análisis.
   Secado opcional: Seque los sobrenadantes con un concentrador al vacío (p. ej., SpeedVac) si es necesario concentrarlos y, a continuación, reconstitúyalos en un volumen pequeño del disolvente adecuado.

¡Aproveche la capacidad de procesamiento de alto rendimiento del sonicador para placas multipocillo UIP400MTP y facilite su investigación y sus análisis metabolómicos!

Principio de la sonicación sin contacto con el UIP400MTP

El UIP400MTP aplica ondas ultrasónicas a los pocillos de una placa de 96 pocillos de forma indirecta a través de un medio de acoplamiento (p. ej., agua). Estas ondas generan cavitación, que rompe las células y libera metabolitos sin contacto físico entre la sonda del sonicador y la muestra.

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