Metabolómica facilitada por la sonicación de alto rendimiento

La metabolómica es el campo de investigación que emplea técnicas de alto rendimiento para caracterizar y cuantificar pequeñas moléculas en diversos biofluidos, como orina, suero, plasma, heces y saliva, desvelando firmas metabólicas únicas. El sonicador de alto rendimiento UIP400MTP, diseñado para placas de pocillos múltiples, es una potente herramienta para lisar células en estas muestras, facilitando la liberación de metabolitos para su análisis posterior. Este enfoque preciso y fiable es esencial para la metabolómica, en la que son primordiales un diseño preciso del estudio, una preparación meticulosa de las muestras, una configuración optimizada de la plataforma, un análisis exhaustivo de los datos y una interpretación biológica significativa. La metabolómica emplea tanto enfoques dirigidos, que se centran en clases específicas de moléculas como carbohidratos, lípidos y aminoácidos, como técnicas no dirigidas, que proporcionan una amplia visión de los perfiles metabólicos de una muestra, revelando la intrincada complejidad de la señalización metabólica.

Preparación de muestras de alto rendimiento con el sonicador de placas de 96 pocillos UIP400MTP

El uso del sonicador sin contacto UIP400MTP en combinación con placas de 96 pocillos es un método eficaz para la homogeneización de alto rendimiento y la extracción de metabolitos. Esta configuración evita el contacto directo con la muestra, lo que reduce el riesgo de contaminación cruzada durante el procesamiento simultáneo de varias muestras.

Protocolo paso a paso para la homogeneización con el sonicador de 96 pocillos UIP400MTP

1. Preparación de muestras metabolómicas
   Colocación de muestras: Dispensar cada muestra (por ejemplo, heces, tejido intestinal o contenido luminal) en pocillos individuales de una placa o microplaca de 96 pocillos.
   Disolvente: Los disolventes orgánicos, como el metanol, el etanol, el acetonitrilo, el cloroformo y sus mezclas (acuosas), son esenciales para la extracción de metabolitos, ya que contribuyen a la liberación de metabolitos intracelulares de la matriz celular. Utilice 100-300 µl de disolvente por pocillo, asegurándose de que el volumen sea suficiente para sumergir completamente la muestra.
   Normas internas: Opcionalmente, añada estándares internos a cada pocillo para la normalización durante el análisis metabolómico posterior.
2. Configuración del medio de acoplamiento
   Nivel de agua: Coloque la placa de 96 pocillos en la plataforma de sonicación llena de agua (el medio de acoplamiento) como se describe en el manual.
3. Configuración de parámetros del UIP400MTP
   Ajustes de potencia: Ajuste la amplitud ultrasónica al 50-80% de la potencia máxima para una homogeneización eficaz.
   Modo Pulso: Ajuste el ciclo de sonicación para alternar pulsos (por ejemplo, 30 segundos ON, 30 segundos OFF) para permitir el enfriamiento y evitar el sobrecalentamiento de la muestra.
   Tiempo total: 4-10 minutos, dependiendo de la complejidad y dureza de la muestra.
   Control de temperatura: Utilice un refrigerador de laboratorio para mantener el agua a 4-8°C durante la sonicación para proteger los metabolitos sensibles al calor.
4. proceso de sonicación
   Poner en marcha el UIP400MTP para los ciclos de sonicación.
   Supervise el proceso a través de la interfaz UIP400MTP.
   El efecto de cavitación homogeneizará las muestras y lisará las células dentro de los pocillos, liberando metabolitos intracelulares en el disolvente.
5. PostSonicación
   Centrifugación: Tras la sonicación, transfiera el contenido de la placa a tubos de recogida si es necesario. Centrifugar a 4.000-6.000 × g durante 10 minutos para precipitar los restos insolubles y el material celular.
   Recogida del sobrenadante: Transfiera cuidadosamente el sobrenadante de cada pocillo a nuevos tubos o placas para su análisis.
   Secado opcional: Secar los sobrenadantes utilizando un concentrador de vacío (por ejemplo, SpeedVac) si se requiere concentración y, a continuación, reconstituirlos en un pequeño volumen del disolvente apropiado.

Aproveche la capacidad de procesamiento de alto rendimiento del sonicador de placas de pocillos múltiples UIP400MTP y facilite su investigación y análisis metabolómico.

Principio de la sonicación sin contacto con UIP400MTP

El UIP400MTP aplica ondas ultrasónicas a los pocillos de una placa de 96 pocillos indirectamente a través de un medio de acoplamiento (por ejemplo, agua). Estas ondas crean cavitación, que altera las células y libera metabolitos sin contacto físico entre la sonda del sonicador y la muestra.

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