Υπερήχων προετοιμασία δείγματος για ανάλυση THC
- Υπερήχων εκχύλιση είναι μια αποδεδειγμένη μέθοδος για την παραγωγή της THC, αλλά μπορεί να χρησιμοποιηθεί για αναλυτικούς σκοπούς, πάρα πολύ.
- Υπερήχους είναι μια κοινή μέθοδος προετοιμασίας δείγματος που χρησιμοποιείται για την ανάλυση της συνολικής περιεκτικότητας σε THC στα προϊόντα κάνναβης.
- Υπερήχων εκχύλιση εφαρμόζεται στα δείγματα πριν TLC, GC και HPLC ανάλυση.
Υπερήχων THC εκχύλιση
THC, ή τετραϋδροκανναβινόλη (δέλτα-9-τετραϋδροκανναβινόλη), είναι η χημική ουσία που προκαλεί τις περισσότερες από τις ψυχολογικές επιπτώσεις της μαριχουάνας. Για τα είδη κάνναβης, μπορεί να είναι γνωστά περισσότερα από 400 διαφορετικά στελέχη. Ανάλογα με το συγκεκριμένο στέλεχος κάνναβης, η κάνναβη μπορεί να έχει μόλις 0,3% κ.β. THC. Σε άλλα στελέχη, η περιεκτικότητα σε THC μπορεί να φτάσει έως και 20 wt%.
Επίσης, τα διάφορα προϊόντα κάνναβης ποικίλλουν σημαντικά: Έτσι κυμαίνεται η μέση συγκέντρωση THC στη μαριχουάνα μεταξύ 1 και 5%. Στο χασίς, η περιεκτικότητα σε THC είναι μεταξύ 5 και 15%, και στο έλαιο χασίς, είναι κατά μέσο όρο 20%. Η THC στις ψυχαγωγικές δόσεις μαριχουάνας είναι εξαιρετικά μεταβλητή και όσο χαμηλότερη είναι η περιεκτικότητα THC στη μαριχουάνα, τόσο περισσότερο πρέπει να καταναλώνει ο χρήστης για να βιώσει τα επιθυμητά αποτελέσματα.
Υπερήχων προετοιμασία δείγματος χρησιμοποιείται για την ανάλυση της περιεκτικότητας σε THC
- για τον ποιοτικό έλεγχο των ψυχαγωγικών προϊόντων THC,
- για τον προσδιορισμό της ποιότητας των φαρμακευτικών προϊόντων THC,
- για τη διάκριση ναρκωτικών-κάνναβης και ινών-κάνναβης.
Για την ανάλυση THC, χρησιμοποιούνται συνήθως οι ακόλουθες χρωματογραφικές μέθοδοι: χρωματογραφία λεπτής στιβάδας (TLC), αέρια χρωματογραφία (GC) και υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC)
Πρωτόκολλο προετοιμασίας δείγματος υπερήχων για ανάλυση TLC
Προετοιμασία δείγματος: Για την παρασκευή των δειγμάτων, το αποξηραμένο φυτικό υλικό πρέπει να διαβρέχεται και να αλέθεται σε ομοιογενή σκόνη. Για την εκχύλιση με υπερήχους, 500mg σκόνης φυτού κάνναβης και μείγμα μεθανόλης-χλωροφορμίου 5mL (αναλογία 9: 1) αναμειγνύονται σε φιαλίδιο. Κατεργασία με υπερήχους μπορεί να εφαρμοστεί χρησιμοποιώντας ένα υπερήχων με micro tip, το VialTweeter ή το υπερήχων Cuphorn. Ο χρόνος υπερήχων διαρκεί περίπου 5 λεπτά. Στη συνέχεια, αφήστε το δείγμα να ξεκουραστεί για τουλάχιστον 5 λεπτά. Αραιώνεται το διαυγές υπερκείμενο υγρό με το μείγμα εκχύλισης (v/v: 1:10). Ελεύθερο THC: 1μL στην πλάκα TLC
Αποκαρβοξυλίωση: 100μL του εκχυλίσματος εξατμίζονται μέχρι ξηρού. Το υπόλειμμα θερμαίνεται στους 180°C για 4 λεπτά. Προστίθενται 500μL μεθανόλης-χλωροφορμίου (v/v 9: 1). Υπερήχηση για 5 λεπτά. Αραιώνεται το διαυγές υπερκείμενο υγρό με το μείγμα εκχύλισης (v/v: 1:10).
Βαθμονόμηση: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silica gel F-254, Merck 5729
TLC scanner II, λογισμικό CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Αιθυλακετάτης: Τολουόλη: Χλωροφόρμιο = 3: 17: 0,25 (v/v/v)
Μεταχρωματογραφική παραγωγοποίηση: Fast Blue Salt 0,1% σε 0,1 M NaOH
Πυκνομετρία στα 550 nm
Τετραϋδροκανναβινόλη (Δ9-THC) για ανάλυση και εκχύλιση
Πρωτόκολλο προετοιμασίας δείγματος υπερήχων για ανάλυση GC
Προετοιμασία δείγματος: Το αποξηραμένο φυτικό υλικό διαβρέχεται και αλέθεται σε ομοιογενή σκόνη. Για την εκχύλιση, 500mg σκόνης φυτού κάνναβης και 10mL μείγματος μεθανόλης-εξανίου (αναλογία 9: 1) αναμειγνύονται σε ένα φιαλίδιο. Κατεργασία με υπερήχους μπορεί να εφαρμοστεί χρησιμοποιώντας ένα συσκευή υπερήχων τύπου καθετήρα με micro tip, το VialTweeter ή το υπερήχων Cuphorn. Κατεργασία με υπερήχους του δείγματος για 15-20 λεπτά. Ανακινήστε το δείγμα και αφήστε το να ξεκουραστεί για τουλάχιστον 5 λεπτά. Αραιώνεται το διαυγές υπερκείμενο υγρό με το μείγμα εκχύλισης (v/v 1: 20).
Αποκαρβοξυλίωση: στο ένθετο
Εγχυτήρας temperatur 250°C
Βαθμονόμηση: 5 ng/μL έως 250 ng/μL
GC: HP 6890 με έγχυση αυτόματου δειγματολήπτη 5973 MSD και 7683: 1μL, χρόνος splitless: 2 λεπτά.
Στήλη: HP-5 MS, 30m, διάμετρος 250 μm, πάχος φιλμ 0,25 μm
Φέρον αέριο: He, 35 psi, σταθερή ροή: 4 mL/min.
Φούρνος: 100°C για 1min.; αύξηση θερμοκρασίας από 15°C /min. έως 280°C; 280°C για 5 λεπτά. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Πρωτόκολλο προετοιμασίας δείγματος υπερήχων για ανάλυση HPLC
Προετοιμασία δείγματος (ανάλογη με την προετοιμασία GC): Το αποξηραμένο φυτικό υλικό διαβρέχεται και αλέθεται σε ομοιογενή σκόνη. Για την εκχύλιση, 500mg σκόνης φυτού κάνναβης και 10mL μείγματος μεθανόλης-εξανίου (αναλογία 9: 1) αναμειγνύονται σε ένα φιαλίδιο. Κατεργασία με υπερήχους μπορεί να εφαρμοστεί χρησιμοποιώντας ένα υπερήχων τύπου καθετήρα με micro tip, το VialTweeter ή το υπερήχων Cuphorn. Κατεργασία με υπερήχους του δείγματος για 15-20 λεπτά. Ανακινήστε το δείγμα και αφήστε το να ξεκουραστεί για τουλάχιστον 5 λεπτά. Αραιώνεται το διαυγές υπερκείμενο υγρό με το μείγμα εκχύλισης (v/v 1: 20).
VialTweeter για προετοιμασία δείγματος υπερήχων
Προστήλη: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Στήλη: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Μέσο έκλουσης: ισοκρατικό 36% TEAP 25 mmol / L, 64% ποσοτικοποίηση ακετονιτριλίου στα 210nm
Βαθμονόμηση: 0,001 – 0,10 μg/μL
Βαθμονόμηση: 0,01 – 0,50 μg/μL
Χρόνος κατακράτησης: για CBD: 6,2 λεπτά. για CBN: 8,0 λεπτά· για THC: 9,4 λεπτά. για THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St με μικρο-άκρη για δείγμα κατεργασίας με υπερήχους
Βιβλιογραφία/Αναφορές
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
Γεγονότα που αξίζει να γνωρίζετε
μαριχουάνα αποτελείται από τα αποξηραμένα άνθη και τα φύλλα και τους μίσχους του θηλυκού φυτού κάνναβης. Αυτή είναι η πιο ευρέως καταναλισκόμενη μορφή και περιέχει περίπου 3% έως 20% THC. Συγκεκριμένες, υψηλής φυλής μορφές μαριχουάνας φτάνουν σε περιεκτικότητα THC άνω του 30%. Η μαριχουάνα είναι η πρώτη ύλη όλων των άλλων ποικιλιών προϊόντων κάνναβης που περιέχουν THC. Για να μετατραπεί το πιο άφθονο κανναβινοειδές, το τετραϋδροκανναβινολικό οξύ (THCA), στο ψυχοδραστικό THC, πρέπει να ξεκινήσει μια διαδικασία αποκαρβουλίωσης. Επομένως, η κάνναβη και τα εκχυλίσματα της πρέπει να θερμανθούν ή να αφυδατωθούν για να προκαλέσουν αποκαρβοξυλίωση.
Κιέφ αναφέρεται σε σκόνη, πλούσια σε τριχώματα, η οποία κοσκινίζεται από τα φύλλα και τα άνθη της κάνναβης. Καταναλώνεται είτε σε μορφή σκόνης είτε συμπιεσμένο και χρησιμοποιείται σε κέικ χασίς.
χασίσι Ή το hash είναι ένα συμπυκνωμένο κέικ ρητίνης ή μπάλα που παράγεται είτε από συμπιεσμένο kief είτε από τη ρητίνη που ξύνεται από την επιφάνεια του φυτού και τυλίγεται σε μπάλες. Εμφανίζεται σε διάφορα χρώματα από μαύρο έως χρυσοκαφέ ανάλογα με την καθαρότητα και την πηγή. Μπορεί να καταναλωθεί από το στόμα ή να καπνιστεί, π.χ. σε πίπα, ναργιλέ, bong, bubbler, ατμοποιητή, χρησιμοποιώντας ένα ζεστό μαχαίρι, καπνισμένο σε αρθρώσεις, αναμεμειγμένο με μπουμπούκια κάνναβης ή καπνό, καπνισμένο ως μπουκάλι tokes ή χρησιμοποιείται ως συστατικό σε τρόφιμα.
βάμμα κάνναβης Αναφέρεται στο εκχύλισμα κανναβινοειδών στο αλκοόλ. Τα κανναβινοειδή εξάγονται από το φυτό κάνναβης χρησιμοποιώντας οινοπνευματώδη ποτά υψηλής αντοχής (κυρίως αλκοόλη σιτηρών) για τη δημιουργία του βάμματος.
λάδι χασίς είναι μια ρητινώδης μήτρα κανναβινοειδών που παράγεται με εκχύλιση με διαλύτη, σχηματισμένη σε σκληρυμένη ή ιξώδη μάζα. Το έλαιο χασίς είναι ένα από τα πιο ισχυρά προϊόντα κάνναβης λόγω του υψηλού επιπέδου ψυχοδραστικής ένωσης. Η χρήση του ελαίου χασίς που εξάγεται σε βουτάνιο και υπερκρίσιμο διοξείδιο του άνθρακα έχει αποκτήσει πρόσφατα αυξανόμενη δημοτικότητα.
Εγχύσεις αναφέρονται σε διαφορετικά είδη εγχύσεων κάνναβης που διαφέρουν μεταξύ τους από τη μεγάλη ποικιλία μη πτητικών διαλυτών που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την παραγωγή έγχυσης κάνναβης. Για την παρασκευή μιας τέτοιας έγχυσης, η φυτική ύλη κάνναβης αναμιγνύεται με διαλύτη και στη συνέχεια πιέζεται και διηθείται για να μεταφέρει τα έλαια από το φυτό στο διαλύτη. Το βούτυρο κακάο, το βούτυρο γαλακτοκομικών προϊόντων, το μαγειρικό λάδι, η γλυκερίνη και οι ενυδατικές κρέμες του δέρματος χρησιμοποιούνται συνήθως διαλύτες.
ιατρική μαριχουάνα αναφέρεται στη χρήση του φυτού κάνναβης ως βοτανοθεραπεία που συνιστάται από γιατρό, καθώς και συνθετικό THC και κανναβινοειδή. Αυτή η χρήση απαιτεί γενικά ιατρική συνταγή και η διανομή γίνεται συνήθως μέσα σε ένα πλαίσιο που ορίζεται από τους τοπικούς νόμους. Αρκετές ερευνητικές μελέτες έχουν δείξει ότι η χρήση κάνναβης ή παραγώγων της δρα κατά π.χ. της ναυτίας και του εμέτου που προκαλούνται από χημειοθεραπεία, του νευροπαθητικού πόνου και της σκλήρυνσης κατά πλάκας.