Метаболомика, улеснена чрез ултразвукова обработка с висок капацитет за обработка на проби

Метаболомиката е изследователска област, която използва техники с висок капацитет за обработка на проби за характеризиране и количествено определяне на малки молекули в различни биологични течности, като урина, серум, плазма, фекалии и слюнка, разкривайки уникални метаболитни сигнатури. Ултразвуковият апарат UIP400MTP с висок капацитет за обработка на проби, предназначен за многоямкови плаки, е мощен инструмент за лизиране на клетките в тези проби, улесняващ освобождаването на метаболити за последващ анализ. Този прецизен и надежден подход е съществен за метаболомиката, при която точният дизайн на изследването, внимателната подготовка на пробите, оптимизираната конфигурация на платформата, цялостният анализ на данните и съдържателната биологична интерпретация са от първостепенно значение. Метаболомиката използва както таргетирани подходи, насочени към конкретни класове молекули като въглехидрати, липиди и аминокиселини, така и нетаргетирани техники, които осигуряват широк преглед на метаболитните профили в дадена проба, разкривайки сложността на метаболитната сигнализация.

Подготовка на проби с висок капацитет за обработка с ултразвуковия апарат за 96-ямкови плаки UIP400MTP

Използването на безконтактния ултразвуков апарат UIP400MTP в комбинация с 96-ямкови плаки е ефективен метод за хомогенизация и екстракция на метаболити с висок капацитет за обработка на проби. Тази конфигурация избягва директния контакт с пробата, като намалява риска от кръстосано замърсяване при едновременната обработка на множество проби.

Протокол стъпка по стъпка за хомогенизация с ултразвуковия апарат за 96-ямкови плаки UIP400MTP

1. Подготовка на проби за метаболомика
   Поставяне на пробите: Разпределете всяка проба (напр. фекалии, чревна тъкан или съдържимо на чревния лумен) в отделни ямки на 96-ямкова плака или микроплака.
   Разтворител: Органичните разтворители, като метанол, етанол, ацетонитрил, хлороформ и техните (водни) смеси, са съществени за екстракцията на метаболити, като подпомагат освобождаването на вътреклетъчни метаболити от клетъчната матрица. Използвайте 100–300 µL разтворител на ямка, като осигурите достатъчен обем за пълното потапяне на пробата.
   Вътрешни стандарти: По желание добавете вътрешни стандарти във всяка ямка за нормализация при последващия метаболомен анализ.
2. Подготовка на средата за предаване на ултразвукова енергия
   Ниво на водата: Поставете 96-ямковата плака върху платформата за ултразвукова обработка, напълнена с вода (средата за предаване на ултразвукова енергия), както е описано в ръководството.
3. Конфигуриране на параметрите на UIP400MTP
   Настройки на мощността: Регулирайте ултразвуковата амплитуда до 50–80% от максималната мощност за ефективна хомогенизация.
   Импулсен режим: Настройте цикъла на ултразвукова обработка с редуващи се импулси (напр. 30 секунди ВКЛ., 30 секунди ИЗКЛ.), за да осигурите охлаждане и да предотвратите прегряването на пробите.
   Общо време: 4–10 минути, в зависимост от сложността и устойчивостта на пробата.
   Контрол на температурата: Използвайте лабораторен охладител, за да поддържате водата при 4–8°C по време на ултразвуковата обработка и да защитите чувствителните към топлина метаболити.
4. Процес на ултразвукова обработка
   Стартирайте UIP400MTP за изпълнение на циклите на ултразвукова обработка.
   Наблюдавайте процеса чрез интерфейса на UIP400MTP.
   Кавитационният ефект ще хомогенизира пробите и ще лизира клетките в ямките, освобождавайки вътреклетъчните метаболити в разтворителя.
5. След ултразвуковата обработка
   Центрофугиране: След ултразвуковата обработка прехвърлете съдържанието на плаката в епруветки за събиране, ако е необходимо. Центрофугирайте при 4 000–6 000 × g за 10 минути, за да утаите неразтворимите остатъци и клетъчния материал.
   Събиране на супернатанта: Внимателно прехвърлете супернатанта от всяка ямка в нови епруветки или плаки за анализ.
   Сушене по желание: Ако е необходимо концентриране, изсушете супернатантите с вакуумен концентратор (напр. SpeedVac), след което ги разтворете отново в малък обем от подходящия разтворител.

Възползвайте се от високия капацитет за обработка на проби на ултразвуковия апарат за многоямкови плаки UIP400MTP и улеснете своите метаболомни изследвания и анализи!

Принцип на безконтактната ултразвукова обработка с UIP400MTP

UIP400MTP подава ултразвукови вълни към ямките на 96-ямкова плака непряко чрез среда за предаване на ултразвукова енергия (напр. вода). Тези вълни създават кавитация, която разрушава клетките и освобождава метаболити без физически контакт между сондата на ултразвуковия апарат и пробата.

Проектиране, производство и консултации – качество, произведено в Германия

Ултразвуковите апарати на Hielscher са добре известни със своите най-високи стандарти за качество и проектиране. Здравината и лесната работа позволяват безпроблемното интегриране на нашите ултразвукови апарати в промишлени съоръжения. Ултразвуковите апарати на Hielscher лесно се справят с тежки условия и взискателни среди.

Hielscher Ultrasonics е компания, сертифицирана по ISO, която поставя специален акцент върху високопроизводителните ултразвукови апарати с най-съвременна технология и удобство за потребителя. Разбира се, ултразвуковите апарати на Hielscher съответстват на CE и отговарят на изискванията на UL, CSA и RoHs.