استخراج البروتين بالموجات فوق الصوتية من الأنسجة ومزارع الخلايا
- استخراج البروتين هو خطوة أساسية لإعداد العينة في البروتيوميات.
- يمكن استخراج البروتينات من الأنسجة النباتية والحيوانية والخمائر والكائنات الحية الدقيقة.
- Sonication هي طريقة موثوقة وفعالة لاستخراج البروتين تعطي غلات عالية من البروتين في غضون فترة استخراج قصيرة.
استخراج البروتين من الأنسجة والخلايا
يعد استخراج البروتين من الأنسجة والخلايا المستزرعة خطوة أساسية لإعداد العينات يتم إجراؤها خلال العديد من التقنيات الكيميائية الحيوية والتحليلية مثل ELISA أو PAGE أو النشاف الغربي أو قياس الطيف الكتلي أو تنقية البروتين. يعد تعطيل الخلايا بالموجات فوق الصوتية وتحللها واستخراجها تقنية غير حرارية يمكن التحكم فيها بدقة لضمان غلة عالية من البروتينات.
استخراج البروتين من الخلايا مع مسبار بالموجات فوق الصوتية UP200St
- السريع
- غلة عالية
- كفاءة عالية
- تحكم دقيق في المعلمات
- نتائج قابلة للتكرار
- قابلية التوسع الخطي
تعليمات عامة للتحلل بالموجات فوق الصوتية واستخراج البروتين
- التحكم في درجة الحرارة: لضمان إنتاجية عالية من البروتين دون تمسخ حراري ، يجب التحكم في درجة الحرارة أثناء الاستخراج. Hielscher للدولة من بين الفن المجانسات بالموجات فوق الصوتية – وتسمى أيضا تفكك بالموجات فوق الصوتية أو الموجات فوق الصوتية – يمكن التحكم فيها بدقة. تأتي مع مستشعر درجة حرارة قابل للتوصيل. في خيارات الإعداد للخالط بالموجات فوق الصوتية ، يمكن ضبط درجة الحرارة القصوى. عندما يتم الوصول إلى درجة الحرارة القصوى هذه ، يتوقف الموجات فوق الصوتية تلقائيا حتى تبرد العينة.
- مخزن مؤقت: يختلف اختيار المخزن المؤقت المناسب والحجم المناسب للمخزن المؤقت من نسيج إلى آخر ويجب تحديده عن طريق اختبار التجربة والخطأ.
- العزل / التنقية: يمكن أن تحتوي محللات البروتين على فائض من الجزيئات الحيوية مثل الحمض النووي أو الكربوهيدرات ، والتي يمكن إزالتها عن طريق ترسيب البروتين (حمض ديوكسي كولات ثلاثي كلورو أسيتيك) أو التبادل العازل.
أفاد Chittapalo and Noomhorm (2009) في دراستهم أن إنتاج البروتين زاد باستخدام صوتنة وأن عملية تجانس الأنسجة بالموجات فوق الصوتية والتحلل يمكن أن تعزز عمليات الاستخراج الحالية بشكل كبير – تمكين فرص الاستخراج التجارية الجديدة.
كوب بالموجات فوق الصوتيةهورن لإعداد العينات المتزامن والفعال للغاية لعينات متعددة في ظل نفس الظروف لعزل البروتين وتجزئة الحمض النووي.
استخراج البروتين من الأنسجة الحيوانية
لتحضير الأنسجة كاملة الحجم (مثل الكلى والقلب والرئة والعضلات وما إلى ذلك) ، يجب تشريح الأنسجة إلى قطع صغيرة جدا باستخدام أدوات نظيفة ، ويفضل على الثلج ، وبأسرع وقت ممكن لمنع تدهور البروتياز (مثل محلول التحلل مثل RIPA أو محلول تحلل منخفض التوتر يحتوي على كوكتيل مثبطات البروتياز والفوسفاتيز). بعد التشريح ، يتم غمر العينة في النيتروجين السائل للتجميد المفاجئ. يمكن تخزين العينة في درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامها لاحقا أو الاحتفاظ بها على الجليد للتجانس الفوري. مباشرة قبل الاستخراج بالموجات فوق الصوتية ، يتم إضافة المخزن المؤقت للتحلل البارد الجليدي (مع مثبطات الأنزيم البروتيني DTT و leupeptin و aprotinin) بسرعة إلى أنبوب العينة (لكل ~ 10 ملغ من الأنسجة تقريبا ~ 600 ميكرولتر من المخزن المؤقت موصى به). يوصى بحوالي 20-60 مجم من الأنسجة لكل أنبوب عينة.
يتم تنفيذ التجانس بالموجات فوق الصوتية ، التحلل والاستخراج باستخدام الخالط بالموجات فوق الصوتية مثل UP100H أو UP200Ht ، ومجهزة سونوترود طرف صغير. مدة الصوتنة هي 60-90 ثانية في وضع دورة الموجات فوق الصوتية من 15 ثانية صوتنة و 10 ثوان وقت الراحة. يجب حفظ العينة في الثلج طوال الوقت.
بعد التجانس / الاستخراج بالموجات فوق الصوتية ، يتم طرد المحللة بالطرد المركزي عند 27000 جرام لمدة 20 دقيقة تقريبا. بعد ذلك يتم جمع المادة الطافية ، بحيث يمكن تحديد تركيز البروتين من خلال مقايسة البروتين مثل فحص بروتين بيرس BCA.
استخراج البروتين من مصل الدم
للحصول على خليط متجانس من المصل ومخزن الفوسفات ، يتم تحريك العينة أولا قبل تحلل الخلايا بالموجات فوق الصوتية. بالنسبة للتحلل بالموجات فوق الصوتية ، يتم صوتنة العينة باستخدام خالط مختبر بالموجات فوق الصوتية مثل UP100H لمدة 8 دورات بسعة 20٪ ، لدورات كل 5 ثوان و 15 ثانية قبالة. يتم استخراج البروتين عن طريق صوتنة في دورات (وضع النبض) ووضع العينة على الجليد بحيث يتم تجنب ارتفاع درجة الحرارة والتدهور الحراري للعينة. نظرا لأن المصل يحتوي على كمية كبيرة من البروتينات عالية الوزن الجزيئي (مثل الألبومين ، α1-antitrypsin ، transferrin ، haptoglobulin ، الغلوبولين المناعي G والغلوبولين المناعي A) ، والتي تتداخل مع فصل البروتينات منخفضة الوزن الجزيئي أثناء IEF ، فمن المستحسن استنفادها من المصل باستخدام عمود النضوب.
استخراج البروتين من الأنسجة النباتية
يمكن بسهولة تعطيل الأنسجة النباتية الطازجة واللينة ، مثل الطحالب وما إلى ذلك ، ببساطة عن طريق وضع مادة العينة المفرومة في مخزن مؤقت للتحلل الصوتنة. يجب أن تكون الأنسجة النباتية القاسية ، مثل البذور وإبر التنوب وما إلى ذلك ، جافة تماما. يجب تجميد بعض المواد النباتية الخشبية الصلبة وطحنها في النيتروجين السائل قبل استخراجها عن طريق صوتنة. بالنسبة لمعلقات زراعة الخلايا النباتية ، يكون العلاج بالموجات فوق الصوتية بين 30 و 150 ثانية في مخزن التحلل كافيا في الغالب. تتطلب المواد الأكثر صرامة مثل بذور اليقطين صوتنة أكثر كثافة كما هو موضح أدناه.
بروتوكول لاستخراج بالموجات فوق الصوتية من الألبومين من بذور اليقطين
لاستخراج البروتين بالموجات فوق الصوتية من الألبومين من مسحوق بذور اليقطين المطحون ناعما ، تتم إضافة 10 جم من مسحوق بذور اليقطين منزوع الدهن و 100 مل من الماء منزوع الأيونات كمذيب في دورق زجاجي سعة 250 مل. يتكون استخراج البروتين من خطوتين: أولا ، يتم صوتنة العينة باستخدام مسبار نوع الموجات فوق الصوتية UP400St (400W, 24kHz) مجهزة سونوترودي S24d7. توضع الكأس الزجاجية في حمام ماء بارد أثناء التجانس بالموجات فوق الصوتية. يضمن مستشعر درجة الحرارة القابل للتوصيل وإعدادات التحكم في درجة الحرارة لجهاز الموجات فوق الصوتية UP400St أن درجة حرارة العينة تظل دائما أقل من 30 درجة مئوية. من خلال التحكم الدقيق في درجة الحرارة أثناء الصوتنة ، يتم تجنب تمسخ الألبومين. ثانيا ، تم إجراء الاستخراج باستخدام خلاط بسرعة 200 دورة في الدقيقة وعند 30 درجة مئوية. بعد ذلك يتم نقل الدورق إلى شاكر ثرموستاتي. تتم إزالة الجلوبيولين عن طريق غسيل الكلى بالماء المقطر. بعد إزالة الجلوبيولين ، يمكن أخذ عينات من مستخلص البروتين لتحديد ملف تعريف الألبومين ويتم تعديله لاحقا إلى pI = 3.0 باستخدام 0.1 M HCl لتخثر الألبومين. يتم فصل المرحلة الصلبة عن طريق الطرد المركزي عند 5000 جم ، 20 درجة مئوية ويعاد إذابتها في الماء منزوع الأيونات. يتم إجراء تخثر الألبومين مرتين لزيادة نسبة البروتين في مركز الألبومين.
يظهر استخراج البروتين القلوي بالموجات فوق الصوتية لإعداد مركز البروتين من نخالة الأرز أن العلاج بالموجات فوق الصوتية يؤدي إلى زيادة إنتاج البروتين في وقت استخراج أقصر بكثير – مقارنة بطرق الاستخراج التقليدية.
بروتوكول تحضير العينة لإنزيم iNOS الوظيفي
للحصول على إنزيم iNOS يعمل بكامل طاقته (على سبيل المثال لفحص المخدرات) ، يوصى بالبروتوكول التالي: يجب وضع تعليق الخلية على الجليد ويتم صوته بصوت UP100H بسعة 10 ميكرومتر في وضع الدورة من 5 ثوان. صوتنة و 25 ثانية بقية على الجليد. يجب تكرار الإجراء حوالي 3 مرات. وقت الراحة بين دورات صوتنة يقلل من ارتفاع درجة الحرارة وبالتالي سوف يقلل من خطر تمسخ.
ذوبان البروتين بالموجات فوق الصوتية
قد يؤدي Sonication إلى تسريع عملية إذابة البروتين ، والتي تتطلب عادة عدة ساعات. من أجل عدم ارتفاع درجة حرارة العينة ومنع تدهور البروتين والتعديلات في المحاليل التي تحتوي على اليوريا ، يجب ألا تستمر الانفجارات فوق الصوتية لفترة أطول من بضع ثوان.
الموجات فوق الصوتية UP200Ht مع 2mm microtip S26d2 لصوتنة العينات الصغيرة.
معدات الموجات فوق الصوتية لاستخراج البروتين
Hielscher الفوق صوتيات تقدم مجموعة واسعة من المجانسات بالموجات فوق الصوتية لتفكك الخلايا والأنسجة والبكتيريا والكائنات الحية الدقيقة والخميرة والجراثيم.
الموجات فوق الصوتية مختبر Hielscher هي قوية وسهلة التشغيل. تم تصميمها للتشغيل 24/7 ، وهي مصممة كمختبر قوي وفعال وأجهزة على مقاعد البدلاء. بالنسبة لجميع الأجهزة ، يمكن التحكم بدقة في خرج الطاقة والسعة. تفتح المجموعة الواسعة من الملحقات المزيد من خيارات الإعداد. الموجات فوق الصوتية الرقمية مثل VialTweeter ، UP200Ht ، UP200St ، و UP400St لديها تحكم متكامل في درجة الحرارة وبطاقة SD مدمجة لتسجيل البيانات التلقائي.
بالنسبة للصوتنة غير المباشرة والخالية من التلوث المتبادل والمتزامنة لعينات متعددة ، فإننا نقدم VialTweeter أو CupHorn بالموجات فوق الصوتية.
يمنحك الجدول أدناه نظرة عامة على الموجات فوق الصوتية لدينا لإعداد العينات وتعطيل الخلايا واستخراجها. انقر فوق نوع الجهاز للحصول على مزيد من المعلومات حول كل خالط بالموجات فوق الصوتية. سيكون من دواعي سرور موظفينا الفنيين المدربين تدريبا جيدا وذوي الخبرات الطويلة مساعدتك في اختيار الموجات فوق الصوتية الأنسب لإعداد عينتك!
| حجم الدفعة | معدل التدفق | الأجهزة الموصى بها |
|---|---|---|
| ما يصل إلى 10 قوارير أو أنابيب | ن.أ. | VialTweeter |
| لوحات متعددة الآبار / ميكروتيتر | ن.أ. | UIP400MTP |
| أنابيب / أوعية متعددة | ن.أ. | كوبهورن |
| 1 إلى 500 مل | 10 إلى 200 مل / دقيقة | UP100H |
| 10 إلى 1000 مل | 20 إلى 200 مل / دقيقة | UP200Ht, UP200St |
| 10 إلى 2000 مل | 20 إلى 400 مل / دقيقة | UP400St |
اعتمادا على التطبيق والمواد وحجم العينة ، نوصيك بالإعداد الأنسب لإعداد عينتك. اتصل بنا اليوم!
اتصل بنا! / اسألنا!
Hielscher الموجات فوق الصوتية الرقمية ميزة جهاز التحكم عن بعد متصفح وبروتوكول البيانات التلقائي على بطاقة SD متكاملة.
VialTweeter للصوتنة غير المباشرة.
حقائق تستحق المعرفة
البروتيوميات
البروتيوميات هو مجال البحث الذي يبحث في البروتينات والبروتين. تؤدي البروتينات مجموعة واسعة من الوظائف الحيوية داخل الكائنات الحية. البروتين هو مجموعة البروتينات الكاملة التي يعبر عنها الجينوم أو الخلية أو النسيج أو الكائن الحي في وقت معين. يختلف البروتين مع مرور الوقت والمتطلبات المميزة ، أو الضغوط ، التي تخضع لها الخلية أو الكائن الحي. وبشكل أكثر تحديدا ، إنها مجموعة البروتينات المعبر عنها في نوع معين من الخلايا أو الكائنات الحية ، في وقت معين ، في ظل ظروف محددة. المصطلح هو مزيج من البروتينات والجينوم. البروتيوميات هي دراسة البروتين.
بروتين
البروتينات هي جزيئات حيوية كبيرة ، تسمى الجزيئات الكبيرة – التي تتكون من واحد أو أكثر من سلاسل طويلة من بقايا الأحماض الأمينية. توجد البروتينات في جميع الكائنات الحية ذات الأصل النباتي والحيواني وهي ضرورية لمعظم الوظائف البيولوجية. نظرا لأن البروتينات تحتوي على الكثير من المعلومات البيولوجية ، يتم استخراجها لأغراض تحليلية ، على سبيل المثال للبحث البروتيني. تشمل أهم وظيفة تؤديها البروتينات تحفيز التفاعلات الأيضية ، وتضاعف الحمض النووي ، والاستجابة للمثيرات ، ونقل الجزيئات من موقع إلى آخر. تختلف البروتينات عن بعضها البعض في المقام الأول في تسلسل الأحماض الأمينية ، والذي يمليه تسلسل النوكليوتيدات لجيناتها ، والذي ينتج عنه عادة طي البروتين في بنية ثلاثية الأبعاد محددة تحدد نشاطه. البروتينات هي – إلى جانب الببتيدات – أحد المكونات الرئيسية للغذاء. لذلك ، تعد البروتينات أداة قوية في علوم الأغذية لتحسين العمليات وسلامة الأغذية والتقييم الغذائي.
Cloud Point Extraction
Cloud Point Extraction هو إجراء ما قبل التحليل لفصل التحليلات وتصورها مسبقا. بالاقتران مع الموجات فوق الصوتية ، يمكن تكثيف استخراج نقطة السحابة مما يجعل العملية أكثر كفاءة وأسرع وأكثر صداقة للبيئة. مع الموجات فوق الصوتية ، يعد استخراج نقطة السحابة طريقة أكثر فاعلية لإعداد التحليل. اقرأ المزيد عن استخراج نقطة السحابة بمساعدة الموجات فوق الصوتية!هلام الكهربائي
الرحلان الكهربائي الهلامي هو الطريقة الرئيسية لفصل وتحليل الجزيئات الكبيرة مثل الحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتينات وكذلك شظاياها ، بناء على حجمها وشحنتها. يتم استخدامه في الكيمياء السريرية لفصل البروتينات عن طريق الشحنة و / أو الحجم (IEF agarose ، مستقل الحجم بشكل أساسي) وفي الكيمياء الحيوية والبيولوجيا الجزيئية والبروتينات لفصل مجموعة مختلطة من شظايا الحمض النووي والحمض النووي الريبي حسب الطول ، لتقدير حجم شظايا الحمض النووي والحمض النووي الريبي أو لفصل البروتينات عن طريق الشحنة.
مزارع الخلايا
زراعة الخلايا هي عملية النمو الخاضعة للرقابة التي يتم من خلالها زراعة الخلايا في ظل ظروف خاضعة للرقابة. تختلف ظروف زراعة الخلايا لكل نوع من أنواع الخلايا. بشكل عام ، تتكون بيئة زراعة الخلايا من وعاء مناسب (مثل طبق بتري) مع ركيزة أو وسط يوفر العناصر الغذائية الأساسية (الأحماض الأمينية والكربوهيدرات والفيتامينات والمعادن) وعوامل النمو والهرمونات والغازات (CO2، يا2) ، وينظم البيئة الفيزيائية والكيميائية (مخزن الأس الهيدروجيني ، الضغط التناضحي ، درجة الحرارة). تحتاج معظم الخلايا إلى سطح أو ركيزة اصطناعية ، بينما يمكن زراعة مزارع الخلايا الأخرى بحرية عائمة في وسط الثقافة (ثقافة التعليق ، تعليق الخلية).
تستخدم الثقافات الجماعية لخطوط الخلايا الحيوانية في الإنتاج الصناعي للقاحات الفيروسية وغيرها من المنتجات المشتقة من التكنولوجيا الحيوية. يتم استزراع الخلايا الجذعية البشرية لزيادة عدد الخلايا وتمييز الخلايا إلى أنواع مختلفة من الخلايا الجسدية لأغراض الزرع.
عينات الأنسجة
يصف مصطلح النسيج وسيطا خلويا ، حيث تكون مادة الخلية على المستوى التنظيمي بين الخلايا والعضو الكامل. في الأنسجة ، يتم تجميع خلايا مماثلة ، من نفس الأصل تؤدي معا وظيفة محددة. من خلال التجميع الوظيفي للأنسجة المتعددة ، يتم تشكيل الهياكل المعقدة للأعضاء.
يتم أخذ عينات من الأنسجة للبحث في علم الأحياء ، وعلم الأنسجة / علم أمراض الأنسجة ، وعلم الطفيليات ، والكيمياء الحيوية ، والكيمياء المناعية ، وكذلك لزراعة واستخراج الحمض النووي. يمكن التمييز بين (التقسيم: أنسجة الثدييات) والأنسجة النباتية. تصنف الأنسجة الحيوانية في أربعة أنواع أساسية من النسيج الضام والعضلات والعصبي والطلائي. تنقسم الأنسجة النباتية إلى أنظمة الأنسجة الثلاثة التالية: البشرة، والأنسجة الأرضية، والأنسجة الوعائية.
يمكن تحضير عينات الأنسجة من أجزاء حيوانية أو نباتية ، مثل العظام والعضلات والأوراق وما إلى ذلك.
سوائل الجسم
الدم والمصل والبلازما والسائل النخاعي واللعاب والسائل الزليلي هي سوائل الجسم ، والتي توفر مصدرا كبيرا للمعلومات ذات الصلة بالتشخيص. لذلك ، من المهم إعداد متطور لعينات سوائل الجسم للتحليل. ترتبط الصعوبة الأولى بالنطاق الديناميكي الواسع للمكونات الموجودة في سوائل الجسم.
تحديد تركيز البروتين
مقايسة برادفورد ومقايسة لوري ومقايسة حمض البيسينتشونينيك (BCA) هي مقايسات شائعة لتحديد تركيز البروتينات. ألبومين مصل الأبقار (BSA) هو أحد أكثر معايير البروتين استخداما.
التحلل العازلة
يجب اختيار المخزن المؤقت للتحلل وفقا لمادة الخلية أو الأنسجة (زراعة الأنسجة ، النبات ، البكتيريا ، الفطريات ، إلخ) ، وما إذا كانت الخلايا في بنية ونوع الهيكل. يتم تصنيع مجموعة واسعة من مخازن التحلل لاستخراج البروتينات والأغشية والعضيات مع واحد أو أكثر من المنظفات. عادة ما يتم اختيار المنظف عن طريق اختبارات التجربة والخطأ أو – إذا كان ذلك متاحا – وفقا لبروتوكول استخراج البروتين الحالي. يجب أن يكون المنظف متوافقا مع مصدر الأنسجة والبروتينات. بشكل عام ، يتم اختيار أخف منظف يعمل مع نسيج / بروتين معين ، من أجل الحفاظ على أقصى وظيفة للمستخلص. علاوة على ذلك ، في حالة استخراج الأغشية والعضيات ، يحافظ المنظف المعتدل على الغشاء سليما. المنظفات شائعة الاستخدام في مخازن التحلل هي في الغالب غير أيونية أو zwitterionic ، على سبيل المثال CHAPS و deoxycholate و Triton™ X-100 و NP40 و Tween 20.
على سبيل المثال ، يمكن ببساطة تخزين الأنسجة مثل الدماغ والكبد والأمعاء والكلى والطحال وما إلى ذلك باستخدام RIPA – ومع ذلك ، يجب تضمين مثبطات الأنزيم البروتيني و DTT (على سبيل المثال للرحلان الكهربائي الهلامي).
مخزن التحلل للأنسجة العضلية الهيكلية (بارد مثلج): 20 مللي مول تريس (درجة الحموضة 7.8) ، 137 مللي مول كلوريد الصوديوم ، 2.7 مللي مول KCl ، 1 مللي مول MgCl2 ، 1٪ Triton X-100 ، 10٪ (وزن / حجم) جلسرين ، 1 مللي مول EDTA ، 1 مللي مول ديثيوثريتول مكمل بالبروتياز وكوكتيل مثبطات الفوسفاتيز
جدول المخازن المؤقتة الشائعة ونطاق الأس الهيدروجيني الخاص بها. بشكل عام ، تستخدم هذه المخازن المؤقتة عادة بتركيزات 20-50 مللي مول.
| مخزن مؤقت | نطاق الأس الهيدروجيني |
|---|---|
| حامض الستريك – هيدروكسيد الصوديوم | 2.2 – 6.5 |
| سترات الصوديوم – حامض الستريك | 3.0 – 6.2 |
| خلات الصوديوم – حمض الخليك | 3.6 – 5.6 |
| ملح الصوديوم حمض الكاكوديليك – حمض الهيدروكلوريك | 5.0 – 7.4 |
| مس – هيدروكسيد الصوديوم | 5.6 – 6.8 |
| فوسفات هيدروجين الصوديوم – فوسفات هيدروجين الصوديوم | 5.8 – 8.0 |
| إيميدازول – حمض الهيدروكلوريك | 6.2 – 7.8 |
| المماسح – كوه | 6.6 – 7.8 |
| ثلاثي إيثانولامين هيدروكلوريد – هيدروكسيد الصوديوم | 6.8 – 8.8 |
| تريس – حمض الهيدروكلوريك | 7.0 – 9.0 |
| هيبس – هيدروكسيد الصوديوم | 7.2 – 8.2 |
| تريسين – هيدروكسيد الصوديوم | 7.6 – 8.6 |
| رباعي الصوديوم – حمض البوريك | 7.6 – 9.2 |
| بيسين – هيدروكسيد الصوديوم | 7.7 – 8.9 |
| جليكاين – هيدروكسيد الصوديوم | 8.6 – 10.6 |
تظهر معظم المخازن المؤقتة اعتمادا على درجة الحموضة مع درجة الحرارة. هذا ينطبق بشكل خاص على مخازن Tris. يتغير pKa من 8.06 عند 25 درجة مئوية إلى 8.85 عند 0 درجة مئوية.
(الرقم الهيدروجيني و pKa للمخزن المؤقت: يقيس الرقم الهيدروجيني تركيز أيونات الهيدروجين في محلول مائي. pKa (= ثابت تفكك الحمض) هو مقياس مرتبط ، ولكنه أكثر تحديدا ، من حيث أنه يساعد على التنبؤ بكيفية عمل الجزيء عند قيمة pH محددة.)
تريزول
تريزول هو محلول كيميائي يستخدم لاستخراج الحمض النووي الريبي / الحمض النووي / البروتين أثناء استخراج ثيوسيانات الفينول كلوروفورم جوانيدينيوم. يؤدي استخدام استخراج TRIzol بمساعدة الموجات فوق الصوتية إلى ارتفاع إنتاجية الحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتين من نفس العينة وبالتالي يتفوق على طرق الاستخراج الأخرى.
الأدب / المراجع
- Chittapalo T, Noomhorm A (2009): Ultrasonic assisted alkali extraction of protein from defatted rice bran and properties of the protein concentrates. Int J Food Sci Technol 44: 1843–1849.
- Simões, André E.S:; Pereira, Diane M.; Amaral, Joana D.; Nunes, Ana F.; Gomes, Sofia E.; Rodrigues, Pedro M.; Lo, Adrian C.; D’Hooge, Rudi; Steer, Clifford J.; Thibodeau, Stephen N.; Borralho, Pedro M.; Rodrigues, Cecília M.P. (2013): Efficient recovery of proteins from multiple source samples after trizol or trizol LS RNA extraction and long-term storage. BMC Genomics 2013, 14:181.