تحضير المصل الغني بالصفائح الدموية بالموجات فوق الصوتية
- البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) هي بلازما دم أُثريت بالصفائح الدموية، وتُستخدم في العلاجات الطبية والتجميلية.
- يُعد التحلل والتهيئة بالموجات فوق الصوتية طريقة فعالة للغاية لتحضير البلازما الغنية بالصفائح الدموية.
- تقدم Hielscher Ultrasonics أنظمة متنوعة للموجات فوق الصوتية تلبي متطلبات معالجة الدم (مثل تحضيره داخل غرفة نظيفة وخارجها).
المصل الغني بالصفائح الدموية
المعالجة بالموجات فوق الصوتية طريقة موثوقة وسهلة لتحليل الصفائح الدموية في مصل الدم الذاتي بهدف تحرير عوامل النمو. وتُستخدم الأجزاء المشتقة من الصفائح الدموية – المعروفة أيضًا باسم المصل الذاتي المهيأ (ACS) – لترميم الأنسجة أو للعلاجات التجميلية. وللحصول على نتائج مثلى، تُثرى PRP قبل الحقن.
لتحضير بلازما مُثراة بعوامل نمو الخلايا، تُعد المعالجة بالموجات فوق الصوتية طريقة فعالة وعالية الكفاءة لتحليل أغشية الخلايا وتحرير جميع عوامل نمو الخلايا تقريبًا من الصفائح الدموية. وباستخدام التحلل والتهيئة بالموجات فوق الصوتية، يمكن استخدام الدم المعالج بمضادات التخثر أيضًا.
تُعد تهيئة PRP بالمعالجة بالموجات فوق الصوتية وسيلة ميسرة وفعالة من حيث التكلفة للحصول على عوامل نمو مركزة.
التحلل بالموجات فوق الصوتية للبلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP)
تأثيرات التحلل بالموجات فوق الصوتية
تؤدي معالجة مصل الدم بالموجات فوق الصوتية إلى تحلل متجانس للصفائح الدموية بهدف تحرير عوامل النمو المحتجزة داخلها (عامل النمو AB (PDGF-AB)، وعامل النمو AA (PDGF-AA)، وعامل النمو BB (PDGF-BB)، وعامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF)، وعامل النمو المحول β (TGF-β)، وعامل نمو البشرة (EGF)، وعامل النمو الشبيه بالإنسولين (IGF)، وعامل نمو الخلايا الظهارية ECGF، وعامل نمو الخلايا الليفية (FGF)). وتُفكَّك الصفائح الدموية وحبيبات ألفا الموجودة فيها بالمعالجة بالموجات فوق الصوتية باستخدام ظاهرة التجويف الصوتي. ويقلل استخدام التجويف بالموجات فوق الصوتية لتحليل الصفائح الدموية من التأثير السلبي المحتمل لطريقة التجميد والإذابة المتكررين على نشاط عوامل النمو.
بروتوكول تحضير PRP بالموجات فوق الصوتية
تُقلب عينة دم ذاتي جُمعت حديثًا، بحجم يقارب 16mL، برفق داخل أنبوب 8–10 مرات حتى يمتزج الدم ومضادات التخثر جيدًا. بعد ذلك، تُجرى للعينة عملية طرد مركزي عند 1800 g لمدة 20 min في درجة حرارة الغرفة. وبعد الطرد المركزي، تُشكِّل الصفائح الدموية والخلايا أحادية النواة طبقة مائلة إلى البياض في أسفل طبقة البلازما، وتُعرف هذه الطبقة باسم البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP). وتُعرف الطبقة العلوية باسم البلازما الفقيرة بالصفائح الدموية (PPP). ويمكن إزالة الخلايا أحادية النواة أو إبقاؤها في العينة. وغالبًا ما تُترك الخلايا أحادية النواة في عينة PRP لتجنب الخطوات الإضافية التي تنطوي على خطر التلوث.
ملاحظة: يجب إجراء معالجة PRP الذاتية بالموجات فوق الصوتية في ظروف معقمة.
تُفصل PRP وPPP وتُجمعان. ويُضاف إلى PPP مقدار 1.5mL من محلول كلوريد الكالسيوم بتركيز 10%، بينما يُضاف إلى PRP مقدار 0.5mL من الإيثانول بتركيز 5%. ويُحرَّك كلا المعلقين برفق ويُتركان لمدة 5 min في درجة حرارة الغرفة. وأخيرًا، يُضاف 1mL من PPP إلى معلق PRP، ويُترك حتى تتكون خثرة فيبرين.
المعالجة بالموجات فوق الصوتية: نظرًا إلى أن هلام الصفائح الدموية المتكوّن يعمل خزانًا لعوامل النمو المحررة، يجب تفكيك هلام الفيبرين لتحرير عوامل النمو المتاحة. وفيما يلي معلمات التحلل بالموجات فوق الصوتية وتحرير عوامل النمو: عالج العينة في الأنبوب بالموجات فوق الصوتية باستخدام جهاز UP200Ht أو UP200St (200W, 26kHz) المزود بسونوترود S26d2. ولتجنب ارتفاع درجة حرارة عينة الدم أكثر من اللازم، يمكن إجراء المعالجة بالموجات فوق الصوتية في دورات نبضية (مثل التشغيل لمدة 10 sec. والتوقف لمدة 30 sec.). ويجب وضع العينة على الثلج لتبريدها بحيث تُحافَظ على درجة الحرارة، على نحو أمثل، بين 2 – 5°C. وبعد المعالجة بالموجات فوق الصوتية، تُجرى للعينة عملية طرد مركزي عند 16,000 g لمدة 5 min. في درجة حرارة الغرفة. ويُجمع السائل الطافي ويمكن تخزينه عند -70°C.
زاد تركيز الصفائح الدموية في جزء PRP بمقدار 1.7 – 4.5 أضعاف باستخدام طريقة المعالجة بالموجات فوق الصوتية مقارنة بمتوسط عدد الصفائح الدموية في الدم الكامل الوارد في الأدبيات.
جُمعت PRP مع العلاج بالخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية (خلايا جذعية ذاتية محررة من الأنسجة الدهنية بالموجات فوق الصوتية، خُلِطت مع PRP وأُعيد حقنها في أنسجة المريض لترميمها).
معدات الموجات فوق الصوتية
تتمتع Hielscher Ultrasonics بخبرة في تقنيات الموجات فوق الصوتية المتطورة والموثوقة. وتُستخدم أجهزتنا للموجات فوق الصوتية في جميع أنحاء العالم للتحلل والاستخلاص وتحضير العينات – بالطرق المباشرة وغير المباشرة. الملحقات القابلة للتعقيم بالأوتوكلاف وكذلك المخصصة للاستخدام مرة واحدة تضمن معالجة خالية من التلوث لعينات الدم الذاتي. ويمكن استخدام معظم أنظمتنا للتحلل بالموجات فوق الصوتية لكل من الخلايا الجذعية وPRP، مما يزيد الكفاءة الاقتصادية لأجهزتنا للموجات فوق الصوتية.
يسرد الجدول أدناه أجهزتنا للموجات فوق الصوتية المناسبة لتحضير البلازما الغنية بالصفائح الدموية، وحجم العينة الموصى به لكل جهاز. وتتوفر أيضًا أجهزة معالجة بالموجات فوق الصوتية أكبر وأنظمة مصممة حسب الطلب.
| الجهاز | القدرة [W] | التردد [kHz] | النوع | الحجم [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | مستقل | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50H | 50 | 30 | محمول باليد أو مثبت على حامل | 0.01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | محمول باليد أو مثبت على حامل | 0.01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | محمول باليد أو مثبت على حامل | 0.1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | مثبت على حامل | 0.1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | مثبت على حامل | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | مستقل | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | خلية التدفق الخالية من التلوث | |||
يرجى التواصل معنا اليوم! يسعدنا مساعدتك في العثور على الجهاز الأمثل للموجات فوق الصوتية!
تواصل معنا! / اسألنا!
GDmini2 مع محول UP200St-TD (200 واط)
المصادر والمراجع
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): يحفز هلام محلَّل الصفائح الدموية والخلايا السلفية البطانية تكوّن شبكة الأوعية الدموية الدقيقة في المختبر: دلالات لهندسة الأنسجة. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A.; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): البلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) لإصابات العضلات الحادة: مراجعة منهجية. PLOS ONE المجلد 9، العدد 2، 2014.
حقائق جديرة بالمعرفة
البلازما الغنية بالصفائح الدموية
تحتوي البلازما الغنية بالصفائح الدموية على عامل النمو AB (PDGF-AB)، وعامل النمو المشتق من الصفائح الدموية AA (PDGF-AA)، وعامل النمو المشتق من الصفائح الدموية BB (PDGF-BB)، وعامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF)، وعامل النمو المحول β (TGF-β)، وعامل نمو البشرة (EGF)، وعامل النمو الشبيه بالإنسولين (IGF)، وعامل نمو الخلايا الظهارية ECGF، وعامل نمو الخلايا الليفية (FGF)، وهي محفزات مهمة لنمو الخلايا وتجددها.
المصل الذاتي المهيأ (ACS)
البلازما الذاتية المهيأة (ACP) هي بلازما غنية بالصفائح الدموية تُستخلص من الدم الذاتي وتُستخدم لدعم التجدد في مجموعة متنوعة من الحالات المتعلقة بالعظام والإجراءات الجراحية. ويُحضَّر المصل المهيأ بفصل البلازما عن مكونات الدم الأخرى (مثل كريات الدم الحمراء) وتركيزها. وACP هي بلازما غنية بالصفائح الدموية (PRP). وPRP مصطلح عام لنوع من البلازما يحتوي على تركيز أعلى بكثير من الصفائح الدموية مقارنة بالدم الكامل. وتُستخلص من الدم الكامل. وتشمل المكونات الرئيسية لـ ACP الصفائح الدموية وعدة عوامل نمو أساسية في عمليات الالتئام. وبخلاف تركيبات البلازما الغنية بالصفائح الدموية الأخرى، تتميز ACP بانخفاض تركيز خلايا الدم البيضاء، مثل الخلايا المحببة العدلة، التي يمكن أن تضر بعملية الالتئام عند وجودها بتركيزات عالية.
حقن البلازما الغنية بالصفائح الدموية
تُستخدم البلازما الغنية بالصفائح الدموية على هيئة حقن في الطب التجديدي وكذلك في الإجراءات التجميلية. ويَعِد استخدام PRP بتسريع كبير لالتئام العضلات وتعافيها. وعلاوة على ذلك، تُستخدم بنجاح لعلاج الالتهاب والتهاب المفاصل والألم والجروح والجروح المفتوحة بطيئة الالتئام والحروق الجلدية الشديدة. وتحتوي PRP على مستوى مرتفع من عوامل النمو التي تحفز الخلايا المسؤولة عن الالتئام وتحميها، بحيث تُرمَّم الأنسجة المتضررة.
وفي العلاجات التجميلية، ثبتت فعالية PRP في تحفيز نمو الشعر وتجدد الجلد (المعروف أيضًا باسم علاج مصاص الدماء).
عوامل النمو المشتقة من الصفائح الدموية (PDGF)
يشير مصطلح عامل النمو المشتق من الصفائح الدموية (PDGF) إلى العوامل PDGF-A وPDGF-B وPDGF-C وPDGF-D. وهو شبكة إشارات تتكون من أربع ربيطات (PDGF-A وPDGF-B وPDGF-C وPDGF-D) ومستقبلين، هما PDGFR-alpha وPDGFR-beta.
تنظم عوامل النمو، أو البروتينات، نمو الخلايا وانقسامها. وبوصفه العامل الرئيسي المحفز للانقسام الخلوي الموجود في مصل الثدييات، والذي يتحرر من الصفائح الدموية أثناء تكوّن الخثرة، فإنه يؤدي دورًا مهمًا في تكوّن الأوعية الدموية (تولّد الأوعية)، أي نمو الأوعية الدموية من أنسجة أوعية دموية موجودة مسبقًا.