الجذعية بالموجات فوق الصوتية عزل الخلايا

التجويف بالموجات فوق الصوتية هو طريقة آلية فعالة للغاية لعزل الخلايا الجذعية من الأنسجة الدهنية لجسم الإنسان.
بالموجات فوق الصوتية معزولة انسجة الوعائية جزء (SVF) تظهر إمكانات التجدد عالية للتطبيقات الطبية.
تقدم HIELSCHER الفوق خيارات مختلفة من صوتنة المباشر وغير المباشر لحصاد الخلايا الجذعية.

عزل بالموجات فوق الصوتية للخلايا الجذعية

من جسم الإنسان الأنسجة الدهنية المستخرجة (عن طريق شفط الدهون) يتم التعامل من قبل ultrasonication لإزالة الأنسجة من الخلايا الجذعية وخلايا النمو الأخرى. ويعرف هذا الجزء فصل الخلايا كما انسجة الوعائية خلايا جزء (SVF).
وتستند هذه التقنية العزلة بالموجات فوق الصوتية للخلايا الجذعية من الأنسجة الدهنية فقط على مبدأ العمل من التجويف بالموجات فوق الصوتية المشتقة، وهو القص الميكانيكية. قوات القص التجويف تعطيل الأنسجة الدهنية، بحيث يتم الإفراج عن الخلايا الجذعية من بنية الأنسجة الدهنية. والموجات فوق الصوتية عزل الخلايا الجذعية هي إجراء خالية من انزيم، وتجنب استخدام كولاجيناز، التربسين، أو dispase.
لفصل الخلايا الجذعية المستخرجة، والخلايا الجذعية الوسيطة والسلائف البطانية وغيرها من أنواع الخلايا النمو، ويتم طرد الأنسجة الدهنية sonicated.
يتم جمع الخلايا الجذعية فصل وتحليل لجودتها بما في ذلك عدد الخلايا، والسلامة، الذيفان الداخلي، وصمة عار غرام قبل استخدامها على الفور لزرع ذاتي أو يتم الاحتفاظ في البرد التخزين.

لماذا تجنب الانزيمات؟

منذ الهضم الأنزيمي لعزل الخلايا الجذعية وترافق مع ارتفاع التكاليف والمخاطر التي تهدد سلامة ممكنة وكذلك تفتقر إلى فعالية [Oberbauer وآخرون. 2015]، ويفضل أساليب العزلة غير الأنزيمية مثل التجويف بالموجات فوق الصوتية. الخطوة العزلة بالموجات فوق الصوتية تحل محل الهضم الأنزيمي عن طريق فصل الخلايا والمجاميع الخلية ميكانيكيا من الأنسجة الدهنية.

GDmini2 في محول UP200St-TD (200 واط)

مزايا صوتنة

سريعون
فعالة
قابلة للتكرار
آمنة
انزيم مجاني
فعاله من حيث التكلفه
خيارات عقيمة

التجويف بالموجات فوق الصوتية هو طريقة يمكن الاعتماد عليها لعزل الخلايا الجذعية من الأنسجة الدهنية الدهنية. © Oberbauer وآخرون. 2015

الخلايا الجذعية الدهنية المشتقة

وقف العائد خلية

نشرت طريقة العزلة SVF باستخدام العائد التجويف بالموجات فوق الصوتية في 1،67-2،24 × 10⁷ الخلايا التي لها مقومات البقاء ل97.1-98.9 ٪ [فيكتور ، s. ، 2014]. وقد تم الحصول علي غله الخلية من حوالي 2-4 مليون خلايا/غرام الانسجه الدهنية من قبل التحلل بالموجات فوق الصوتية للخلايا الشحمية ناضجه في الانسجه الدهنية المنفصلة [وآخرون مشرق., 2014].
أعد بالموجات فوق الصوتية خلايا تمتلك عالية على قدم المساواة مكون الشحم والمكونة للعظم إمكانية التمايز، مقارنة مع طريقة العزلة الأنزيمية قياسي [Oberbauer وآخرون. 2015].

أنظمة موجات فوق صوتية لعزل الخلايا الجذعية

لضمان أعلى سلامة وجودة أفضل، ومعدات الموجات فوق الصوتية يمكن الاعتماد عليها، والذي يسمح لمراقبة دقيقة على العلاج بالخلايا الجذعية، ويعتبر عاملا أساسيا لنجاح العلاج من المرضى. تقدم HIELSCHER الفوق خيارات مختلفة لعملية التجويف بالموجات فوق الصوتية ذاتي الفصل لعزل وساق الحصاد والخلايا البطانية السلائف.

صوتنة المباشر

لعملية عزل الخلايا الجذعية عن طريق صوتنة المباشر، ومغمورة القرن بالموجات فوق الصوتية (sonotrode، طرف بالموجات فوق الصوتية / التحقيق) في الأنسجة الدهنية الدهون. عبر sonotrode، تقترن موجات فوق الصوتية مباشرة إلى الدهون ذاتي بحيث التجويف بالموجات فوق الصوتية إصدارات الخلايا الجذعية وخلايا انسجة من الأنسجة المتبقية. معالجات بالموجات فوق الصوتية HIELSCHER Uf200 ः ر و UP200St مع sonotrode S26d14 تستخدم عادة أنظمة لعلاج الخلايا الجذعية ذاتي. العزلة صندوق التبرعات الخاص صوتنة المباشر هو في الغالب مناسبة للاستخدام في مرافق غرف الأبحاث.

صوتنة غير مباشر

منذ تستخدم الخلايا الجذعية لتطبيقات ذاتي، عقم العملية مهم جدا. لذلك، وضعت HIELSCHER عدة خيارات من صوتنة غير المباشرة مثل GDmini2، VialTweeter وغيرها من النظم حسب الطلب. صوتنة غير مباشر، تقترن موجات فوق الصوتية من خلال الحاوية جدار في الأنسجة الدهنية. وفصل جزء انسجة الوعائية (SVF) من الأنسجة الدهنية التي كتبها التجويف بالموجات فوق الصوتية وبنفس خلال صوتنة المباشر.
تقدم عملية صوتنة غير المباشرة ميزة لمعالجة الخلايا في وعاء مغلق تحت ظروف خالية من التلوث منذ خطر انتقال التلوث عن طريق إدراج القرن الموجات فوق الصوتية (sonotrode) هو القضاء. ويتم عزل الخلايا في نظام مغلق ضمان ظروف عملية عقيمة.

أجهزة الموجات فوق الصوتية الرقمية HIELSCHER يمكن أن تسيطر على وجه التحديد من خلال شاشة اللمس أو عنصر تحكم مستعرض. إجراءات صوتنة يمكن المحددة مسبقا عن طريق القائمة بديهية. تم تجهيز أجهزة الموجات فوق الصوتية مع تسجيل لبيانات التلقائي (يتم تخزين كافة البيانات بروسس صوتنة على متكاملة SD بطاقة). مدخلات الطاقة بالموجات فوق الصوتية يمكن تعديلها تماما مع بروتوكول العزلة الخلية.

مراجع الادب

Oberbauer, ايليني; [ستفينهاغن], [كارولين]; [ورزر], كريستوف; غابرييل ، كريستيان ؛ [ردل], [هينز]; وولبانك ، سوزان (2015): أنظمه العزل الانزيميه وغير الانزيميه للخلايا المستمدة من الانسجه الدهنية: الحالة الراهنة للفن. تجديد الخلايا (2015) 4:7.

حقائق تستحق العلم

الخلايا الجذعية

والخلايا الجذعية هي خلايا غير متمايزة من متعددة الخلايا التي لديها القدرة على إنتاج المزيد من الخلايا إلى أجل غير مسمى من نفس النوع. فهي تتميز القدرة الرائعة على التطور إلى العديد من أنواع مختلفة من الخلايا في الجسم أثناء حالة مبكرة من الحياة والنمو. وأبرز ما يميز الخلايا الجذعية هي قدرتها على تجديد نفسها من خلال انقسام الخلايا وقدرتها على التحول إلى خلايا نسيجيا أو جهاز معين مع وظائف خاصة. الخلايا الجذعية المحفزة لديها القدرة على التمايز إلى أي من الخلايا الجرثومية الثلاث: الأديم الباطن (بطانة المعدة الداخلية والجهاز الهضمي والرئتين)، الأديم المتوسط (العضلات والعظام والدم والبولية التناسلية)، أو الأديم الظاهر (أنسجة البشرة والجهاز العصبي).
في بعض الأجهزة، مثل القناة الهضمية ونخاع العظام والخلايا الجذعية تقسيم بانتظام لإصلاح واستبدال البالية أو التالفة الأنسجة. في الأجهزة الأخرى، مثل البنكرياس والقلب، والخلايا الجذعية يقسم إلا في ظل ظروف خاصة.
الوسيطة انسجة / الخلايا الجذعية (MSC)، التي توفر إمكانات عالية للتطبيقات العلاجية المتعددة في التجدد والطب aestethic، تم العثور على أساسا في نخاع العظام، ولكنها يمكن أن تكون معزولة عن الأنسجة الأخرى (مثل الغضاريف والدهون وخلايا العضلات)، جدا. وتعتبر الخلايا الجذعية الوسيطة كما الخلايا الجذعية البالغة نموذجية التي تتميز قدرتها على تجديد الذات.
وتستخدم الجذعية البحوث والعلاج بالخلايا لزراعة الأنسجة والأعضاء لأغراض الزرع (هندسة الأنسجة). المجالات الطبية الأخرى لتطبيق الخلايا الجذعية يمكن العثور عليها في علاج أمراض الدماغ (مثل الشلل الرعاش ومرض الزهايمر)، والعلاج نقص الخلايا وأمراض الدم (مثل سرطان الدم)، مشترك والغضاريف انحطاط (مثل التهاب المفاصل)، وكذلك العلاجات التجميلية (على سبيل المثال العلاجات المضادة للشيخوخة). بشكل عام، الخلايا الجذعية لديها حجم تقريبا. 15-25 ميكرون في القطر.
الخلايا الجذعية الوسيطة (MSC) هي خلايا متعددة القدرات اللحمية، التي لديها القدرة على التمايز إلى مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا، بما في ذلك الخلايا بانية العظم (خلايا العظام)، غضروفية (خلايا الغضروف)، myocytes (خلايا العضلات)، والخلايا الشحمية (خلايا الدهون).

انسجة الأوعية الدموية الكسر (SVF)

انسجة الأوعية الدموية الكسر (SVF) هو مكون من lipoaspirate التي يمكن استخراجها عن طريق شفط الدهون من الأنسجة الدهنية في الجسم البشري. تتكون lipoaspirate في خليط غير متجانس من الخلايا ويحتوي على نسبة عالية من الخلايا الجذعية، والمعروفة باسم الخلايا الدهنية المشتقة الجذعية (ASC أو ADSC)، والتي تظهر أوجه التشابه مع الخلايا الجذعية نخاع العظام، مثل قدرتها على التمايز إلى خلايا multilineage.
ويشمل السكان غير متجانسة من SVF الخلايا البطانية، الكريات الحمراء، الخلايا الليفية، الخلايا الليمفاوية، وحيدات / الضامة، وpericytes من بين أمور أخرى، فضلا عن جزء مهم من الخلايا الجذعية الدهنية المشتقة.

الخلايا اللحمية / الجذعية الدهنية المشتقة (ASC)

الخلايا السدوية المشتقة من الخلايا الدهنية (ASC / ADSC) تطلق مستويات عالية من عوامل النمو النشطة بيولوجيا مثل عامل نمو البشرة (EGF) ، عامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF) ، عامل نمو الخلايا الليفية الأساسي (bFGF) ، عامل نمو الخلايا الكيراتينية (KGF) ، عامل نمو plateletderived (PDGF) ، عامل نمو خلايا الكبد (HGF) ، تحويل عامل النمو بيتا (TGF-β) ، عامل نمو الأنسولين (IGF) ، والعامل العصبي المشتق من الدماغ (BDNF). لا تقوم ACS بإطلاق عوامل النمو فحسب ، بل تفرز أيضا السيتوكينات بما في ذلك ligand tyrosine kinase 3 (Flt-3) المرتبط بـ fms ، عامل تحفيز مستعمرة المحبب (G-CSF) ، عامل تحفيز مستعمرة بلعم المحببات (GM-CSF) ، البلاعم. - عامل تحفيز مستعمر (M-CSF) ، إنترلوكين (IL) مثل IL-6 ، IL-7 ، IL-8 ، IL-11 ، و IL-12 ، عامل تثبيط اللوكيميا (LIF) ، وعامل نخر الورم- alpha (TNF-α).

استخراج أنواع الخلايا الجذعية

يمكن استخراج الخلايا الجذعية للبالغين الذاتية من البشر من المصادر التالية:

نخاع العظم، الأمر الذي يتطلب استخراج من قبل الحصاد، وهذا هو، والحفر في العظام.
الأنسجة الدهنية (خلايا الدهن)، الأمر الذي يتطلب الاستخراج عن طريق شفط الدهون.
الدم، الأمر الذي يتطلب استخراج خلال فصل مكونات الدم، حيث الدم من المتبرع يمر عبر “غسيل الكلى” يتم إرجاع الجهاز حيث يتم استخراج الخلايا الجذعية في حين أن مكونات الدم الأخرى إلى الجهة المانحة.