Sonication yordamida teskari fazali bug'lanish usuli orqali lipozomalar
Liposomalar biologik muvofiqligi va gidrofil va hidrofobik dorilarni kapsulalash qobiliyati tufayli dori vositalarini etkazib berishda qo'llaniladigan ko'p qirrali nanotashuvchilardir. Teskari fazali bug'lanish usuli (shuningdek, emulsifikatsiya usuli yoki erituvchi-bug'lanish usuli sifatida ham tanilgan) lipozoma tayyorlashning mashhur usuli bo'lib, yuqori inkapsulyatsiya samaradorligini ta'minlaydi. Ushbu maqola prob tipi sonikatsiya yordamida kuchaytirilgan teskari fazali bug'lanish usuli orqali lipozomalarni tayyorlashga qaratilgan bo'lib, dori vositalarini etkazib berish tizimlarida protsessual qadamlar, foydalar va potentsial qo'llanilishini ta'kidlaydi.
Liposomalar bir yoki bir nechta lipidli ikki qatlamdan iborat bo'lgan vazikulyar tuzilmalar bo'lib, ular gidrofil va hidrofobik birikmalarni o'z ichiga oladi. Ularning noyob tuzilishi ularni maqsadli dori vositalarini yetkazib berish uchun ideal qiladi. Teskari fazali bug'lanish usuli (aka emulsifikatsiya yoki erituvchi-bug'lanish usuli) lipozoma tayyorlash uchun yaxshi tasdiqlangan usuldir. Keyingi paragraflarda biz sizni emulsifikatsiyani, kapsülleme samaradorligini va liposoma hajmini kamaytirishni yaxshilash uchun ma'lum bo'lgan zond tipidagi sonikatsiya yordamida teskari fazali bug'lanish usulining afzalliklari bilan tanishtiramiz.
Zond tipidagi sonikator UP400St lipozoma tayyorlash uchun
Teskari fazali bug'lanish usuli orqali lipozoma tayyorlash metodologiyasi
Sonikatsiya yordamida teskari bug'lanish usuli orqali lipozoma hosil bo'lishi lipidlarni xloroform va metanolning organik erituvchi aralashmasida (2: 1 v / v) eritishni o'z ichiga oladi, bu esa teskari mitsellalarning shakllanishiga yordam beradi. Keyin bu aralashmaga suvli tampon qo'shiladi. Kombinatsiyalangan eritma, masalan, UP400ST kabi zond tipidagi sonikator yordamida yog'dagi suv mikroemulsiyasini yaratish uchun sonikatsiya qilinadi. Keyin organik erituvchi aylanadigan evaporatator yordamida bug'lanadi, natijada yopishqoq jel hosil bo'ladi, natijada lipozomalar hosil bo'ladi. Mikroemulsiya pufakchalarining katta suvli yadrosi hidrofilik molekulalarning tutilishiga yordam beradi, bu esa nazorat ostida bo'shatish va yaxshi o'tkazuvchanlik profilini ko'rsatadigan liposomal jellarga olib keladi. Nihoyat, sonikator yordamida lipozomalar bir xil o'lchamga tushiriladi.
Sonikatsiya yordamida teskari bug'lanish usuli orqali lipozoma shakllanishi
Protokol / Bosqichma-bosqich ko'rsatmalar:
- Lipidlarni tortish va eritish:
Jami 40 mg L-a-fosfatidilxolin va xolesterinni 4:1 yoki 7:3 massa nisbatida aniq torting.
O‘lchangan lipidlarni 10 ml xloroform/metanol aralashmasida (4:1 v/v) pastki dumaloq kolbada eritiladi. - Lipid plyonka shakli:
Pastki dumaloq kolbani aylanuvchi evaporatatorga ulang.
Kolba devorlarida yupqa lipid plyonka hosil bo'lguncha vakuum sharoitida 40 ° C da 8 xg da aylantiring. - Solvent bug'larini olib tashlang:
Kolbani azot gazi bilan yuvish orqali erituvchi aralashmaning qolgan bug'larini evakuatsiya qiling. - Lipid plyonkasini qayta eritish:
Lipid plyonkasini teskari fazali pufakchalar hosil qilish uchun 10 ml dietil efirda qayta eritiladi. - Suvli fazani tayyorlang:
Kapsülleme uchun faol moddani o'z ichiga olgan 5 ml PBS buferini (0,1 M, pH 7,4) va 20 mg Tween 80 ni organik faza (erigan lipidlar bilan dietil efir) bilan aralashtiring. - Emulsiyani soniklash:
W/o emulsiyasini muzli hammomga joylashtiring.
26 kHz chastotada va 50% impuls rejimida (0,5 tsikl = 30 sek ON / 30 sek OFF) va 50% amplituda 1 daqiqa davomida prob tipidagi sonikator UP200Ht yordamida emulsiyani soniklashtiring. - Jel hosil qilish uchun bug'lang:
Soniklangan emulsiyani aylanuvchi evaporatatorga qaytaring.
Jel olinmaguncha atmosfera bosimi ostida 40 ° C da bug'lanadi. - Liposomalarni hosil qiladi:
Keyinchalik jelni bug'lang, uni yarim shaffof suyuqlikka aylantiring, bu lipozomalarning shakllanishini ko'rsatadi. - Yakuniy lipozoma suspenziyasi:
Liposoma suspenziyasiga yana 5 ml PBS buferi (0,1 M, pH 7,4) qo'shing.
Aralashmani muloyimlik bilan aylantiring.
Azot gazi yordamida dietil efirning qolgan bug'larini evakuatsiya qiling. - Saqlash:
Yakuniy lipozoma suspenziyasini 4°C da muzlatgichda talab qilinmaguncha saqlang.
Ushbu ko'rsatmalar ultratovushli homogenizatsiya bilan teskari fazali bug'lanish usulidan foydalangan holda lipozomalarni tayyorlashning bosqichma-bosqich jarayonini belgilaydi, bu yuqori ichki suvli yuklanishni va faol moddaning samarali inkapsulyatsiyasini ta'minlaydi.
Teskari fazali bug'lanish usuli, ayniqsa zond tipidagi sonikatsiyadan foydalangan holda, lipozomalarni tayyorlash uchun keng qo'llaniladigan usul, ayniqsa yuqori ichki suvli yuklanishni maqsad qilganda. Bu usul an'anaviy yupqa plyonkali hidratsiya usulidan afzalroqdir, chunki uning lipozomalar ichida ko'proq suvli fazani kiritish qobiliyati.
UIP2000hdT sanoat sonikatori katta hajmdagi lipozoma ishlab chiqarish uchun
Liposoma shakllanishi uchun prob-tipli sonikatsiyaning afzalliklari
- Kengaytirilgan bir xillik: Prob tipidagi sonikatsiya doimiy energiya kiritishni ta'minlaydi, natijada lipozomalarning bir xil o'lchamdagi taqsimlanishiga olib keladi.
- Yaxshilangan inkapsulyatsiya: Sonikatsiya paytida mexanik kuchlar, ayniqsa, hidrofilik birikmalar uchun dori inkapsulatsiyasini kuchaytiradi.
- Masshtablilik: Usullar osonlik bilan kengaytirilishi mumkin, bu ularni keng ko'lamli lipozoma ishlab chiqarish uchun mos qiladi.
Dori vositalarini etkazib berishda lipozomalarning qo'llanilishi
Prob tipidagi sonikatsiya bilan emulsifikatsiya va erituvchi-bug'lanish usullari orqali tayyorlangan lipozomalar turli xil dori vositalarini yuborish uchun javob beradi, jumladan:
- Maqsadli dori vositalarini yetkazib berish: Liposomalarning o'ziga xos ligandlar bilan funktsionalizatsiyasi ma'lum to'qimalar yoki hujayralarga maqsadli etkazib berish imkonini beradi.
- Boshqariladigan nashr: Ikki qatlamli lipid tuzilishi dori vositalarini nazorat ostida chiqarishga imkon beradi, bu esa terapevtik samaradorlikni oshiradi.
- Ko'p qirralilik: Ushbu usullar kichik molekulalardan oqsillar va nuklein kislotalar kabi kattaroq biomolekulalarga qadar keng ko'lamli terapevtik vositalarni o'z ichiga oladi.
Teskari fazali bug'lanish usuli, ayniqsa, yupqa plyonkali hidratsiya usuliga nisbatan yuqori ichki suvli yuklanishi bilan ajralib turadi. Bu xususiyat gidrofilik dorilar yoki boshqa terapevtik vositalarning katta inkapsulyatsiyasini talab qiladigan ilovalar uchun foydalidir.
Prob tipi sonikatsiya yordamida teskari fazali bug'lanish usuli lipozoma tayyorlash uchun mustahkam va samarali usuldir. Uning yuqori ichki suvli yuklanishga erishish qobiliyati uni farmatsevtika dasturlarida hidrofil moddalarni maksimal darajada qamrab olish juda muhim bo'lgan afzal usulga aylantiradi. Erituvchining bug'lanishini ehtiyotkorlik bilan nazorat qilish va sonikatsiyadan foydalanish ushbu usulning muvaffaqiyati uchun kalit bo'lib, turli xil terapevtik maqsadlar uchun mos bo'lgan yuqori sifatli lipozomalarni ishlab chiqarishga olib keladi.
Liposoma ishlab chiqarish uchun to'g'ri sonikatorni toping
Hielscher Ultrasonics samarali lipozoma ishlab chiqarish uchun prob-tipli sonikatorlarning keng assortimentini taklif etadi, bu esa bioaktiv molekulalarning yuqori tutilishi va yuqori yuklanish qobiliyatiga olib keladi.
Siz Hielscher sonikatorlaridan lipozomalarni tayyorlashning turli yo'llari uchun foydalanishingiz mumkin, masalan, bu erda tasvirlangan teskari fazali bug'lanish texnikasi, emulsifikatsiya usuli va yupqa plyonka usuli.
Yupqa plyonka usuli orqali ultratovushli lipozoma tayyorlash haqida ko'proq o'qing!
Ultrasonik tarzda tayyorlangan lipozomalarni inkapsulatsiya qilish haqida ko'proq o'qing
- yuqori samaradorlik
- eng zamonaviy texnologiya
- ishonchlilik & mustahkamlik
- sozlanishi, aniq jarayon nazorati
- partiya & mos ravishda
- har qanday hajm uchun
- aqlli dasturiy ta'minot
- aqlli xususiyatlar (masalan, dasturlashtiriladigan, ma'lumotlarni protokollash, masofadan boshqarish)
- oson va xavfsiz ishlash
- past texnik xizmat ko'rsatish
- CIP (joyida toza)
Dizayn, ishlab chiqarish va konsalting – Germaniyada ishlab chiqarilgan sifat
Hielscher ultrasonikatorlari eng yuqori sifat va dizayn standartlari bilan mashhur. Mustahkamlik va qulay foydalanish ultratovush qurilmalarimizni sanoat ob'ektlariga silliq integratsiya qilish imkonini beradi. Qo'pol sharoitlar va talabchan muhit Hielscher ultrasonikatorlari tomonidan osonlik bilan hal qilinadi.
Hielscher Ultrasonics ISO sertifikatiga ega kompaniya bo'lib, eng zamonaviy texnologiya va foydalanuvchilarga qulaylik bilan ajralib turadigan yuqori samarali ultratovush apparatlariga alohida e'tibor beradi. Albatta, Hielscher ultrasonikatorlari Idoralar talablariga javob beradi va UL, CSA va RoHs talablariga javob beradi.
Quyidagi jadvalda ultrasonikatorlarimizning taxminiy qayta ishlash quvvati ko'rsatilgan:
| To'plam hajmi | Oqim darajasi | Tavsiya etilgan qurilmalar |
|---|---|---|
| 0,5 dan 1,5 ml gacha | na | VialTweeter |
| 1 dan 500 ml gacha | 10 dan 200 ml / min | UP100H |
| 10 dan 2000 ml gacha | 20 dan 400 ml / min | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 dan 20 L gacha | 0.2 dan 4L/min gacha | UIP2000hdT |
| 10 dan 100 l gacha | 2 dan 10 l / min | UIP4000hdT |
| 15 dan 150 litrgacha | 3 dan 15 l / min | UIP6000hdT |
| 15 dan 150 litrgacha | 3 dan 15 l / min | UIP6000hdT |
| na | 10 dan 100 l / min | UIP16000 |
| na | kattaroq | ning klasteri UIP16000 |
Biz bilan bog'lanish! / Bizdan so'rang!
Hielscher Ultrasonics laboratoriya, uchuvchi va sanoat miqyosida ilovalar, dispersiya, emulsifikatsiya va ekstraktsiyani aralashtirish uchun yuqori samarali ultratovushli homogenizatorlarni ishlab chiqaradi.
Adabiyot / Adabiyotlar
- Marco Paini, Sean Ryan Daly, Bahar Aliakbarian, Ali Fathi, Elmira Arab Tehrany, Patrizia Perego, Fariba Dehghani, Peter Valtchev (2015): An efficient liposome based method for antioxidants encapsulation. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 136, 2015. 1067-1072.
- Yao, X., Bunt, C., Cornish, J., Quek, S.-Y. and Wen, J. (2014): Preparation, Optimization and Characterization of Bovine Lactoferrin-loaded Liposomes and Solid Lipid Particles Modified by Hydrophilic Polymers Using Factorial Design. Chemical Biology and Drug Design 83, 2014. 560-575.
- Seyedeh Parinaz Akhlaghi, Iris Renata Ribeiro, Ben J. Boyd, Watson Loh (2016): Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol-Pluronic® F127 cubosomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 145, 2016. 845-853.
Bilishga arziydigan faktlar
Liposomalar nima?
Liposomalar lipidli ikki qavatli sharsimon pufakchalar bo'lib, birikmalarni inkapsulyatsiya qilish uchun ishlatiladi. Ular tuzoqqa olinadigan birikmani o'z ichiga olgan eritmada tayyorlanadi. Oqsillar kabi hidrofilik birikmalar uchun suvli eritma ishlatiladi, hidrofobik molekulalar esa lipidlar bilan aralashtirilgan organik erituvchilardagi eritmalar yordamida inkapsullanadi. Ushbu ko'p qirrali lipozomalarni dori vositalarini etkazib berish va boshqa biomedikal ilovalar uchun qimmatli qiladi.
Liposoma tayyorlash uchun teskari fazali bug'lanish usuli nima?
Liposoma tayyorlash uchun teskari fazali bug'lanish usuli lipidlarni xloroform/metanol aralashmasida eritib, aylanma bug'lanish orqali yupqa lipid plyonka hosil qilishni o'z ichiga oladi. Keyin bu plyonka teskari fazali pufakchalarni hosil qilish uchun dietil efirda qayta eritiladi. Tarkibida faol moddalar va Tween 80 ni o'z ichiga olgan suvli faza organik faza bilan aralashtiriladi va yog'dagi suv emulsiyasini hosil qiladi. Emulsiya zond tipidagi sonikator yordamida sonikatsiyalanadi, so'ngra qo'shimcha bug'lanish natijasida lipozomalarni hosil qiluvchi jel hosil qilish uchun keyingi aylanadigan bug'lanish amalga oshiriladi. Yakuniy suspenziya PBS buferini qo'shish va qoldiq erituvchilarni azot gazi bilan olib tashlash bilan yakunlanadi, natijada 4 ° C da saqlanadigan lipozomalar paydo bo'ladi.
Sonikatsiyaning lipozomalarga ta'siri qanday?
Ultrasonik to'lqinlar lipid va suvli fazalarni buzish va aralashtirish uchun ultratovush to'lqinlari yordamida lipozomalarga ta'sir qiladi, bu esa bir hil dispersiya shakllanishiga yordam beradi. Bu jarayon lipozomalarning hajmi va bir xilligini nazorat qilishga yordam beradi va vaqti-vaqti bilan energiya portlashlariga yo'l qo'yib, haddan tashqari qizib ketishning oldini oladi. Sonikatsiya natijasida yuzaga kelgan boshqariladigan kavitatsiya lipozomalar ichidagi faol moddalarning samarali inkapsulyatsiyasini ta'minlaydi.
Liposomalarda faza o'tishi nima?
Liposomalarning fazali o'tishi lipidning fizik holatining harorat ta'sirida o'zgarishini anglatadi. Fazaga o'tish harorati - bu lipidlarning uglevodorod zanjirlari to'liq cho'zilgan va zich joylashgan bo'lgan tartiblangan gel fazasidan tartibsiz suyuq kristalli fazaga o'tadigan o'ziga xos harorat, bu erda uglevodorod zanjirlari tasodifiy yo'naltirilgan va suyuqlikka aylanadi. Ushbu o'tish lipozoma barqarorligiga, o'tkazuvchanligiga va kapsulalangan moddalar bilan o'zaro ta'sir qiladi.
Liposoma tayyorlashning ekstruziya usuli nima?
Ba'zan, yupqa plyonkali hidratsiya usuli ekstruziya usuli deb ham ataladi, chunki yupqa plyonkali hidratsiya bosqichidan keyin ekstruziya bosqichi amalga oshiriladi. Ekstruziya paytida bir hil kichik lipozomalarni olish uchun lipozomalar polikarbonat membranalari orqali chiqariladi. Ekstruziyaga muqobil ravishda lipozomalar ko'pincha sonikatsiya orqali kamayadi.
Liposomalarning sonikatsiya usuli nima?
Sonikatsiya turli xil lipozomalarni shakllantirish usullarida qo'llaniladi. Sonikatsiya lipidlar va erituvchilarni emulsifikatsiya qilish, lipid plyonkalarini regidratsiya qilish va lipozomani kamaytirish uchun qo'llaniladi. Teskari fazali bug'lanish usuli uchun lipidlar ultratovushli suvli faza bilan emulsiyalanadi. Yupqa plyonka usuli uchun quritilgan lipid plyonkasi ko'p qatlamli pufakchali suspenziyani yaratish uchun sonikator yordamida regidratlanadi. Ko'p lipozomalarni tayyorlash texnikasi hosil bo'lgan lipozomalarni keyinchalik kamaytirish uchun sonikatsiyadan foydalanadi. Bu erda sonikatsiya natijasida turli xil ilovalar uchun mos keladigan bir xil kichik va barqaror lipozomalar paydo bo'ladi.
Hielscher Ultrasonics kompaniyasi yuqori samarali ultratovushli homogenizatorlarni ishlab chiqaradi laboratoriya uchun sanoat hajmi.