Cellavlossning med ultraljud

Cellavlossning med ultraljud är en mycket effektiv och tillförlitlig provberedningsteknik som används inom olika områden av cellbiologi och bioteknik. Med hjälp av ultraljudsvågor lossar ultraljudsbehandlaren UIP400MTP för flerbrunnsplattor adherenta celler från odlingsytor och bereder cellsuspensioner för efterföljande tillämpningar. Ultraljudsbehandling erbjuder flera fördelar jämfört med traditionella enzymatiska, kemiska och mekaniska avlossningstekniker, vilket gör den till ett värdefullt verktyg för forskare.

Principen för cellavlossning med ultraljud

Cellavlossning med ultraljud bygger på användning av högintensivt ultraljud för att bryta interaktionerna mellan celler och det substrat som de är fästa vid. Ultraljudsvågor genererar mikrobubblor, akustisk kavitation och vibrationer i odlingsmediet, vilket skapar mekaniska krafter som skonsamt men effektivt lossar cellerna. Denna process utförs vanligtvis med den beröringsfria ultraljudsbehandlaren UIP400MTP för flerbrunnsplattor.

Nedan finns ett exempel på en instruktion för cellavlossning med ultraljudsbehandlaren UIP400MTP för flerbrunnsplattor.
 

Utrustning och material för cellavlossning med ultraljud

• Beröringsfri ultraljudsbehandlare UIP400MTP för flerbrunnsplattor: Denna ultraljudsbehandlare med hög provgenomströmning är det centrala verktyget. Ultraljudsbehandlaren UIP400MTP för plattor är lämplig för alla flerbrunnsplattor och mikrotiterplattor av standardtyp samt för petriskålar. Ultraljudsvågor tillför den mekaniska energi som behövs för cellavlossning.
• Cellodlingsplattor eller petriskål: Standardkärl som används för att odla adherenta cellkulturer.
• Odlingsmedium: Det flytande medium i vilket celler odlas och hålls vid liv.
• Steril PBS (fosfatbuffrad saltlösning): Används för att tvätta cellerna före avlossning.
• Uppsamlingsrör: För uppsamling av suspensionen med lossade celler.

Protokoll för avlossning med ultraljud med hjälp av ultraljudsbehandlaren UIP400MTP för plattor

1. Förberedelse
   – Säkerställ att all utrustning är ren och steril för att förhindra kontaminering.
   – Förvärm odlingsmediet och PBS till lämplig temperatur (vanligtvis 37°C).
2. Celltvätt
   – Aspirera odlingsmediet från cellodlingsflaskan eller plattan.
   – Tvätta cellerna försiktigt med steril PBS för att avlägsna eventuella rester av medium och lossade celler.
3. Ultraljudsbehandling
   – Tillsätt en liten volym PBS eller färskt odlingsmedium till flaskan eller plattan så att cellmonolagret täcks.
   – Placera petriskålen eller plattan i ultraljudsbehandlaren UIP400MTP.
   – Ultraljudsbehandla under en angiven tid, vanligtvis från några sekunder till några minuter, beroende på celltyp och hur starkt cellerna är fästa.
4. Uppsamling av cellsuspension
   – Observera cellerna i mikroskop efter ultraljudsbehandlingen för att säkerställa att de har lossnat.
   – Pipettera cellsuspensionen försiktigt för att samla upp de lossade cellerna.
   – Överför suspensionen till ett uppsamlingsrör.
5. Bearbetning efter cellavlossning
   – Centrifugera cellsuspensionen vid behov för att koncentrera cellerna.
   – Resuspendera cellerna i färskt odlingsmedium eller buffert för efterföljande tillämpningar.

Anmärkningar: Parametrarna (såsom ultraljudsbehandlingens varaktighet och intensitet) behöver optimeras för olika celltyper för att undvika cellskador. Vissa ömtåliga celltyper kan vara känsligare för ultraljudsbehandling, vilket kräver noggrann optimering.

Praktiska tillämpningar av cellavlossning med ultraljud

Cellavlossning med ultraljud används i olika forskningssammanhang och kliniska sammanhang:

1. Flödescytometri: Beredning av encellssuspensioner för analys.
2. Cellräkning och viabilitetsanalyser: Lossning av celler för noggrann räkning och bedömning av viabilitet.
3. Subkultivering: Överföring av celler från ett odlingskärl till ett annat.
4. Molekylärbiologiska experiment: Isolering av celler för extraktion av DNA, RNA och proteiner.

Läs här hur ultraljudsapparaten UIP400MTP för 96-brunnsplattor används för att lossa biofilm i biofilmsanalyser såsom ASTM E2799-protokollet!

Varför bör jag ersätta cellskrapning med cellavlossning med ultraljudsapparaten UIP400MTP för mikroplattor?

Att ersätta cellskrapning med cellavlossning med ultraljudsapparaten UIP400MTP för mikroplattor ger forskare flera fördelar. Till skillnad från manuell skrapning säkerställer den exakt kontrollerbara ultraljudsbehandlingen med UIP400MTP en enhetlig och skonsam cellavlossning, vilket minimerar mekaniska skador och bevarar cellernas viabilitet. UIP400MTP ger exakt kontroll över ultraljudsbehandlingens parametrar, vilket möjliggör en enhetlig behandling i alla brunnar och eliminerar variationer mellan prover. Denna metod är snabbare, effektivare och skalbar, vilket gör den idealisk för tillämpningar med hög provgenomströmning samtidigt som reproducerbarheten och integriteten hos känsliga cellkulturer bibehålls. Här hittar du den jämförande studien!