Ultraljud cell avskiljning

Ultraljudscellavskiljning är en mycket effektiv och pålitlig provberedningsteknik som används inom olika områden av cellbiologi och bioteknik. Med hjälp av ultraljudsvågor lossar multi-well plate sonicator UIP400MTP vidhäftande celler från odlingsytor och förbereder cellsuspensioner för nedströmsapplikationer. Ultraljudsbehandling erbjuder flera fördelar jämfört med traditionella enzymatiska, kemiska och mekaniska avskiljningstekniker, vilket gör det till ett värdefullt verktyg för forskare.

Principen för ultraljud cellavskiljning

Ultraljudscellavskiljning bygger på användning av kraftultraljud för att störa interaktionerna mellan celler och substratet de är fästa vid. Ultraljudsvågor genererar mikrobubblor, akustisk kavitation och vibrationer i odlingsmediet, vilket producerar mekaniska krafter som försiktigt men effektivt lossar cellerna. Denna process utförs vanligtvis med hjälp av den beröringsfria sonikatorn UIP400MTP för flerbrunnsplattor.

Nedan hittar du en exemplifierande instruktion för cellavskiljning med hjälp av multi-well plate sonicator UIP400MTP.
 

Utrustning och material för avskiljning av ultraljudsceller

• Beröringsfri sonikator för flera brunnsplattor UIP400MTP: Denna ultraljudsapparat med hög genomströmning är det viktigaste verktyget. Plattans sonikator UIP400MTP är lämplig för alla vanliga multibrunnar och mikrotiterplattor samt för Petri-rätter. Ultraljudsvågor ger den nödvändiga mekaniska energin för cellavlossning.
• Cellodlingsplattor eller petriskål: Standardkärl som används för att odla vidhäftande cellkulturer.
• Kultur Medium: Det flytande medium i vilket celler odlas och underhålls.
• Steril PBS (fosfatbuffrad koksaltlösning): Används för att tvätta celler innan de lossnar.
• Insamling Rör: För uppsamling av den lossnade cellsuspensionen.

Protokoll för ultraljudsavskiljning med hjälp av Plate Sonicator UIP400MTP

1. Förberedelse
   – Se till att all utrustning är ren och steril för att förhindra kontaminering.
   – Förvärm odlingsmediet och PBS till lämplig temperatur (vanligtvis 37°C).
2. Tvätt av celler
   – Aspirera odlingsmediet från cellodlingskolven eller plattan.
   – Tvätta försiktigt cellerna med steril PBS för att avlägsna eventuellt kvarvarande medium och lossnade celler.
3. ultraljudsbehandling
   – Tillsätt en liten volym PBS eller färskt odlingsmedium till kolven eller plattan för att täcka cellmonolagret.
   – Placera petriskålen eller petriskålen i UIP400MTP ultraljudsfilter.
   – Ultraljudsbehandling under en viss tid, vanligtvis från några sekunder till några minuter, beroende på celltyp och styrkan i fästet.
4. Insamling av cellsuspension
   – Efter ultraljudsbehandling, observera cellerna under ett mikroskop för att säkerställa lossning.
   – Pipettera försiktigt cellsuspensionen för att samla upp de lossnade cellerna.
   – Överför suspensionen till ett uppsamlingsrör.
5. Bearbetning efter avskiljning
   – Centrifugera cellsuspensionen vid behov för att koncentrera cellerna.
   – Återsuspendera cellerna i ett färskt odlingsmedium eller en buffert för tillämpningar nedströms.

Anteckningar: Parametrarna (såsom ultraljudsbehandling tid och intensitet) måste optimeras för olika celltyper för att undvika cellskador. Vissa känsliga celltyper kan vara mer känsliga för ultraljudsbehandling, vilket kräver noggrann optimering.

Praktiska tillämpningar av ultraljud cellavskiljning

Ultraljudscellavskiljning används i olika forsknings- och kliniska miljöer:

1. Flödescytometri: Förberedelse av encellssuspensioner för analys.
2. Cellräkning och viabilitetsanalyser: Fristående celler för noggrann räkning och lönsamhetsbedömningar.
3. Subkultur: Överföring av celler från ett odlingskärl till ett annat.
4. Molekylärbiologiska experiment: Isolera celler för DNA-, RNA- och proteinextraktion.

Läs här hur den UIP400MTP 96-brunnars plattsonikatorn används för att lossa biofilm i biofilmsanalyser som ASTM E2799-protokollet!

Varför ska jag ersätta Cell Scraping med Cell Detachment med UIP400MTP Microplate Sonciator?

Att ersätta cellskrapning med cellavskiljning med hjälp av den UIP400MTP mikroplattans ultraljudsapparat ger forskare flera fördelar. Till skillnad från manuell skrapning, den exakt kontrollerbara ultraljudsbehandling med UIP400MTP säkerställer konsekvent och skonsam cellavskiljning, minimerar mekanisk skada och bevarar cellens livskraft. Den UIP400MTP ger exakt kontroll över ultraljudsbehandlingsparametrar, vilket möjliggör enhetlig behandling över alla brunnar och eliminerar variabilitet mellan prover. Denna metod är snabbare, mer effektiv och skalbar, vilket gör den idealisk för applikationer med hög genomströmning samtidigt som reproducerbarheten och integriteten hos känsliga cellkulturer bibehålls. Här hittar du den jämförande studien!