α-synukleinfibriller och band fragmenteras i vetenskaplig forskning för att generera mindre fibrillfragment eller till och med enskilda proteinmolekyler, som lättare kan analyseras med hjälp av olika experimentella tekniker. VialTweeter Sonicator är en av de vanligaste ultrasonicators för effektiv och pålitlig alfa-synuklein fragmentering.

α-synuklein i forskning

Alfa-synukleinfibriller är proteinaggregat som är starkt associerade med neurodegenerativa sjukdomar som Parkinsons sjukdom och vissa former av demens, inklusive demens med Lewy-kroppar. Forskning inriktad på alfa-synukleinfibriller syftar till att förstå deras roll i sjukdomsprogression och utveckla potentiella terapeutiska ingrepp. Genom att bryta ner alfa-synukleinfibriller i mindre fragment kan forskare undersöka deras specifika strukturella egenskaper. Till exempel gör fragmentering av alfa-synukleinfibriller det möjligt för forskare att undersöka deras interaktioner med andra molekyler, såsom proteiner, lipider eller små molekyler. Genom att producera mindre fragment kan bindningsställena och affiniteten för dessa interagerande partners undersökas mer effektivt. Mindre α-Syn fribriller och band kan också visa förändrad toxicitet och biokemiska effekter. Därför är en tillförlitlig och effektiv fragmenteringsteknik, som ger reproducerbara resultat i en snabb och enkel provbehandling, avgörande.
Ultraljud alfa-syn fragmentering: VialTweeter sonicator är den etablerade ultraljud prov prep system som sonicates upp till 10 injektionsflaskor samtidigt under exakt samma förhållanden. Programmerbara inställningar möjliggör enkel och snabb omkörning av samma experiment, vilket ger mycket tillförlitliga och reproducerbara resultat vid alfa-synukleinfibrillfragmentering.

α-synuklein provberedning med en ultraljudsbehandling

Ett sätt att studera alfa-synukleinfibriller innebär deras extraktion och fragmentering med hjälp av tekniker som ultraljudsbehandling. Ultraljudsbehandling är en process som använder högintensiva, lågfrekventa ultraljudsvågor för att störa och bryta ner proteinaggregat, vilket leder till frisättning av mindre fibriller eller enskilda proteinmolekyler. Den sonicator VialTweeter är en vanligt förekommande enhet i α-synuklein-relaterade forskningsstudier för detta ändamål.

Många forskningsstudier beskriver exakta provberedningsprotokoll av alfa-synuklein fibriller ultraljudsbehandling, som använder Hielscher VialTweeter för effektiv och tillförlitlig α-synuklein fibrillfragmentering. Genom att fragmentera fibrillerna ultraljud kan forskare analysera de resulterande produkterna och undersöka deras struktur, toxicitet och interaktioner med andra molekyler. Denna forskning ger viktiga insikter i mekanismerna bakom neurodegeneration och potentiellt identifiera nya terapeutiska mål. Den väletablerade α-synuclein ultraljudsbehandling protokoll med hjälp av VialTweeter sonicator möjliggör tillförlitliga och reproducerbara resultat.

Övre bilder: ofragmenterade alfa-synukleinfibriller
Lägre bilder: Ultraljud fragmenterade alfa-synuklein fibriller med VialTweeter sonicator
(studie och bilder: ©Dieriks et al., 2022)

Ultraljud fragmentering av α-synukleinfibriller – protokoll

Eftersom många forskare använder VialTweeter sonicator som föredragen fragmenteringsteknik för att producera enhetliga α-synuklein fibrillfragment, etablerade protokoll är lätt tillgängliga. Nedan hittar du några exempel på fragmenteringsprotokoll.
 

 
ClearTau fröberedning: ClearTau-fibrillerna späddes till 10 μM i dH2O och sonicated vid 70% amplitud för 50 s med 1 s ON 1 s OFF cykel in-tube med hjälp av sonicator UP200St med VialTweeter. Frön kännetecknades av elektronmikroskopi.
ThS fluorescensmätning: ClearTau-fibrillerna späddes till 2,5 μM i dH2O och sonikerades vid 70 % amplitud i 50 s med 1 s ON 1 s OFF-cykel i röret med UP200St med VialTweeter. 2,5 μM Tau 4R2N-monomer i full längd användes som kontroll. Till 100 μl-reaktionen tillsattes 100 μl ThS (10 μM), vilket gav slutliga proteinkoncentrationer på 1,25 μM. Engångspunkt ThS-fluorescens mättes med 96 väl klara bottenplattor uppställda i FLUOstar Omega mikroplattläsare med excitation vid 445 nm och emission vid 485 nm registrerades.
(jfr Limorenko et al., 2023)
 
Enhetlig α-synukleinlängd med ultraljudsbehandling: Längden heterogenitet av α-syn fibriller och band reducerades genom ultraljudsbehandling för 20 min på is i 2-ml Eppendorf rör i en VialTweeter inställd på 75% amplitud, 0,5 s pulser.
(jfr Bousset et al., 2013)
 
Kvalitetskontrollen av humana rekombinanta monomera WT eller S129A a-Syn och de fibrillära polymorfer de genererar samt a-Syn 1–110 utfördes. Därefter fragmenterades de fibrillära polymorferna genom ultraljudsbehandling i 20 minuter i 2-ml Eppendorf-rör i VialTweeter ultrasonicator för att generera fibrillära partiklar med en genomsnittlig storlek på 42–52 nm som är lämpliga för endocytos.
(jfr Shrivastava et al., 2020)
 

Karakterisering av fem fibrillära α-Syn polymorfer. (A) Transmissionselektronmikrografer av negativt färgade α-Syn fibrillära polymorfer fibriller, band, fibriller-91, fibriller-65 och fibriller-110 före (övre körfält) och efter fragmentering med VialTweeter (nedre körfält) visas. (B) Längdfördelningen för de fragmenterade fibrillära polymorferna visas. Antalet (n) fibrillära sammansättningar histogrammen härleddes från anges.
(studie och bilder: Shrivastava et al., 2020)

 
α-Syn-fibrillerna fragmenterades genom ultraljudsbehandling i 20 minuter i 2 ml Eppendorf-rör i en VialTweeter för att generera fibrillära partiklar med en genomsnittlig storlek 42–52 nm enligt TEM-analys.
(jfr Negrini et al., 2022)
 
De återsuspenderade fibrillerna91 (i PBS) fragmenterades före tillsats till cellkulturer genom ultraljudsbehandling i 20 min i 2 ml Eppendorf-rör med hjälp av Vial Tweeter sonicator, alikvoterade, blixtfrysta i flytande kväve och lagras tills användning vid -80 ̊C.
(jfr Vajhøj et al., 2021)
 

VialTweeter och Lab Sonicators för α-Syn fragmentering

Hielscher Ultrasonics är världsomspännande erkänd som ledande tillverkare av banbrytande ultrasonicators. Betrodda och etablerade i stora forskningslaboratorier över hela världen, erbjuder våra ultrasonicators oöverträffad kvalitet och prestanda för dina kritiska experiment.
Med Hielscher VialTweeter och alla andra Hielscher sonicator, kommer du att uppleva oöverträffad användarkomfort, eftersom de är genomtänkt konstruerade för reproducerbara resultat, användarvänlighet och sömlös drift. Med automatiska datainspelningsfunktioner kan du fokusera på din forskning medan våra ultrasonicators noggrant registrerar viktiga data för reproducerbarhet och precision.
Uppnå konsekventa och reproducerbara resultat med tillförsikt!
Våra ultraljudsapparater är konstruerade och tillverkade i Tyskland. Tysk precision och högsta tekniska kvalitet för att säkerställa tillförlitlig och noggrann provberedning sådan alfa-synukleinfibrillfragmentering varje gång. Inga fler bekymmer om inkonsekventa resultat - vår ultraljudsteknik säkerställer att din forskning förblir i framkant av vetenskapliga framsteg.
Men det är inte allt! Vårt engagemang för excellens sträcker sig bortom våra produkter. Vi är stolta över vår exceptionella kundservice och ger expertstöd för att ta itu med eventuella frågor eller problem du kan ha. Vårt dedikerade team är här för att hjälpa dig i varje steg av din forskningsresa, så att du får ut det mesta av våra ultraljudsapparater.
Välj innovation, tillförlitlighet och exceptionell användarupplevelse - välj våra laboratorieljudapparater som VialTweeter för alfa-synukleinfibrillfragmentering. Dra nytta av de redan etablerade protokollen och gå med i raden av ledande forskare som litar på vår teknik för sina kritiska studier. Lyft din forskning och utforska nya gränser inom demens och neurodegenerativ sjukdomsforskning med våra toppmoderna ultrasonicators.

Design, tillverkning och rådgivning – Kvalitet tillverkad i Tyskland

Hielscher ultrasonicators är kända för sina högsta kvalitets- och designstandarder. Robusthet och enkel användning möjliggör smidig integration av våra ultrasonicators i industrianläggningar. Tuffa förhållanden och krävande miljöer hanteras enkelt av Hielscher ultrasonicators.

Hielscher Ultrasonics är ett ISO-certifierat företag och lägger särskild vikt vid högpresterande ultrasonicators med state-of-the-art teknik och användarvänlighet. Självklart, Hielscher sonicators är CE-kompatibla och uppfyller kraven i UL, CSA och RoHs.
 
Tabellen nedan ger dig en indikation på den ungefärliga bearbetningskapaciteten hos våra ultrasonicators i laboratoriestorlek: