Ултразвучна припрема узорака за ТХЦ анализу
- Ултразвучна екстракција је доказана метода за производњу ТХЦ-а, али се може користити и у аналитичке сврхе.
- Ултразвук је уобичајена метода припреме узорка која се користи за анализу укупног садржаја ТХЦ-а у производима од канабиса.
- Ултразвучна екстракција се примењује на узорке пре ТЛЦ, ГЦ и ХПЛЦ анализе.
Ултразвучна екстракција ТХЦ-а
ТХЦ, или тетрахидроканабинол (делта-9-тетрахидроканабинол), је хемикалија која изазива већину психолошких ефеката марихуане. За врсту канабиса познато је више од 400 различитих сојева. У зависности од специфичног соја канабиса, канабис може имати само 0,3 теж% ТХЦ-а. У другим сојевима садржај ТХЦ-а може достићи и до 20 теж.%.
Такође различити производи од канабиса значајно варирају: Тако се креће просечна концентрација ТХЦ-а у марихуани између 1 и 5%; у хашишу, садржај ТХЦ-а је између 5 и 15%, ау уљу хашиша је у просеку 20%. ТХЦ у рекреативним дозама марихуане је веома варијабилан и што је нижи садржај ТХЦ-а у марихуани, корисник мора више да конзумира да би осетио жељене ефекте.
Ултразвучна припрема узорка се користи за анализу садржаја ТХЦ-а
- за контролу квалитета рекреативних ТХЦ производа,
- за одређивање квалитета фармацеутских ТХЦ производа,
- за разликовање медикаментне конопље и влакнасте конопље.
За ТХЦ анализу обично се користе следеће хроматографске методе: хроматографија танког слоја (ТЛЦ), гасна хроматографија (ГЦ) и течна хроматографија високих перформанси (ХПЛЦ)
Протокол за припрему ултразвучног узорка за ТЛЦ анализу
Припрема узорака: За припрему узорака, осушени биљни материјал мора бити мацериран и самлевен у хомогени прах. За ултразвучну екстракцију, 500 мг праха биљке канабис и 5 мЛ мешавине метанол-хлороформ (однос 9 : 1) се помешају у бочици. Соникација се може применити помоћу ултрасоницатор са микро врхом, ВиалТвеетер или ултразвучни цупхорн. Време соникације траје прибл. 5 мин. Након тога оставите узорак да одстоји најмање 5 минута. Разблажити бистри супернатант са смешом за екстракцију (в/в: 1 : 10). Слободни ТХЦ: 1 μЛ на ТЛЦ плочи
Декарбоксилација: 100 μЛ екстракта је упарено до сува. Остатак се загрева на 180℃ 4 мин. Додати 500 μЛ метанол-хлороформа (в/в 9 : 1). Соницирајте 5 мин. Разблажите бистри супернатант са смешом за екстракцију (в/в: 1 : 10).
Калибрација: 20нг, 60нг, 100нг, 140нг
ХПТЛЦ:
ТЛЦ силика гел Ф-254, Мерцк 5729
ТЛЦ скенер ИИ, софтвер ЦАТС3, Цамаг Муттенз Елуенс:
Етилацетат : Толуол : Хлороформ = 3 : 17 : 0,25 (в/в/в)
Постхроматографска дериватизација: брза плава со 0,1% у 0,1 М НаОХ
Денситометрија на 550 нм
Тетрахидроканабинол (Δ9-ТХЦ) за анализу и екстракцију
Протокол за припрему ултразвучног узорка за ГЦ анализу
Припрема узорка: Осушени биљни материјал се мацерира и меље у хомогени прах. За екстракцију, 500 мг праха биљке канабиса и 10 мЛ мешавине метанола и хексана (однос 9 : 1) се помешају у бочици. Соникација се може применити помоћу а ултразвучни уређај типа сонде са микро врхом, ВиалТвеетер или ултразвучни цупхорн. Соникирајте узорак 15-20 мин. Протресите узорак и оставите да одстоји најмање 5 минута. Разблажити бистри супернатант са смешом за екстракцију (в/в 1:20).
Декарбоксилијација: у уметку
Температура ињектора 250℃
Калибрација: 5 нг/μЛ до 250 нг/μЛ
ГЦ: ХП 6890 са 5973 МСД и 7683 аутосамплер ињекцијом: 1μЛ, време без поделе: 2 мин.
Колона: ХП-5 МС, 30м, пречник 250 μм, дебљина филма 0,25 μм
Гас носач: Хе, 35 пси, константан проток: 4 мЛ/мин.
Рерна: 100℃ за 1 мин.; повећање температуре од 15℃ /мин. до 280 ℃; 280 ℃ 5 мин. МСД: СКЕНИРАЊЕ: м/е 35 – 550
Протокол за припрему ултразвучног узорка за ХПЛЦ анализу
Припрема узорка (аналогно ГЦ преп): Осушени биљни материјал се мацерира и меље у хомогени прах. За екстракцију, 500 мг праха биљке канабиса и 10 мЛ мешавине метанола и хексана (однос 9 : 1) се помешају у бочици. Соникација се може применити помоћу а ултрасоникатор типа сонде са микро врхом, ВиалТвеетер или ултразвучни цупхорн. Соникирајте узорак 15-20 мин. Протресите узорак и оставите да одстоји најмање 5 минута. Разблажити бистри супернатант са смешом за екстракцију (в/в 1:20).
ВиалТвеетер за ултразвучну припрему узорка
Предколона: ЛиЦхроспхер 60, РП-Селецт Б, 5μм (Мерцк 50963)
Колона: ЛиЦхроЦарт 125-4, Лицхроспхер 60, РП-Селецт Б, 5 μм (Мерцк 50829)
Елуент: изократични 36% ТЕАП 25 ммол/Л, 64% ацетонитрил квантификација на 210нм
Калибрација: 0,001 – 0,10 μг/μЛ
Калибрација: 0,01 – 0,50 μг/μЛ
Време задржавања: за ЦБД: 6,2 мин.; за ЦБН: 8,0 мин.; за ТХЦ: 9,4 мин.; за ТХЦ-А: 11,0 мин
ЛОД: ЦБД 0,5%, ЦБН 0,5%, ТХЦ 0,15%, ТХЦ-А 1%
УП200Ст са микро врхом за соникацију узорка
Литература/Референце
- Вернер Бернхард, Франзиска Пенитсцхка, Алаин Броиллет, Присма Регенсцхеит (2006): Форенсисцх цхемисцхе Аналисен вон ТХЦ халтигем Ханфкраут. Вон дер ДЦ преко ГЦ зур ХПЛЦ-метода. Апплица 2006.
Чињенице које вреди знати
марихуана састоји се од осушеног цвећа и потпорних листова и стабљика женске биљке канабиса. Ово је најшире конзумиран облик и садржи прибл. 3% до 20% ТХЦ-а. Специфични, високо узгојени облици марихуане достижу садржај ТХЦ-а већи од 30%. Марихуана је изворни материјал свих других врста производа од канабиса који садрже ТХЦ. Да би се најзаступљенији канабиноид, тетрахидроканабинолна киселина (ТХЦА), претворио у психоактивни ТХЦ, мора се покренути процес декарбоилације. Стога, канабис и њени екстракти морају бити загрејани или дехидрирани да би изазвали декарбоксилацију.
киеф односи се на прах, богат трихомима, који је просејан из листова и цветова канабиса. Конзумира се или у облику праха или компримује и користи се у колачима од хашиша.
хашиш или хашиш је концентрована погача или кугла од смоле која се производи или од пресованог кора или од смоле која се струже са површине биљке и ваља у куглице. Јавља се у различитим бојама од црне до златно браон у зависности од чистоће и извора. Може се конзумирати орално или пушити, нпр. у лули, наргили, бонгу, бубблеру, испаривачу, помоћу врућег ножа, пушити у џоинтима, помешати са пупољцима канабиса или дуваном, пушити као токе за флашу или користити као састојак у храни.
тинктура канабиса односи се на екстракт канабиноида у алкохолу. Канабиноиди се екстрахују из биљке канабиса коришћењем јаких алкохолних пића (углавном алкохола од житарица) за прављење тинктуре.
хашиш уље је смоласта матрица канабиноида произведена екстракцијом растварачем, формирана у стврднуту или вискозну масу. Хаш уље је један од најмоћнијих производа од канабиса због високог нивоа психоактивног једињења. Употреба хаш уља екстрахованог у бутану и суперкритичном угљен-диоксиду у последње време добија све већу популарност.
Инфузије односе се на различите врсте инфузија канабиса које се међусобно разликују по великом броју неиспарљивих растварача који се могу користити за производњу инфузије канабиса. За припрему такве инфузије, биљна материја канабиса се помеша са растварачем, а затим се пресује и филтрира да би се уља из биљке пренела у растварач. Какао путер, млечни путер, уље за кување, глицерин и хидратантна средства за кожу су обично коришћени растварачи.
медицинска марихуана односи се на употребу биљке канабиса као биљне терапије коју препоручује лекар, као и синтетичког ТХЦ-а и канабиноида. Ова употреба генерално захтева рецепт, а дистрибуција се обично врши у оквиру дефинисаним локалним законима. Неколико истраживачких студија је показало да употреба канабиса или његових деривата делује против нпр. мучнине и повраћања изазване хемотерапијом, неуропатског бола и мултипле склерозе.