Ultrazvučno vađenje hladne vode Psilocibina

Izolacija psilocibina od svežih i sušenih magičnih pečuraka, npr. psilocibe vrsta, poznata je po tome da oduzima mnogo vremena i često prilično neefikasna. Ultrazvučnim ekstrakcijom psilocibin, psilocin, baeocistin i norbaeocistin se brzo izvlače iz svežih i sušenih psilocib pečuraka. Ultrazvučno vađenje razbija ćelijske zidove pečurki tako da se bioaktivne supstance potpuno oslobađaju, tako da se postiže visoko efikasan i brz proces vađenja.

Ultrazvučno vađenje psilocibina

Ultrazvučno vađenje psilocibina je veoma efikasno i nadmašuje alternativne metode ekstrakcije visokim prinosima, kratko vreme izvlačenja, kao i jednostavan i bezbedan rad. Budući da je visoko efikasan, brz, pouzdan i ekološki prihvatljiv metod ekstrakcije, ultrazvučno vađenje se koristi za vađenje brojnih bioaktivnih jedinjenja iz biljaka i gljivica. Hielscher ultrazvučni se već široko koriste za vađenje bioaktivnih jedinjenja iz magičnih pečuraka, uključujući halucinogene kao što su psilocibin, psilocin, baeocistin i norbaeocistin. Ultrazvučno vađenje psihodeličnih jedinjenja daje visoke prinose superiornog kvaliteta ekstrakta u okviru postupka vađenja turbo-ekstrakta. Ultrazvučno izdvajanje je kompatibilno sa bilo kojim rastvaračem i omogućava izradu ekstrakata punog spektra.

Ultrasoniranost je brz i blag metod izdvajanja za proizvodnju gljiva visokog kvaliteta. U video zapisu se UP400St koristi za useljenje.

Hladnjača uz UP400St sa istragom od 22 mm

Video sličica

Захтев за информације




Obratite pažnju na naše Правила о приватности.


Ultrazvučni ekstraktor UP100H, kompaktna ultrazvučna sonda od 100 vati, koristi se za vađenje halucinogena iz magičnih pečuraka psilocibe vrste.

Prenosivi ultrazvučni UP100H za vađenje psilocibina.

Ултразвучна екстракција – Nežno hladno vađenje supstanci sa pečurkama

Mnoga bioaktivna jedinjenja su osetljiva na toplotu, što znači da se razgrađuju i razgrađuju pod visokim temperaturama tako da oslobađaju svoj efekat i potenciju. Zbog toga većina procedura za izolaciju sekundarnih metabolita od botanike i gljive ima koristi od metoda ne-toplotnog vađenja, koji se ne zasniva na toploti kao osnovnom principu rada. Ultrazvučno vađenje je čisto mehanička procedura, čiji se radni princip zasniva na generaciji akustične kavitacije.

Šta je ultrazvučna kavitacija i kako utiče na vađenje?

Kada se tečnost soniči ultrazvučnom sondom na 20kHz, 20.000 vibracija u sekundi se prenosi u medijum. Ultrazvučni talasi putuju kroz tečnost, gde stvaraju naizmenične cikluse visokog pritiska (kompresije) / niskog pritiska (retkosti ili ekspanzije). Tokom vakuuma niskog pritiska javljaju se minuti vakuumskih mehurića ili šupljina u tečnosti, koje rastu tokom nekoliko ciklusa pritiska. Tokom faze kompresije tečnosti i mehurića, pritisak je pozitivan, dok faza retkosti proizvodi vakuum (negativan pritisak.) Tokom ciklusa proširenja kompresije, šupljine u tečnosti rastu dok ne dostignu veličinu, na kojoj ne mogu da apsorbuju više energije. U ovom trenutku, oni nasilno implode. Implozija tih šupljina rezultira raznim visoko energičnim sonomehaničkim efektima, koji su poznati kao fenomen akustične / ultrazvučne kavitacije. Tokom implozije ultrazvučnih mehurića kavitacije, ekstremne energetske guste sile kao što su visoka čar, tečni striming i turbulencije stvaraju se u soničnoj tečnosti. Ove kavitacione sile remete ćelijske zidove biljaka i oslobađaju intracelularna jedinjenja, uključujući bioaktivne supstance kao što su halucinogeni psilocibin, psilocin, baeocistin i norbaeocistin iz vrsta pečuraka. Naizmenični ciklusi visokog pritiska/niskog pritiska takođe promovišu intenzivne stope masovnog prenosa, što rezultira superiornim prinosom izvlačenja dobijenim sonikacijom. Ultrazvučnim vađenjem, skoro kompletna količina aktivnih supstanci prisutnih u botanici i pečurkama može biti izolovana.

Ultrazvučno vađenje psilocibina: Protokol korak po korak

  • Psilocibin i druge bioaktivne supstance možete izvući iz pečuraka koristeći vodu, etanol ili 200 dokazani etil alkohol kao rastvarače.
  • Iseckajte sveže ili sušene psilocibine pečurke na sitne komadiće i komadiće. Možete koristiti zatvarače i stabljike. Oba sadrže psihoaktivna jedinjenja, međutim kape su dosledno bogatije psilocibinom. Spore ne sadrže psilocibin.
  • Seckane pečurke stavite u stakleni posudu i napunite hladnom vodom.
    Opciono, stakleni posudu možete staviti u ledenu kupku kako bi temperatura procesa bila što hladnija.
  • Sonicirajte mešavinu pečuraka i rastvarača ultrazvučnom sondom. U zavisnosti od jačine zvuka, UP100H ili UP400St će biti dobar izbor. Naše tehničko osoblje će vam preporučiti idealan ultrazvučnik za vaš proces izvlačenja i podeliti sa vama parametre procesa kao što su postavka amplitude i vreme sonikacije.
  • Sonični mulj će postati plav. Plava voda koja sadrži izvađeni psilocibin iz tela za plodove pečuraka.
  • Odvojite komadiće pečuraka i krhotine naprezanjem ili filtriranjem. Opciono, zadržite materijal od pečuraka od filtracije za drugo vađenje koristeći vodu ili etanol.
  • Koristite sistem za isparavanje da biste uklonili rastvarač. 1 do 2 grama sušenih magičnih pečuraka treba dati u akroksu. 1cc konačnog ekstrakta. Kako su pečurke prirodan proizvod, sadržaj psihodeličnih supstanci može da varira.
  • Opcionim korakom kristalizacije, vek trajanja psilocibina može se dodatno produžiti.
  • Poslednji ekstrakt napunite u tamnu staklenu posudu ili bočice i čuvajte u zamrzivaču.

 

Ultrazvučni ekstrakt pečuraka se može filtrirati i koncentrisati pomoću rotari isparavača.

Ultrazvučno izdvojena bioaktivna jedinjenja mogu se filtrirati i dodatno koncentrisati pomoću rotari isparavača. Na slici se vidi ultrazvučni ekstrakt šaga pečuraka.

Ultrazvučni ekstraktor UP400St (400 vati, 24kHz) za vađenje psilocibina, psilocina, baeocistina i norbaeocistina iz pečuraka

УП400Ст – a 400 watts powerful ultrasonic probe-type extractor for the extraction of psilocybin from mushrooms

Предности ултразвучне екстракције
 

  • Потпуно извлачење
  • Viši prinosi
  • Brzi proces
  • Hladan / ne-toplotni proces
  • Kompatibilno sa bilo kojim Solventnim
  • Lak i bezbedan za rad
  • slabo održavanje

Zašto je ultrazvučni tip sonde najbolji za vađenje pečuraka?

Ultrazvučnost je proces u kojem se visokofrekventni zvučni talasi koriste za kreiranje mehurića kavitacije u tečnosti. Kada se ovi mehurići uruše, stvaraju intenzivne lokalizovane štićene sile koje mogu da razdopadnu ćelije i oslobode sadržaj ćelija u tečnost.
Prilikom vađenja pečuraka, ultrazvučnost se može koristiti za razbijanje ćelijskih zidova pečuraka i oslobađanje njihovih bioaktivnih jedinjenja u rastvarač. Postoje dve vrste ultrazvučnika: tip kupatila i tip sonde.
Ultrazvučni tip kupatila je uređaj u koji se uzorak nalazi u posudi ispunjenoj rastvaračem, a relativno slabi ultrazvučni talasi se primenjuju na ceo kontejner. Ova metoda je poznata kao prilično neefikasna, jer ultrazvučna kupka neravnomerno i niskim intenzitetom distribuira ultrazvučnu energiju. Kao i u ultrazvučnom kupatilu uzorak pečuraka je indirektno soničan, ultrazvuk ne može da prodre duboko u uzorak. Ultrazvučni talasi moraju da prolaze kroz zidove posude pre nego što pogode materijal za pečurke. Atle su ionako ultrazvučni talasi ultrazvučnog rezervoara niskog intenziteta još više umanjeni.
Sa druge strane, ultrazvučni tip sonde opremljen je vrhom – takozvani sonotode ili sonda – koji se može ubaciti direktno u uzorak, omogućavajući fokusiraniju i lokalizovaniju primenu ultrazvučne energije. To rezultira znatno efikasnijim poremećajem ćelija i vađenjem bioaktivnih jedinjenja, posebno u gustim ili teško dostižnim oblastima uzorka.

Čitin je polisakharid koji je glavna komponenta ćelijskih zidova mnogih gljivi, uključujući pečurke. Čitin je čvrst i krut materijal, što otežava kvarenje pomoću konvencionalnih metoda ekstrakcije.
Ultrazvučnost može biti efikasna u razbijanju čitina i oslobađanju bioaktivnih jedinjenja koja su zarobljena unutar ćelijskih zidova pečuraka. Međutim, visok intenzitet sonikacije tipa sonication je neophodan jer je čitin u ćelijskim zidovima relativno čvrst materijal. Fokusirana i lokalizovana primena ultrazvučne energije koju obezbeđuje ultrazvučni tip sonde osigurava da se čitin podvrgne dovoljnoj količini energije koju treba pokvariti.
Pored toga, sonda se može premestiti u različite oblasti uzorka stvarajući dodatno mešanje makroa kako bi se osiguralo adekvatno soniciranje svih delova pečuraka. Ovo je posebno važno za pečurke sa debelim ćelijskim zidovima ili gustim strukturama, gde može biti izazovno obezbediti potpuno izvlačenje pomoću drugih metoda.
Ukratko, visok intenzitet sonikacije tipa sonication je neophodan da bi se razbio čitin u zidovima ćelija pečuraka i oslobodila bioaktivna jedinjenja. Fokusirana i lokalizovana primena ultrazvučne energije koju obezbeđuje ultrazvučni tip sonde osigurava da se čitin adekvatno sonira, što rezultira efikasnijim i temeljnijim vađenjem bioaktivnih jedinjenja iz pečuraka.
Generalno se smatra da je ultrazvučni ultrazvučni tip sonde efikasniji za vađenje pečuraka, jer može da obezbedi ujednačenije i temeljnije vađenje bioaktivnih jedinjenja u poređenju sa ultrazvučnim tipom kupke.
Pročitajte više o razlikama između obrade tečnosti ultrazvučnim tipom sonde i ultrazvučne kupke!

Psilocibin-Sadrže pečurke

Najpoznatija pečurka koja sadrži psilocibin je vrsta Psilocybe cubensis. Ultrazvučno vađenje se koristi za vađenje ekstrakata celog spektra iz pečuraka.Psilocibin se može naći u više od 200 vrsta pečuraka od četiri gljive genera Conocybe uključujući vrste Panaeolus, Psilocybe, Stropharia, koje su sve pogodne za ultrasonično vađenje aktivnog jedinjenja psilocibina. Generalno, pečurke koje sadrže psilocibin ispoljavaju sledeće karakteristike: imaju tamne spore, lamela / škrge gljive, rastu uglavnom u zemljištu bogatom humusom na livadama i šumama tropskih i pod-tropskih regija i ispoljavaju plave modrice do kojih dolazi usled oksidativne reakcije, kada se pečurka rukuje ili oštećuje.
Najpoznatija vrsta pečurke koja sadrži psilocibin je Psilocybe cubensis, koja sadrži dva velika psihoaktivna jedinjenja, psilocibin i psilocin. Opšte poznate kao pečurke, magične pečurke, zlatni vrhovi, kocke ili zlatne kape, Psilocybe cubensis pripada porodici gljivica Hymenogastraceae, a ranije je bila poznata kao Stropharia cubensis. Kako je široko raspoređena i laka za uzgoj, Psilocybe cubensis je najpoznatija vrsta pečuraka koja sadrži pscilocibin.
Psilocybe cubensis je uglavnom poznat po halucinogenim jedinjenjima, koja pokreću psihodelična iskustva nakon konzumiranja. Ova velika psihoaktivna jedinjenja su:

  • Psilocybin (4-phosphoryloxy-N,N-dimethyltryptamine)
  • Psilocin (4-hidroksi-N,N-dimetiltriptamin)
  • Baeocystin (4-phosphoryloxy-N-methyltryptamine)
  • Norbaeocystin (4-phosphoryloxytryptamine)

Prednosti ultrazvučnih sistema za vađenje

Prednosti ultrazvučnog vađenja su visoki prinos ekstrakcije psihodeličnih jedinjenja (npr. psilocibin, psilocin, baeocistin, norbaeocistin), slobodan izbor rastvarača (npr. voda, etanol, mešavina vodenog alkohola i sl.), kao i jednostavan i bezbedan rad. Zbog intenzivnih mehaničkih sila sonikacije, ekoloških i blagih rastvarača kao što su voda, etanol itd. obično su dovoljni da ostvare izvanrednu stopu izvlačenja i prinosa. Kao rezultat toga, ultrazvučno izdvajanje skraćuje vreme izvlačenja i omogućava smanjenu upotrebu rastvarača ili upotrebu blažih, nežnijih rastvarača. To znači da ultrazvučno vađenje omogućava i jedno i drugo, veću stopu ekstrakcije i ekstrakte vrhunskog kvaliteta (npr. ekstrakte hladne vode). S obzirom na to da se temperatura procesa može precizno kontrolisati tokom sonicije, izbegava se toplotno raspadanje ekstrakata usled prekomerno visokih temperatura kao i isparavanje supstanci.

Sofisticirani ultrazvučnici za vađenje pečuraka

Portfolio proizvoda Hielscher Ultrasonics pokriva čitav spektar ultrazvučnih ekstraktora visokih performansi od malih do velikih razmera. Dodatna dodatna oprema omogućava laku montažu najpogodnije konfiguracije ultrazvučnog ekstraktora za vaš proces. Optimalno podešavanje sonication zavisi od predviđenog kapaciteta, zapremine, sirovine, grupnog ili umetnutog procesa i vremenske ose. Naša dugotrajna iskustva, dobro obučeno osoblje preporučiće vam najpogodniji ultrazvučni ekstraktor i pomoći će vam tokom uspostavljanja faze vašeg procesa vađenja pečuraka.

Ultrazvučno botaničko vađenje daje veće prinose. Hielscher UIP2000hdT, 2000 watts homogenizer je dovoljno snažan da lako izvuče grupe od 10 litara do 120 litara.

Ultrazvučno vađenje botaničke - 30 litara / 8 Gallon Group

Video sličica

 

Hielscher ultrazvučni procesor možete kupiti u bilo kojoj različitoj veličini i tačno konfigurisati na vaše procesne zahteve vađenja pečuraka. Od lečenja gljivica u malom laboratorijskom beakeru do neprekidnog protoka mešanja ljage pečuraka na industrijskom nivou, Hielscher Ultrasonics nudi pogodan ultrazvučni za vas! Kontaktirajte nas – Drago nam je da vam preporučimo idealnu ultrazvučnu postavku!
Табела испод показује приближни капацитет обраде наших ултразвучних уређаја:

батцх tom Проток Препоручени уређаји
1 до 500 мл 10 до 200мЛ / мин УП100Х
10 до 2000мЛ 20 до 400мЛ / мин УП200Хт, УП400Ст
0.1 до 20Л 0.2 до 4Л / мин УИП2000хдТ
10 до 100Л 2 до 10Л / мин UIP4000hdT
Н.А. 10 до 100Л / мин УИП16000
Н.А. веће кластер УИП16000

Контактирајте нас! / Питајте нас!

Traži više informacija

Koristite donji obrazac da biste zatražili dodatne informacije o Ultrason, procesorima, aplikacijama i ceni. Biće nam drago da razgovaramo o vašem procesu sa vama i da vam ponudimo ultrasonični sistem koji ispunjava vaše zahteve!









Molimo vas da zabeležite naše Правила о приватности.


Precizno kontrolisane amplitude za optimalne rezultate

Hielscher's industrial processors of the hdT series can be comfortable and user-friendly operated via browser remote control.Svi Hielscher ultrazvučnici su precizno pod kontrolom i time pouzdani radni konji u proizvodnji. Amplitude je jedan od ključnih procesnih parametara koji utiču na efikasnost i delotvornost ultrazvučnog vađenja bioaktivnih fito-hranljivih materija i halucinogenih jedinjenja iz botaničke. Sirovina kao što su meke sveže pečurke zahteva blažu soniaciju i niža podešavanja amplitude, dok sušene pečurke mogu zahtevati sonication na većim amplitude da bi se oslobodio intracellularni sadržaj. Svi Hielscher ultrazvučnici omogućavaju preciznu postavku amplitude. Sonotrodi i booster rogovi su dodatna oprema koja omogućava modifikovanje amplitude u još širem opsegu. Hielscherovi industrijski ultrazvučni procesori mogu da isporuče veoma visoke amplitude i isporuče potreban ultrazvučni intenzitet za zahtevne aplikacije. Amplitude do 200μm se mogu lako neprekidno pokrenuti u 24/7 operaciji.
Precizna podešavanja amplitude i trajno praćenje parametara ultrazvučnog procesa putem pametnog softvera daju vam mogućnost da proizvedete ekstrakt pečuraka pod najefikasnijim ultrazvučnim uslovima. Optimalna sonicija za najbolje rezultate izvlačenja!
Robustnost Hielscherove ultrazvučne opreme omogućava non-stop rad na teškim dužnostima i u zahtevnim okruženjima. To čini Hielscher ultrazvučnu opremu pouzdanim sredstvom za rad koje ispunjava vaše zahteve za izvlačenje.

Lako, testiranje bez rizika

Ultrazvučni procesi mogu biti potpuno linearne razmere. To znači da svaki rezultat koji ste postigli koristeći laboratorijski ili vrhunski ultrazvučnik, može da se podesi na potpuno isti izlaz koristeći potpuno iste parametre procesa. To ultrazvučnost čini idealnom za testiranje izvodljivosti bez rizika, optimizaciju procesa i naknadnu implementaciju u komercijalnu proizvodnju. Kontaktirajte nas da biste saznali kako sonicija može povećati prinos i kvalitet ekstrakta pečuraka.

Najviši kvalitet – Dizajnirani i proizvedeni u Nemačkoj

Kao porodični i porodični biznis, Hielscher daje prioritet najvišim standardima kvaliteta za svoje ultrazvučne procesore. Svi ultrazvučnici su dizajnirani, proizvedeni i temeljno testirani u našem sedištu u Teltou blizu Berlina, Nemačka. Robustnost i pouzdanost Hielscherove ultrazvučne opreme čine je radnim konjem u vašoj proizvodnji. 24/7 operacija pod punim opterećenjem i u zahtevnim okruženjima je prirodna karakteristika Hielscher ultrazvučnika visokih performansi.

Ultrazvučni homogenizatori visokog šera koriste se u laboratoriji, na klupi, pilotu i industrijskoj preradi.

Hielscher Ultrasonics proizvodi ultrazvučne homogenizatore visokih performansi za mešanje aplikacija, raspršivanje, emulzifikaciju i vađenje na laboratorijskoj, pilotskoj i industrijskoj skali.



Literatura/reference

  • Mason, N.L; Mischler, E.; Uthaug, M.V.; Kuypers, K.P.C. (2019) Sub-Acute Effects of Psilocybin on Empathy, Creative Thinking, and Subjective Well-Being, Journal of Psychoactive Drugs 2019.
  • Pedersen-Bjergaard, S.; Sannes, E.; Rasmussen, K.E.; Tønnesen, F. (1997): Determination of psilocybin in Psilocybe semilanceata by capillary zone electrophoresis. Journal of Chromatography B, 694; 1997. 375–381.
  • Stamets, P. (1996): Psilocybin Mushrooms of the World. 1996

Чињенице вреди знати

Magični pečurke

Pečurke, koje sadrže psihoaktivne/psihodelične supstance kao što su psilocybin, psilokin i baeokistin, poznate su kao psihodelične gljive, čarobne gljive, šionice, magične trufle, i gljive. Poznato je više od 180 vrsta pečurki koji sadrže psilokisbin ili njen derivativni psilokin.
Pečurke u mnogim zemljama su ilegalne, npr. sad, Kanada, Evropa, Indija. U Americi su klasifikovani kao raspored koji sam kontrolisao, iako su nedavno, FDA i DEA dozvolili neke male, visoko kontrolisane ljudske studije o svom potencijalu za upotrebu u medicinskoj i psihijatrijskoj upravi lekova. Efekti psilocisbina i drugih psihodelika su istražili zbog svojih efekata i potencijalnog tretmana poremećaja kao što su glavobolje, poremećaji raspoloženja i ovisnost.

Vrsta

Psilocyto cubensis je jedna od najpopularnijih čarobnih gljiva koje nude srednju psilokaznu koncentraciju od oko 0,63% psilocybin i 0,60% psilokin u sušnim divljim pečurkama. Unutrašnje kultivne pečurke uglavnom imaju veću koncentraciju svojih aktivnih jedinjenja.

Psilocibe vrsta % PSILOCYBIN % PSILOSIN % BAEOKISTIN
P. azurenscens 1,78 0.38 0.35
P. bohemica 1,34 0.11 0.02
P. semilanceata 0.98 0.02 0.36
P. baeocistis 0.85 0.59 0.10
P. cyanestezcens 0.85 0.36 0.03
P. tamanensis 0.68 0.32 Н.А.
Str. cubensis 0.63 0.60 0.025
P. weilii 0.61 0.27 0.05
P. hoogshagenii 0.60 0.10 Н.А.
P. stuntzii 0.36 0.12 0.02
P. cyanofibrillosa 0.21 0.04 Н.А.
P. liniformans 0.16 Н.А. 0.05

Psilocybin

Psilocybin je psihotična, halucinogenična supstanca pronađena u pečurkama od Psilocyda, Panaeolina, Panaeolusa, Copelandia, Conocyda, Gymnopilus, Strofarija i Pluteus i smatra se kao lek za narkotike.
Pored psilocybina, psilokin i baeokata nalaze se još dve aktivne supstance koje se nalaze u čarobnim pečurkama.
Potencijo gljiva može da varira u velikoj meri od kada su pečurke prirodni proizvod, koji se razvija kao odgovor na svoju okolinu. Različiti delovi gljive se razlikuju i u potenciju (npr. Cap i Stem mogu da imaju različitu koncentraciju psihoaktivnih jedinjenja). Zbog ovih prirodnih varijacija, maceracija, Homogenizacija i ultrazvučna ekstrakcija mogu da pomognu da se umanji rizik od neočekivano jakih (ili slabih) doza psilokisbina.
Upotreba i efekti: nakon upravljanja psilokisbin, širok spektar subjektivnih efekata je zabeležen, koji se kreću od osećaja disorijentacije, lethargija, giddinesa, euforije, radosti i depresija. Otprilike trećina korisnika iskusi osecanja uznemirenosti ili paranoja. Niske doze lekova mogu da vide halucinatorske efekte, halucinacije zatvorenih očiju, i/ili synesesije (doživljaj tacne osećaji pri prikazivanju boja). U višim dozama, psilocybin mogu da se razmisle intenzivnim reakcijama, poboljšanim mogućnostima za introestetstvo, regresivnu i neporođajnu, kao i aktiviranje živopisnih tragova pamćenja. Vizualni vizuelni halucinacije su uobičajeni i mogu biti veoma detaljni, mada retko zbunjeni realnošću.
Anegdotal izveštaji, kao i nedavne studije pokazuju da jedinstvena administracija psilokvbina može da poboljša reativan razmišljanje i empatiju i zato može da bude potencijalni tretman za kognitivno i socijalno ponašanju. Rezultati studije “Stvaralačko razmišljanje i empatija” (Mason et. 2019) označava da je psilocybin poboljšan Divergentno razmišljanje i emocionalna empatija jutro nakon upotrebe. Poboljšanja u konvergentnom razmišljanju, nespecifične emotivne empatiju, i dobro se sprovode sedam dana nakon upotrebe. Subakutne promene u korelaciji sa promenama u blagostanja. Studija pokazuje da se jedna administracija psilokvbina u socijalnoj postavci može povezati sa subakutnim unapređivanjem kreativnog razmišljanja, empatije i subjektivnog blagostanja.

Biće nam drago da razgovaramo o vašem procesu.

Hajde da stupimo u kontakt.