Pregătirea cu ultrasunete a serului bogat în trombocite
- Plasma bogată în trombocite (PRP) este plasma sanguină care a fost îmbogățită cu trombocite, care este utilizată pentru tratamente medicale și estetice.
- Liza și condiționarea cu ultrasunete este o metodă foarte eficientă de preparare a plasmei bogate în trombocite.
- Hielscher Ultrasonics oferă diverse sisteme cu ultrasunete care corespund cerințelor tratamentului sângelui (de exemplu, pentru pregătirea interioară și exterioară a unei camere curate).
Ser bogat în trombocite
Sonicare este o metodă fiabilă și ușoară de a liza trombocitele din serul de sânge autolog pentru a elibera factorii de creștere. Fracțiunile derivate din trombocite – cunoscut și sub denumirea de ser autolog condiționat (ACS) – sunt utilizate pentru repararea țesuturilor sau tratamente estetice. Pentru a obține rezultate optime, PRP este îmbogățit înainte de injectare.
Pentru a prepara plasma îmbogățită cu factori de creștere celulară, sonicare este o metodă foarte eficientă și eficientă de a liza membranele celulare și de a elibera aproape complet factorii de creștere celulară din trombocite. Prin liza și condiționarea cu ultrasunete, poate fi utilizat chiar și sânge anticoagulant.
Condiționarea PRP prin sonicare este o modalitate convenabilă și rentabilă de a produce factori de creștere concentrați.
Efecte de liză cu ultrasunete
Tratamentul cu ultrasunete al serului de sânge are ca rezultat o liză omogenă a trombocitelor pentru a elibera factorii de creștere prinși (factorul de creștere AB (PDGF-AB), factorul de creștere AA (PDGF-AA), factorul de creștere BB (PDGF-BB), factorul de creștere endotelial vascular (VEGF), factorul de creștere transformator β (TGF-β), factorul de creștere epidermică (EGF), factorul de creștere asemănător insulinei (IGF), factorul de creștere a celulelor epiteliale ECGF și factorul de creștere fibroblastică (FGF)). Trombocitele și alfa-granulele lor sunt perturbate prin sonicare, folosind fenomenul de cavitație acustică. Utilizarea cavitației cu ultrasunete pentru liza plachetară diminuează posibilul impact negativ asupra activității factorului de creștere al metodei repetate îngheț-dezgheț.
Protocol pentru pregătirea PRP cu ultrasunete
Aproximativ 16 ml de probă de sânge autolog proaspăt colectată este ușor inversată de 8-10 ori într-un tub, astfel încât sângele și anticoagulantele să fie bine amestecate. După aceea, proba se centrifughează la 1800 g timp de 20 de minute la temperatura camerei. După centrifugare, trombocitele și celulele mononucleare construiesc un strat albicios în partea inferioară a stratului plasmatic, cunoscut sub numele de plasmă bogată în trombocite (PRP). Stratul superior este cunoscut sub numele de plasmă săracă în trombocite (PPP). Celulele mononucleare pot fi îndepărtate sau pot rămâne în probă. Adesea, celulele mononucleare rămân în proba PRP pentru a evita etapele suplimentare, care prezintă riscul de contaminare.
Notă: Tratamentul cu ultrasunete al PRP autolog trebuie efectuat în condiții sterile.
PRP și PPP sunt separate și colectate. La PPP se adaugă 1,5 ml soluție de clorură de calciu 10%, în timp ce la PRP se adaugă 0,5 ml 5% etanol. Ambele suspensii sunt agitate ușor și lăsate să stea timp de 5 minute la temperatura camerei. În cele din urmă, se adaugă 1 ml de PPP la suspensia PRP și se lasă să stea până când se formează un cheag de fibrină.
Tratamentul cu ultrasunete: Deoarece gelul plachetar format acționează ca un rezervor pentru factorii de creștere eliberați, gelul de fibrină trebuie întrerupt pentru a elibera factorii de creștere disponibili. Parametrii pentru liza cu ultrasunete și eliberarea factorului de creștere sunt următorii: Sonicate cu un UP200Ht sau UP200St (200W, 26kHz) cu sonotrode S26d2 proba în tub. Pentru a evita supraîncălzirea probei de sânge, sonicare poate fi efectuată în cicluri pulsatorii (de exemplu, 10 sec. pornit, 30 sec. oprit). Eșantionul trebuie așezat pe gheață pentru răcire, astfel încât temperatura să fie menținută optim între 2 – 5°C. După sonicare, proba este centrifugată la 16000 g timp de 5 min. la temperatura camerei. Supernatantul se colectează și poate fi păstrat la -70°C.
Concentrația plachetară în fracția PRP a fost îmbogățită 1,7 – 4.5 ori în metoda sonicated în comparație cu numărul mediu de trombocite din literatura de specialitate în sânge integral.
PRP a fost combinat cu terapia cu celule stem derivate din grăsime (Ultrasonically eliberat celule stem autologe din țesutul adipos, amestecat cu PRP și injectat înapoi în țesutul pacientului pentru reparare).
Echipamente cu ultrasunete
Hielscher Ultrasonics este expert pentru tehnologie cu ultrasunete sofisticate și fiabile. Dispozitivele noastre cu ultrasunete sunt utilizate în întreaga lume pentru liză, extracție și pregătirea probei – prin direct și indirect. Autoclavabil precum și Unică folosinţă accesoriile asigură o fără contaminare tratamentul probelor de sânge autolog. Majoritatea sistemelor noastre pot fi utilizate pentru liza cu ultrasunete a celule stem și PRP, ceea ce face ca dispozitivele noastre cu ultrasunete să fie și mai eficiente din punct de vedere economic.
Acest tabel de mai jos listează dispozitivele noastre cu ultrasunete, care sunt potrivite pentru prepararea plasmei bogate în trombocite și, respectiv, volumul recomandat al probei. Ultrasonicators mai mari și sisteme personalizate sunt disponibile, de asemenea.
Dispozitiv | Putere [W] | Frecvență. [kHz] | Tip | Volum [ml] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
VialTweeter | 200 | 26 | de sine stătătoare | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | portabil sau montat în standmount | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | portabil sau montat în standmount | 0.01 | – | 500 |
UP200Ht | 200 | 26 | portabil sau montat în standmount | 0.1 | – | 1000 |
UP200St | 200 | 26 | montat în standmounted | 0.1 | – | 1000 |
UP400St | 400 | 24 | montat în standmounted | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-SonoStep | 200 | 26 | de sine stătătoare | 30 | – | 500 |
GDmini2 | 200 | 26 | celulă cu flux fără contaminare |
Vă rugăm să ne contactați astăzi! Vom fi bucuroși să vă ajutăm să găsiți dispozitivul cu ultrasunete optim!
Contactează-ne! / Întreabă-ne!
Literatură/Referințe
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Cap.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; , G. (2016): Gelul de lizat de trombocite și progenitorii endoteliali stimulează formarea rețelei microvasculare in vitro: implicații ale ingineriei tisulare. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, MSA; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Plasma bogată în trombocite (PRP) pentru leziuni musculare acute: o revizuire sistematică. PLOS ONE Volumul 9, Numărul 2, 2014.
Fapte care merită știute
Plasmă bogată în trombocite
Plasma bogată în trombocite conține factor de creștere AB (PDGF-AB), factor de creștere derivat din trombocite AA (PDGF-AA), factor de creștere derivat din trombocite BB (PDGF-BB), factor de creștere endotelial vascular (VEGF), factor de creștere transformator β (TGF-β), factor de creștere epidermică (EGF), factor de creștere asemănător insulinei (IGF), factor de creștere a celulelor epiteliale ECGF și factor de creștere fibroblastică (FGF), care sunt stimulente importante pentru creșterea și reînnoirea celulelor.
Ser autolog condiționat (ACS)
Plasma condiționată autologă (ACP) este o plasmă bogată în trombocite extrasă din sângele autolog, care este utilizată pentru a sprijini regenerarea într-o varietate de afecțiuni ortopedice și proceduri chirurgicale. Serul condiționat se prepară prin separarea plasmei de celelalte componente sanguine (cum ar fi eritrocitele) și se concentrează. ACP este o plasmă bogată în trombocite (PRP). PRP este un termen general pentru un tip de plasmă care conține o concentrație semnificativ mai mare de trombocite în comparație cu sângele integral. Este extras din sânge integral. Principalele componente ale ACP includ trombocitele (trombocitele) și mai mulți factori de creștere care joacă un rol important în procesul de vindecare. Spre deosebire de alte formulări plasmatice bogate în trombocite, ACP se distinge printr-o concentrație scăzută de celule albe din sânge, cum ar fi granulocitele neutrofile, care pot fi dăunătoare procesului de vindecare atunci când sunt prezente în concentrații mari.
Injecții cu plasmă bogată în trombocite
Plasma bogată în trombocite este utilizată ca injecție în medicina regenerativă, precum și în procedurile cosmetice. Aplicarea PRP promite accelerarea semnificativă a vindecării musculare și a recuperării musculare. În plus, este utilizat cu succes pentru a trata inflamația, artrita, durerea, rănile, vindecarea lentă a rănilor deschise și arsurile grave ale pielii. PRP conține un nivel ridicat de factori de creștere, care stimulează și protejează celulele vindecătoare pentru ca țesutul deteriorat să fie reparat.
Pentru treamentele cosmetice, PRP sa dovedit eficient pentru a stimula creșterea părului, reînnoirea pielii (cunoscută și sub numele de tratament vampir).
Factori de creștere derivați din trombocite (PDGF)
Termenul factor de creștere derivat din trombocite (PDGF) se referă la factorii PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C și PDGF-D. Este o rețea de semnalizare formată din patru liganzi (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C și PDGF-D) și doi receptori, PDGFR-alfa și PDGFR-beta.
Factorii de creștere, sau proteinele, reglează creșterea și diviziunea celulelor. Ca mitogen principal găsit în serul mamiferelor, care este eliberat din trombocite în timpul formării cheagurilor, joacă un rol semnificativ în formarea vaselor de sânge (angiogeneză), creșterea vaselor de sânge din țesutul vaselor de sânge deja existente.