Prepararea ultrasonică a serului bogat în trombocite

• Plasma bogată în trombocite (PRP) este plasma sanguină care a fost îmbogățită cu trombocite și care este utilizată pentru tratamente medicale și estetice.
• Liza și condiționarea ultrasonică reprezintă o metodă foarte eficientă de preparare a plasmei bogate în trombocite.
• Hielscher Ultrasonics oferă diverse sisteme ultrasonice care corespund cerințelor tratamentului sângelui (de ex. pentru prepararea în interiorul și în afara unei camere curate).

Ser bogat în trombocite

Sonicarea este o metodă fiabilă și simplă de liză a trombocitelor din serul sanguin autolog, în vederea eliberării factorilor de creștere. Fracțiile derivate din trombocite – cunoscute și ca ser autolog condiționat (ACS) – sunt utilizate pentru repararea țesuturilor sau pentru tratamente estetice. Pentru a obține rezultate optime, PRP este îmbogățită înainte de injectare.
Pentru a prepara plasmă îmbogățită cu factori de creștere celulară, sonicarea este o metodă foarte eficace și eficientă de liză a membranelor celulare și de eliberare a aproape tuturor factorilor de creștere celulară din trombocite. Prin liză și condiționare ultrasonică, poate fi utilizat chiar și sânge anticoagulat.
Condiționarea PRP prin sonicare este o modalitate convenabilă și rentabilă de a obține factori de creștere concentrați.

Liza ultrasonică a plasmei bogate în trombocite (PRP)

Efectele lizei ultrasonice

Tratamentul ultrasonic al serului sanguin are ca rezultat o liză omogenă a trombocitelor, în vederea eliberării factorilor de creștere încorporați (factorul de creștere AB (PDGF-AB), factorul de creștere AA (PDGF-AA), factorul de creștere BB (PDGF-BB), factorul de creștere a endoteliului vascular (VEGF), factorul de creștere transformant β (TGF-β), factorul de creștere epidermal (EGF), factorul de creștere asemănător insulinei (IGF), factorul de creștere a celulelor epiteliale ECGF și factorul de creștere fibroblastic (FGF)). Trombocitele și granulele lor alfa sunt dezintegrate prin sonicare, folosind fenomenul de cavitație acustică. Utilizarea cavitației ultrasonice pentru liza trombocitelor diminuează posibilul impact negativ al metodei de congelare-decongelare repetată asupra activității factorilor de creștere.

Protocol pentru prepararea ultrasonică a PRP

Aprox. 16mL de probă de sânge autolog proaspăt recoltat se întorc ușor de 8–10 ori într-un tub, astfel încât sângele și anticoagulantele să fie bine amestecate. Apoi, proba este centrifugată la 1800 g timp de 20 min la temperatura camerei. După centrifugare, trombocitele și celulele mononucleare formează un strat albicios la baza stratului de plasmă, cunoscut sub numele de plasmă bogată în trombocite (PRP). Stratul superior este cunoscut sub numele de plasmă săracă în trombocite (PPP). Celulele mononucleare pot fi îndepărtate sau pot rămâne în probă. Adesea, celulele mononucleare rămân în proba de PRP pentru a evita etape suplimentare, care implică riscul de contaminare.
Notă: Tratamentul ultrasonic al PRP autologe trebuie efectuat în condiții sterile.
PRP și PPP sunt separate și colectate. La PPP se adaugă 1,5mL soluție de clorură de calciu 10%, în timp ce la PRP se adaugă 0,5mL etanol 5%. Ambele suspensii sunt agitate ușor și lăsate în repaus timp de 5 min la temperatura camerei. În final, se adaugă 1mL PPP la suspensia de PRP, care este lăsată în repaus până la formarea unui cheag de fibrină.
Tratament ultrasonic: Deoarece gelul trombocitar format acționează ca un rezervor pentru factorii de creștere eliberați, gelul de fibrină trebuie dezintegrat pentru a elibera factorii de creștere disponibili. Parametrii pentru liza ultrasonică și eliberarea factorilor de creștere sunt următorii: Sonicați proba din tub cu un UP200Ht sau UP200St (200W, 26kHz) cu sonotroda S26d2. Pentru a evita supraîncălzirea probei de sânge, sonicarea poate fi efectuată în cicluri pulsate (de ex. 10 sec. pornit, 30 sec. oprit). Proba trebuie așezată pe gheață pentru răcire, astfel încât temperatura să fie menținută optim între 2 – 5°C. După sonicare, proba este centrifugată la 16.000 g timp de 5 min. la temperatura camerei. Supernatantul este colectat și poate fi depozitat la -70°C.
Concentrația de trombocite din fracția de PRP a fost îmbogățită de 1,7 – 4,5 ori prin metoda cu sonicare, în comparație cu numărul mediu de trombocite din sângele integral raportat în literatură.

PRP a fost combinată cu terapia cu celule stem derivate din țesutul adipos (celule stem autologe eliberate prin ultrasunete din țesutul adipos, amestecate cu PRP și injectate înapoi în țesutul pacientului pentru reparare).

Echipamente ultrasonice

Hielscher Ultrasonics este expert în tehnologie ultrasonică sofisticată și fiabilă. Dispozitivele noastre ultrasonice sunt utilizate în întreaga lume pentru liză, extracție și prepararea probelor – atât direct, cât și indirect. Accesoriile autoclavabile precum și cele de unică folosință asigură un tratament fără contaminare al probelor de sânge autolog. Majoritatea sistemelor noastre pot fi utilizate pentru liza ultrasonică a celulelor stem și a PRP, ceea ce face ca dispozitivele noastre ultrasonice să fie și mai eficiente din punct de vedere economic.
Tabelul de mai jos enumeră dispozitivele noastre ultrasonice adecvate pentru prepararea plasmei bogate în trombocite, precum și volumul de probă recomandat pentru fiecare. Sunt disponibile și sonicatoare mai mari și sisteme personalizate.

Vă rugăm să ne contactați astăzi! Vom fi bucuroși să vă ajutăm să găsiți dispozitivul ultrasonic optim!