Ultraskaņas paraugu sagatavošana THC analīzei
- Ultraskaņas ekstrakcija ir pierādīta metode THC ražošanai, bet to var izmantot arī analītiskiem mērķiem.
- Ultrasonication ir kopēja paraugu sagatavošanas metode, ko izmanto, lai analizētu kopējo THC saturu kaņepju produktos.
- Ultraskaņas ekstrakcija tiek piemērota paraugiem pirms TLC, GC un HPLC analīzes.
Ultraskaņas THC ekstrakcija
THC vai tetrahidrokanabinols (delta-9-tetrahidrokanabinols) ir ķīmiska viela, kas izraisa lielāko daļu marihuānas psiholoģiskās ietekmes. Kaņepju sugām var būt zināmi vairāk nekā 400 dažādi celmi. Atkarībā no konkrētā kaņepju celma kaņepēm var būt tikai 0,3 masas% THC. Citos celmos THC saturs var sasniegt līdz 20 masas%.
Arī dažādi kaņepju produkti ievērojami atšķiras: Tātad vidējā THC koncentrācija marihuānā svārstās no 1 līdz 5%; hašišā THC saturs ir no 5 līdz 15%, bet hašiša eļļā tas vidēji ir 20%. THC izklaides marihuānas devās ir ļoti mainīgs, un jo zemāks ir THC saturs marihuānā, jo vairāk lietotājam ir jālieto, lai izjustu vēlamos efektus.
Ultraskaņas parauga sagatavošanu izmanto, lai analizētu THC saturu
- atpūtas THC produktu kvalitātes kontrolei, t
- farmaceitisko THC produktu kvalitātes noteikšanai, t
- lai nošķirtu kaņepes un šķiedras kaņepes.
THC analīzei parasti izmanto šādas hromatogrāfijas metodes: plānslāņa hromatogrāfija (TLC), gāzu hromatogrāfija (GC) un augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija (HPLC)
Ultraskaņas paraugu sagatavošanas protokols TLC analīzei
Paraugu sagatavošana: Paraugu sagatavošanai žāvētais augu materiāls ir macerēts un sasmalcināts līdz viendabīgam pulverim. Ultraskaņas ekstrakcijai flakonā sajauc 500 mg kaņepju augu pulvera un 5 ml metanola-hloroforma maisījuma (attiecība 9: 1). Ultraskaņas apstrādi var izmantot, izmantojot Ultrasonicator ar mikro galu, VialTweeter vai ultraskaņu Cuphorn. Ultraskaņas apstrādes laiks aizņem aptuveni 5 minūtes. Pēc tam paraugam ļauj atpūsties vismaz 5 minūtes. Dzidro centrifugātu atšķaida ar ekstrakcijas maisījumu (v/v: 1: 10). Brīvs THC: 1 μL uz plānslāņa hromatogrāfijas plates
Dekarboksilācija: 100 μL ekstrakta iztvaicē sausu. Atlikumu karsē 180°C temperatūrā 4 minūtes. Pievieno 500 μl metanola hloroforma (V/V 9: 1). Sonicate 5 min. Dzidro centrifugātu atšķaida ar ekstrakcijas maisījumu (v/v: 1: 10).
Kalibrēšana: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silikagels F-254, Merck 5729
TLC skeneris II, programmatūra CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Etilacetāts: Toluols: Hloroforms = 3: 17: 0,25 (V/V/V)
Pēchromatogrāfiskā derivatizācija: ātrs zilais sāls 0,1 % no 0,1 M NaOH
Densitometriskais sastāvs pie 550 nm
Tetrahidrokanabinols (Δ9-THC) analīzēm un ekstrakcijai
Ultraskaņas paraugu sagatavošanas protokols GC analīzei
Parauga sagatavošana: Žāvēto augu materiālu macerē un sasmalcina līdz viendabīgam pulverim. Ekstrakcijai flakonā sajauc 500 mg kaņepju augu pulvera un 10 ml metanola-heksāna maisījuma (attiecība 9: 1). Ultraskaņas apstrādi var izmantot, izmantojot zondes tipa ultraskaņas ierīce ar mikro galu, VialTweeter vai ultraskaņu Cuphorn. Paraugu apstrādā ar ultraskaņu 15-20 min. Sakrata paraugu un ļauj tam atpūsties vismaz 5 minūtes. Dzidro centrifugātu atšķaida ar ekstrakcijas maisījumu (V/V 1: 20).
Dekarboksiācija: insertā
Inžektora temperatur 250°C
Kalibrēšana: 5 ng/μL līdz 250 ng/μL
GC: HP 6890 ar 5973 MSD un 7683 autosamplera iesmidzināšanu: 1μL, bezatlīdzības laiks: 2 min.
Kolonna: HP-5 MS, 30m, diametrs 250 μm, plēves biezums 0,25 μm
Nesējgāze: Viņš, 35 psi, pastāvīga plūsma: 4 ml/min.
Žāvēšanas skapis: 100°C 1min.; temperatūras paaugstināšanās par 15°C /min. līdz 280°C; 280 °C 5 minūtes MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Ultraskaņas paraugu sagatavošanas protokols HPLC analīzei
Parauga sagatavošana (analogs GC sagatavošanai): Žāvēto augu materiālu macerē un sasmalcina līdz viendabīgam pulverim. Ekstrakcijai flakonā sajauc 500 mg kaņepju augu pulvera un 10 ml metanola-heksāna maisījuma (attiecība 9: 1). Ultraskaņas apstrādi var izmantot, izmantojot zondes tipa ultrasonikators ar mikro galu, VialTweeter vai ultraskaņu Cuphorn. Paraugu apstrādā ar ultraskaņu 15-20 min. Sakrata paraugu un ļauj tam atpūsties vismaz 5 minūtes. Dzidro centrifugātu atšķaida ar ekstrakcijas maisījumu (V/V 1: 20).
VialTweeter Ultraskaņas paraugu sagatavošanai
Precolumn: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Kolonna: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluents: izokrātiska 36 % TEAP 25 mmol/l, 64 % acetonitrila kvantitatīva noteikšana pie 210 nm
Kalibrēšana: 0,001 – 0,10 μg/μL
Kalibrēšana: 0,01 – 0,50 μg / μL
Aiztures laiks: CBD: 6,2 min.; CBN: 8,0 min.; THC: 9,4 min.; THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St ar mikro-galu ultraskaņas apstrādei
Literatūra/Atsauces
- Verners Bernhards, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Aplikācija 2006.
Fakti, kurus ir vērts zināt
marihuāna sastāv no kaltētiem ziediem un sieviešu kaņepju auga lapām un stublājiem. Šī ir visplašāk patērētā forma, un tajā ir aptuveni 3% līdz 20% THC. Specifiskas, augsti audzētas marihuānas formas sasniedz THC saturu, kas pārsniedz 30%. Marihuāna ir izejmateriāls visām pārējām THC saturošām kaņepju produktu šķirnēm. Lai pārvērstu bagātīgāko kanabinoīdu, tetrahidrokanabinolskābi (THCA), psihoaktīvā THC, jāuzsāk dekarboilēšanas process. Tāpēc kaņepes un to ekstrakti ir jākarsē vai dehidrēti, lai izraisītu dekarboksilāciju.
Kīfs attiecas uz pulveri, kas bagāts ar trichomes, kas tiek izsijāts no kaņepju lapām un ziediem. Tas tiek patērēts vai nu pulvera veidā, vai saspiests un izmantots hašiša kūkās.
Hašišs vai hash ir koncentrēta sveķu kūka vai bumba, kas tiek ražota vai nu no presēta kifa, vai no sveķiem, kas tiek nokasīti no auga virsmas un velmēti bumbiņās. Tas notiek dažādās krāsās no melnas līdz zeltaini brūnai atkarībā no tīrības un avota. To var lietot iekšķīgi vai kūpināt, piemēram, pīpē, ūdenspīpē, bongā, burbuļotājā, iztvaicētājā, izmantojot karstu nazi, kūpināt locītavās, sajaukt ar kaņepju pumpuriem vai tabaku, kūpināt kā pudeļu tokes vai izmantot kā pārtikas sastāvdaļu.
Kaņepju tinktūra attiecas uz kanabinoīdu ekstraktu alkoholā. Kanabinoīdus iegūst no kaņepju auga, izmantojot augstas izturības spirtus (galvenokārt graudu spirtu), lai izveidotu tinktūru.
jaucējeļļa ir kanabinoīdu sveķaina matrica, kas iegūta, ekstrahējot ar šķīdinātāju, veidojas sacietējušā vai viskozā masā. Hash eļļa ir viens no spēcīgākajiem kaņepju produktiem, jo tajā ir augsts psihoaktīvo savienojumu līmenis. Butānā un superkritiskajā oglekļa dioksīdā ekstrahētās jaucējeļļas izmantošana nesen ir ieguvusi arvien lielāku popularitāti.
Uzlējumi attiecas uz dažāda veida kaņepju infūzijām, kas atšķiras viena no otras ar plašu gaistošu šķīdinātāju klāstu, ko var izmantot kaņepju infūzijas ražošanai. Lai pagatavotu šādu infūziju, kaņepju augu vielu sajauc ar šķīdinātāju un pēc tam nospiež un filtrē, lai eļļas no auga pārnestu šķīdinātājā. Kakao sviests, piena sviests, cepamā eļļa, glicerīns un ādas mitrinātāji ir parasti izmantotie šķīdinātāji.
medicīniskā marihuāna attiecas uz kaņepju auga lietošanu kā ārsta ieteiktu augu terapiju, kā arī sintētisko THC un kanabinoīdiem. Šim lietojumam parasti ir nepieciešama recepte, un izplatīšana parasti tiek veikta saskaņā ar vietējiem likumiem. Vairāki pētījumi ir parādījuši, ka kaņepju vai tā atvasinājumu lietošana darbojas pret, piemēram, ķīmijterapijas izraisītu sliktu dūšu un vemšanu, neiropātiskām sāpēm un multiplo sklerozi.