Սնկից բետա-գլյուկանների արդյունահանում ուլտրաձայնային մեթոդով
Նյութեր և սարքավորումներ
- Սունկ (օրինակ՝ 100 գ թակած կամ կտրատած սունկ)
- Սառը թորած ջուր (օրինակ՝ 500 մլ)
- Բլենդեր կամ սրող
- Ապակե բաժակներ կամ կոլբաներ
- Զտիչ թուղթ կամ վակուումային ֆիլտրման սարքավորում
- Ցենտրիֆուգ (ըստ ցանկության)
- Ալկոհոլ (օրինակ՝ էթանոլ) տեղումների համար
- Սառնարան
- Չորացման վառարան
Բետա-գլյուկանի արդյունահանման արձանագրություն
- Մանրացրեք կամ մանրացրեք սունկը (օրինակ՝ Չագա կամ Առյուծ’ Մանե սունկ) վերածվում է մոտավորապես կոպիտ մասնիկների: 1-ից 3 միլիմետր: Օրինակ՝ օգտագործեք 100 գ չոր սնկի մասնիկներ։
- Այնուհետեւ սնկի մասնիկները ավելացրեք ապակե բաժակի կամ կոլբայի մեջ:
- Այնուհետև ավելացրեք 500 մլ թորած ջուր բաժակի մեջ, որը պարունակում է արդյունահանվող սնկի մասնիկներ: Ջուր-սունկ հարաբերակցությունը կարող է տարբեր լինել՝ կախված սնկի կոնկրետ տեսակից և մասնիկների չափից:
- Կաղապարը խառնելուց հետո խառնուրդը ձայնագրեք՝ օգտագործելով ուլտրաձայնային լաբորատոր հոմոգենիզատոր (օրինակ՝ UP400St 22 մմ սոնոտրոդով 100% ամպլիտուդով կամ UP200Ht 14 մմ սոնոտրոդով 100% ամպլիտուդով) և պահպանել 90°C-ից ցածր ջերմաստիճան: Ցածր ջերմաստիճանները օգնում են պահպանել ջերմության նկատմամբ զգայուն միացությունները, ինչպիսիք են բետա-գլյուկանները արդյունահանման ժամանակ: Sonicate մոտ. 5-ից 10 րոպե UP400St-ն օգտագործելիս և 10-ից րոպե՝ UP200Ht-ն օգտագործելիս, համապատասխանաբար: Խնդրում ենք նկատի ունենալ, որ ջերմաստիճանը և արդյունահանման ժամանակը կարող են տարբեր լինել՝ կախված օգտագործվող ուլտրաձայնային հզորությունից: Անշուշտ, ավելի մեծ ծավալները կպահանջեն ավելի երկար ձայնագրման ժամանակներ:
- Զտեք ձայնագրված խառնուրդը ֆիլտր թղթի միջով կամ օգտագործեք վակուումային ֆիլտրման սարք՝ հեղուկը (պարունակող բետա-գլյուկաններ պարունակող) սնկի պինդ մնացորդից առանձնացնելու համար:
- Այնուհետև հեղուկից նստեցրեք բետա-գլյուկանները՝ ավելացնելով սպիրտ (օրինակ՝ էթանոլ): Որպես կանոն, տեղումների համար կարող եք օգտագործել 2-3 հատ ալկոհոլ:
- Դրանից հետո խառնուրդը մի քանի ժամ պահել սառնարանում, որպեսզի բետա-գլյուկանները նստեն:
- Տեղումներից հետո դուք կարող եք զգուշորեն թափել հեղուկը և հավաքել բետա-գլյուկանի նստվածքը:
- Ի վերջո, չորացրեք բետա-գլյուկանները ջեռոցում ցածր ջերմաստիճանում (օրինակ՝ 40-50°C), մինչև ամբողջ ալկոհոլը հեռացվի և ստացվի չոր փոշի:
Սնկերը ունեն իրենց բնութագրերի տատանումները: Հետևաբար, բետա-գլյուկանի արդյունահանման գործընթացը կարող է տարբերվել՝ ելնելով այնպիսի գործոններից, ինչպիսիք են սնկերի հատուկ տեսակները, սնկերի վիճակը (չոր կամ թարմ), մասնիկների չափը և արդյունահանման ջերմաստիճանը: Ձեր արդյունահանման ընթացակարգը օպտիմալացնելու համար փորձեք տարբեր պարամետրերով, ներառյալ պինդ-հեղուկ հարաբերակցությունը փոխելը, ջերմաստիճանը կարգավորելը, տարբեր լուծիչներ ուսումնասիրելը և տարբեր ձայնային տեւողությունների և ամպլիտուդային պարամետրերի փորձարկումը:
Բետա-գլյուկանի ուլտրաձայնային օգնությամբ ֆերմենտային արդյունահանում
Ուլտրաձայնային օգնությամբ ֆերմենտային արդյունահանումը մեթոդ է, որն օգտագործվում է սնկից բետա-գլյուկաններ հանելու համար՝ օգտագործելով ֆերմենտների և ուլտրաձայնային ալիքների համադրություն: Այս գործընթացը մեծացնում է արդյունահանման արդյունավետությունը՝ քայքայելով սնկերի բջիջների պատերը և հեշտացնելով բետա-գլյուկանների արտազատումը:
Սնկից բետա-գլյուկանի արդյունահանման ծավալների մեծացում
Երբ դուք ստեղծեք բետա-գլյուկանի արդյունահանման արձանագրություն, որը համապատասխանում է ձեր պահանջներին, արդյունահանման գործընթացի մեծացումը կարող է պարզ ջանքեր լինել:
Խմբաքանակի արդյունահանման մասշտաբի բարձրացում
Եթե դուք նախատեսում եք մեծացնել խմբաքանակի արդյունահանման մեթոդը, խորհուրդ ենք տալիս ավելացնել խմբաքանակի ծավալը՝ միաժամանակ պահպանելով պինդ-հեղուկ հարաբերակցությունը և մնացած բոլոր պարամետրերը: Եթե դուք շարունակում եք օգտագործել նույն ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորը, համոզվեք, որ համամասնորեն ավելացնեք ձայնային ախտահանման ժամանակը: 1 լիտրը գերազանցող խմբաքանակների համար կարող եք դիտարկել դանդաղ խառնիչի ներդրումը` մասնիկների կախոցը պահպանելու և արդյունահանման միատեսակությունը բարելավելու համար: Ստորև բերված պատկերը ցույց է տալիս 8 լիտրանոց խմբաքանակի արդյունահանման կարգավորումը, որն օգտագործում է UP400St ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորը լաբորատոր հարիչի հետ համատեղ:
Ներքին սնկի արդյունահանում
Նրանց համար, ովքեր հետաքրքրված են սնկից ավելի մեծ քանակությամբ բետա-գլյուկաններ արդյունահանելով, Hielscher Ultrasonics-ն առաջարկում է հոսքային բջջային ռեակտորներ, որոնք նախատեսված են բուսաբանական նյութերի արդյունահանման համար: Եթե դա վերաբերում է ձեզ, մենք խրախուսում ենք ձեզ ուղղակիորեն դիմել մեզ՝ լրացուցիչ տեղեկությունների համար: Մեր տեխնիկական թիմը ուրախ կլինի օգնել ձեր հատուկ կարիքների համար ամենահարմար կարգավորումը որոշելու հարցում: Այնուամենայնիվ, ձեր կոնկրետ սնկերի տեսակների հետ վերը նշված լաբորատոր մասշտաբի փորձի անցկացումը կարող է անգնահատելի լինել գործընթացի ճշգրիտ պահանջները հասկանալու համար: Ստորև բերված պատկերը ցույց է տալիս մեծ հոսքի բջջային ռեակտոր՝ UIP4000hdT ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորով բետա-գլյուկաններ արդյունահանելու համար ժամում մոտավորապես 50-200 լիտր սնկով լուծիչի լուծույթով:
Սնկի տեսակների էմպիրիկ բետա-գլյուկան կոնցենտրացիան
Ստորև դուք կգտնեք բետա-գլյուկանի էմպիրիկ կոնցենտրացիայի ցանկը, որը արդյունահանվել է տարբեր սնկերի տեսակներից:
Սնկի տեսակ | Ընդհանուր 1,3-1,6-β-D-գլյուկան (գ/100գ չոր զանգված) |
---|---|
Boletus pinophilus | 9,8% |
Suillus granulatus | 13,3% |
Craterellus cornucopioides | 4,5% |
Suillus variegatus | 13,7% |
Hydnum repandum | 4,1% |
Gyroporus cyanescens | 14,3% |
Tricholomopsis rutilans | 10,2% |
Agaricus bisporus (portobello) | 4% |
Agaricus bisporus (cremini) | 4% |
Auricularia auricular-judae | 16,8% |
1,3-1,6-β-D-գլյուկանի պարունակությունը վերլուծված վայրի աճող և մշակված սնկերում, Աղբյուր.Mirończuk-Chodakowska et al. (2017): 1,3-1,6-Β-D-գլյուկանի պարունակության քանակական գնահատումը ուտելի լեհական սնկերի վայրի աճող տեսակների մեջ: Rocz Panstw Zakl Hig 2017; 68 (3): 281-290.

SonoStation՝ շարժական բանտապահ համակարգ ուլտրաձայնային մշակման համար – բաղկացած է ուլտրաձայնային դիսպերսերներից, պոմպից, խառնիչից և բաքից

UIP4000hdT ուլտրաձայնային հոմոգենիզատոր ժամում մոտավորապես 50-ից 200 լիտր սնկով լուծիչի լուծույթ մշակելու համար
Սնկերի բետա-գլյուկանի էքստրակտի քանակականացում
Բետա-գլյուկանի կոնցենտրացիան արդյունահանումից հետո կարող է քանակական հաշվարկվել՝ օգտագործելով տարբեր մեթոդներ՝ կախված բետա-գլյուկանի տեսակից և վերլուծության հատուկ պահանջներից: Բետա-գլյուկանի կոնցենտրացիայի քանակականացման ընդհանուր մեթոդները թվարկված են ստորև: Իհարկե, մեթոդի ընտրությունը կախված է այնպիսի գործոններից, ինչպիսիք են պահանջվող ճշգրտությունը և առկա սարքավորումները:
-
Գրավիմետրիկ մեթոդ
- Սկզբունք. Այս մեթոդը հիմնված է էթանոլով բետա-գլյուկանների նստեցման վրա, որին հաջորդում է նստվածքի չորացումը և կշռումը:
- Ընթացակարգը. Նմուշը լուծվում է ջրի մեջ, մշակվում էթանոլով, որպեսզի նստեցվեն բետա-գլյուկանները, այնուհետև նստվածքը հավաքվում է, չորանում և կշռվում:
- Առավելությունները՝ պարզ և լայնորեն օգտագործվող:
- Սահմանափակումներ. այլ մեթոդների համեմատ ավելի քիչ ճշգրիտ:
-
Գունաչափական մեթոդներ
- Սկզբունք. Այս մեթոդները ներառում են գունային ռեակցիաներ հատուկ ռեակտիվների հետ, որոնք առաջացնում են գունային փոփոխություն՝ բետա-գլյուկանի կոնցենտրացիայի համեմատ:
-
Օրինակներ.
- Ֆենոլ-ծծմբաթթու մեթոդ. Այս մեթոդը ներառում է նմուշի մշակումը խտացված ծծմբաթթվով և ֆենոլով, ինչը լուծույթը դարձնում է նարնջագույն: Գույնի ինտենսիվությունը համաչափ է բետա-գլյուկանի համակենտրոնացմանը:
- Anthrone մեթոդ. Anthrone ռեագենտը փոխազդում է բետա-գլյուկանների հետ՝ առաջացնելով կապույտ-կանաչ գույն, և չափվում է գույնի ինտենսիվությունը:
- Առավելությունները. Զգայուն և հարմար է բարձր թողունակության վերլուծության համար:
- Սահմանափակումներ. այլ միացությունների միջամտություն և հատուկ ռեակտիվների անհրաժեշտություն:
-
Ֆերմենտային փորձարկումներ
- Սկզբունք. Ֆերմենտային անալիզները օգտագործում են այնպիսի ֆերմենտներ, ինչպիսիք են β-գլյուկանազը, բետա-գլյուկանները ավելի պարզ շաքարների բաժանելու համար, և արտազատվող շաքարները քանակականացվում են:
- Առավելությունները. Բարձր կոնկրետ և ճշգրիտ:
- Սահմանափակումներ. Պահանջում է մասնագիտացված սարքավորումներ և ռեակտիվներ:
-
Բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրություն (HPLC)
- Սկզբունք. HPLC-ն առանձնացնում և քանակականացնում է միացությունները՝ ելնելով դրանց փոխազդեցությունից քրոմատոգրաֆիկ սյունակի հետ:
- Ընթացակարգը. Բետա-գլյուկանները հիդրոլիզվում են մոնոսաքարիդների, և ստացված շաքարներն առանձնացվում և քանակականացվում են HPLC-ով:
- Առավելությունները. Բարձր ճշգրիտ և հարմար բարդ նմուշների համար:
- Սահմանափակումներ. Պահանջում է մասնագիտացված սարքավորումներ և փորձ:
-
Հատուկ իմունային անալիզներ
- Սկզբունք. Իմունային անալիզները օգտագործում են բետա-գլյուկաններին հատուկ հակամարմիններ՝ դրանց կոնցենտրացիան քանակականացնելու համար:
-
Օրինակներ.
- ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Այս մեթոդով ֆերմենտային կապակցված հակամարմինը գունային փոփոխություն է առաջացնում, երբ այն կապվում է բետա-գլյուկանների հետ:
- Կողային հոսքի վերլուծություններ. սրանք արագ թեստեր են, որոնք տեսանելի արդյունք են տալիս թեստային շերտի վրա:
- Առավելությունները. Բարձր առանձնահատկություն և զգայունություն:
- Սահմանափակումներ. պահանջում է հատուկ հակամարմիններ և կարող է ավելի թանկ լինել: