Ултразвукова подготовка на проби за анализ на THC

• Ултразвуковата екстракция е доказан метод за получаване на THC, но може да се използва и за аналитични цели.
• Ултразвуковата обработка е широко използван метод за подготовка на проби при анализ на общото съдържание на THC в продукти от канабис.
• Пробите се подлагат на ултразвукова екстракция преди анализ чрез TLC, GC и HPLC.

Ултразвукова екстракция на THC

THC, или тетрахидроканабинол (delta-9-tetrahydrocannabinol), е химичното вещество, което предизвиква повечето психологически ефекти на марихуаната. Известни са повече от 400 различни сорта канабис. В зависимост от конкретния сорт канабисът може да съдържа едва 0,3 wt% THC. При други сортове съдържанието на THC може да достигне до 20 wt%.
Различните продукти от канабис също се различават значително: средната концентрация на THC в марихуаната варира от 1 до 5%; в хашиша съдържанието на THC е от 5 до 15%, а в хашишовото масло е средно 20%. Съдържанието на THC в дозите марихуана за развлекателна употреба варира значително и колкото по-ниско е съдържанието на THC в марихуаната, толкова повече трябва да консумира потребителят, за да изпита желаните ефекти.

Прилагането на мощен ултразвук (известно също като ултразвукова обработка) е доказан подход за екстракция на активни съставки от растителен материал. THC, както и други активни компоненти като канабиноиди и терпени, могат да бъдат успешно извлечени чрез ултразвукова обработка. Щракнете тук, за да прочетете повече за ултразвуковата екстракция на канабис!

Ултразвуковата подготовка на проби се използва за анализ на съдържанието на THC

• за контрол на качеството на продукти с THC за развлекателна употреба,
• за определяне на качеството на фармацевтични продукти с THC,
• за разграничаване на конопа за наркотични цели от конопа за влакна.

За анализ на THC обикновено се използват следните хроматографски методи: тънкослойна хроматография (TLC), газова хроматография (GC) и високоефективна течна хроматография (HPLC)

Протокол за ултразвукова подготовка на проби за TLC анализ

Подготовка на пробите: За подготовката на пробите изсушеният растителен материал трябва да се мацерира и да се смели до хомогенен прах. За ултразвуковата екстракция във флакон се смесват 500mg прах от растението канабис и 5mL смес от метанол и хлороформ (съотношение 9 : 1). Ултразвуковата обработка може да се извърши с ултразвуков апарат с микронакрайник, с VialTweeter или с ултразвуковия CupHorn. Времето за ултразвукова обработка е приблизително 5 min. След това оставете пробата в покой за поне 5 min. Разредете бистрия супернатант с екстракционната смес (v/v: 1 : 10). Свободен THC: 1μL върху TLC плаката
Декарбоксилиране: 100μL от екстракта се изпаряват до сухо. Остатъкът се нагрява при 180℃ за 4 min. Добавете 500μL смес от метанол и хлороформ (v/v 9 : 1). Обработвайте с ултразвук за 5 min. Разредете бистрия супернатант с екстракционната смес (v/v: 1 : 10).
Калибриране: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
Силикагел за TLC F-254, Merck 5729
TLC скенер II, софтуер CATS3, Camag Muttenz Елуент:
Етилацетат : Толуен : Хлороформ = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Постхроматографска дериватизация: сол Fast Blue 0,1% в 0,1 M NaOH
Денситометрия при 550 nm

Протокол за ултразвукова подготовка на проби за GC анализ

Подготовка на пробите: Изсушеният растителен материал се мацерира и се смила до хомогенен прах. За екстракцията във флакон се смесват 500mg прах от растението канабис и 10mL смес от метанол и хексан (съотношение 9 : 1). Ултразвуковата обработка може да се извърши с ултразвуков апарат със сонда с микронакрайник, с VialTweeter или с ултразвуковия CupHorn. Обработвайте пробата с ултразвук за 15–20 min. Разклатете пробата и я оставете в покой за поне 5 min. Разредете бистрия супернатант с екстракционната смес (v/v 1: 20).
Декарбоксилиране: във вложката
Температура на инжектора 250℃
Калибриране: от 5 ng/μL до 250 ng/μL
GC: HP 6890 с 5973 MSD и автоматичен пробовземач 7683 инжектиране: 1μL, време без разделяне на потока: 2 min.
Колона: HP-5 MS, 30m, диаметър 250 μm, дебелина на филма 0,25 μm
Газ носител: He, 35 psi, постоянен дебит: 4 mL/min.
Пещ: 100℃ за 1min.; повишаване на температурата с 15℃ /min. до 280℃; 280℃ за 5 min. MSD: СКАНИРАНЕ: m/e 35 – 550

Протокол за ултразвукова подготовка на проби за HPLC анализ

Подготовка на пробите (аналогично на подготовката за GC): Изсушеният растителен материал се мацерира и се смила до хомогенен прах. За екстракцията във флакон се смесват 500mg прах от растението канабис и 10mL смес от метанол и хексан (съотношение 9 : 1). Ултразвуковата обработка може да се извърши с ултразвуков апарат със сонда с микронакрайник, с VialTweeter или с ултразвуковия CupHorn. Обработвайте пробата с ултразвук за 15–20 min. Разклатете пробата и я оставете в покой за поне 5 min. Разредете бистрия супернатант с екстракционната смес (v/v 1: 20).

HPLC-DAD: разделителен модул Waters 2695 / 2996 PAD инжектиране: 10μL
Предколона: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Колона: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Елуент: изократен режим 36% TEAP 25 mmol/L, 64% ацетонитрил количествено определяне при 210nm
Калибриране: 0,001 – 0,10 μg/μL
Калибриране: 0,01 – 0,50 μg/μL
Време на задържане: за CBD: 6,2 min.; за CBN: 8,0 min.; за THC: 9,4 min.; за THC-A: 11,0 min
Граница на откриване (LOD): CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%

VialTweeter е уникална ултразвукова система за едновременна обработка на до 10 флакона при напълно еднакви условия без кръстосано замърсяване.