THC analizi üçün nümunələrin ultrasəslə hazırlanması
- Ultrasəs ekstraksiyası THC istehsalı üçün sınaqdan çıxmış üsuldur, lakin analitik məqsədlər üçün də istifadə oluna bilər.
- Ultrasəslə emal kannabis məhsullarında THC-nin ümumi miqdarının analizi üçün istifadə olunan geniş yayılmış nümunə hazırlama üsuludur.
- TLC, GC və HPLC analizindən əvvəl nümunələrə ultrasəs ekstraksiyası tətbiq edilir.
THC-nin ultrasəslə ekstraksiyası
THC, yaxud tetrahidrokannabinol (delta-9-tetrahidrokannabinol), marixuananın psixoloji təsirlərinin əksəriyyətinə səbəb olan kimyəvi maddədir. Kannabis növünün 400-dən çox müxtəlif ştamı məlumdur. Konkret kannabis ştamından asılı olaraq, kannabisdə THC miqdarı cəmi 0,3 wt% ola bilər. Digər ştamlarda THC miqdarı 20 wt%-ə qədər çata bilər.
Müxtəlif kannabis məhsulları da əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənir: marixuanada THC-nin orta konsentrasiyası 1–5% arasında dəyişir; həşişdə THC miqdarı 5–15% arasındadır, həşiş yağında isə orta hesabla 20% təşkil edir. Marixuananın rekreasiya məqsədilə istifadə olunan dozalarında THC miqdarı çox dəyişkəndir və marixuanada THC miqdarı nə qədər aşağı olarsa, arzu olunan təsirləri hiss etmək üçün istifadəçi bir o qədər çox istehlak etməlidir.
Nümunələrin ultrasəslə hazırlanması THC miqdarının aşağıdakı məqsədlərlə təhlili üçün istifadə olunur
- rekreasiya məqsədli THC məhsullarının keyfiyyətinə nəzarət üçün,
- əczaçılıq THC məhsullarının keyfiyyətinin müəyyən edilməsi üçün,
- narkotik məqsədli çətənə ilə lif istehsalı üçün çətənənin fərqləndirilməsi üçün.
THC analizi üçün adətən aşağıdakı xromatoqrafik üsullardan istifadə olunur: nazik təbəqəli xromatoqrafiya (TLC), qaz xromatoqrafiyası (GC) və yüksək effektivlikli maye xromatoqrafiyası (HPLC)
TLC analizi üçün nümunələrin ultrasəslə hazırlanması protokolu
Nümunələrin hazırlanması: nümunələrin hazırlanması üçün qurudulmuş bitki materialı maserasiya edilməli və üyüdülərək homogen toz halına gətirilməlidir. Ultrasəs ekstraksiyası üçün 500mg kannabis bitkisi tozu və 5mL metanol-xloroform qarışığı (9 : 1 nisbətində) flakonda qarışdırılır. Ultrasəslə emal üçün mikro uclu ultrasəs homogenizatorundan , VialTweeter və ya ultrasəs CupHorn cihazından istifadə oluna bilər. Ultrasəslə emal müddəti təxminən 5 min. təşkil edir. Bundan sonra nümunəni ən azı 5 min. dincə qoyun. Şəffaf supernatantı ekstraksiya qarışığı ilə durulaşdırın (v/v: 1 : 10). Sərbəst THC: TLC lövhəsinə 1μL
Dekarboksilləşmə: ekstraktın 100μL-i quruyana qədər buxarlandırılır. Qalıq 180℃ temperaturda 4 min. qızdırılır. 500μL metanol-xloroform (v/v 9 : 1) əlavə edin. 5 min. ultrasəslə emal edin. Şəffaf supernatantı ekstraksiya qarışığı ilə durulaşdırın (v/v: 1 : 10).
Kalibrləmə: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silikageli F-254, Merck 5729
TLC skaneri II, CATS3 proqram təminatı, Camag Muttenz Elüent:
Etilasetat : Toluol : Xloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Xromatoqrafiyadan sonrakı derivatlaşdırma: 0,1 M NaOH məhlulunda 0,1% Fast Blue duzu
550 nm-də densitometriya
Analiz və ekstraksiya üçün tetrahidrokannabinol (Δ9-THC)
GC analizi üçün nümunələrin ultrasəslə hazırlanması protokolu
Nümunələrin hazırlanması: qurudulmuş bitki materialı maserasiya edilir və üyüdülərək homogen toz halına gətirilir. Ekstraksiya üçün 500mg kannabis bitkisi tozu və 10mL metanol-heksan qarışığı (9 : 1 nisbətində) flakonda qarışdırılır. Ultrasəslə emal üçün mikro uclu zond tipli ultrasəs cihazından , VialTweeter və ya ultrasəs CupHorn cihazından istifadə oluna bilər. Nümunəni 15–20 min. ultrasəslə emal edin. Nümunəni çalxalayın və ən azı 5 min. dincə qoyun. Şəffaf supernatantı ekstraksiya qarışığı ilə durulaşdırın (v/v 1: 20).
Dekarboksilləşmə: içlikdə
İnjektorun temperaturu 250℃
Kalibrləmə: 5 ng/μL-dən 250 ng/μL-ə qədər
GC: 5973 MSD və 7683 avtomatik nümunəötürücü ilə HP 6890; inyeksiya: 1μL, axının bölünmədiyi müddət: 2 min.
Kolon: HP-5 MS, 30m, diametr 250 μm, təbəqənin qalınlığı 0,25 μm
Daşıyıcı qaz: He, 35 psi, sabit axın sürəti: 4 mL/min.
Soba: 100℃ temperaturda 1min.; temperaturun 15℃ /min. sürətlə 280℃-yə qədər artırılması; 280℃ temperaturda 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
HPLC analizi üçün nümunələrin ultrasəslə hazırlanması protokolu
Nümunələrin hazırlanması (GC üçün hazırlamaya analoji olaraq): qurudulmuş bitki materialı maserasiya edilir və üyüdülərək homogen toz halına gətirilir. Ekstraksiya üçün 500mg kannabis bitkisi tozu və 10mL metanol-heksan qarışığı (9 : 1 nisbətində) flakonda qarışdırılır. Ultrasəslə emal üçün mikro uclu zond tipli ultrasəs homogenizatorundan , VialTweeter və ya ultrasəs CupHorn cihazından istifadə oluna bilər. Nümunəni 15–20 min. ultrasəslə emal edin. Nümunəni çalxalayın və ən azı 5 min. dincə qoyun. Şəffaf supernatantı ekstraksiya qarışığı ilə durulaşdırın (v/v 1: 20).
VialTweeter nümunələrin ultrasəslə hazırlanması üçün
Ön kolon: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Kolon: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Elüent: izokratik 36% TEAP 25 mmol/L, 64% asetonitril; 210nm-də miqdari təyin
Kalibrləmə: 0,001 – 0,10 μg/μL
Kalibrləmə: 0,01 – 0,50 μg/μL
Saxlanma müddəti: CBD üçün: 6,2 min.; CBN üçün: 8,0 min.; THC üçün: 9,4 min.; THC-A üçün: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St ilə nümunələrin mikro ucluq vasitəsilə ultrasəslə emalı
Ədəbiyyat/İstinadlar
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): THC tərkibli çətənə otunun məhkəmə-kimyəvi analizləri. Nazik təbəqəli xromatoqrafiyadan qaz xromatoqrafiyası vasitəsilə HPLC üsuluna. Applica 2006.
Bilməyə dəyər faktlar
Marixuana dişi Cannabis bitkisinin qurudulmuş çiçəklərindən, onların altındakı yarpaqlardan və gövdələrdən ibarətdir. Bu, ən geniş istehlak olunan formadır və tərkibində təxminən 3% ilə 20% arasında THC olur. Marixuananın intensiv seleksiya ilə əldə edilmiş xüsusi formalarında THC miqdarı 30% həddini aşır. Marixuana THC tərkibli kannabis məhsullarının bütün digər növləri üçün ilkin xammaldır. Ən çox rast gəlinən kannabinoidi, tetrahidrokannabinol turşusunu (THCA), psixoaktiv THC-yə çevirmək üçün dekarboksilləşmə prosesi başladılmalıdır. Buna görə də dekarboksilləşməyə səbəb olmaq üçün kannabis və onun ekstraktları qızdırılmalı və ya susuzlaşdırılmalıdır.
Kif kannabis yarpaqlarından və çiçəklərindən ələnərək ayrılan, trixomlarla zəngin tozu ifadə edir. O, ya toz şəklində istehlak olunur, ya da sıxılaraq həşiş briketlərində istifadə edilir.
Həşiş yaxud haş, sıxılmış kifdən və ya bitkinin səthindən qaşınaraq toplanıb kürəciklər halına salınan qatrandan hazırlanan qatılaşdırılmış qatran briketi və ya kürəsidir. Saflığından və mənbəyindən asılı olaraq, qaradan qızılı-qəhvəyiyə qədər müxtəlif rənglərdə olur. O, ağızdan qəbul edilə və ya tüstüsü çəkilə bilər, məsələn, qəlyanda, nargilədə, bonqda, bubblerdə, vaporizatorda, isti bıçaqdan istifadə etməklə, siqaret şəklində, kannabis çiçək qönçələri və ya tütünlə qarışdırılaraq, şüşədə toplanmış tüstünü çəkməklə; yaxud qidaya qatılan inqrediyent kimi istifadə oluna bilər.
Kannabis tinkturası kannabinoidlərin spirtdəki ekstraktını ifadə edir. Tinktura hazırlamaq üçün kannabinoidlər yüksək spirt tərkibli içkilərdən (əsasən taxıl spirtindən) istifadə edilməklə kannabis bitkisindən ekstraksiya edilir.
Həşiş yağı həlledici ilə ekstraksiya yolu ilə istehsal olunan və bərkimiş və ya özlü kütlə halına gətirilən kannabinoidlərin qatranlı matrisidir. Həşiş yağı psixoaktiv birləşmənin yüksək miqdarına görə ən güclü kannabis məhsullarından biridir. Butan və superkritik karbon dioksid ilə ekstraksiya edilmiş həşiş yağının istifadəsi son vaxtlar getdikcə daha çox yayılmışdır.
Dəmləmələr kannabis dəmləməsi hazırlamaq üçün istifadə oluna bilən çoxsaylı müxtəlif uçucu olmayan həlledicilərə görə bir-birindən fərqlənən kannabis dəmləmələrinin müxtəlif növlərini ifadə edir. Belə dəmləmə hazırlamaq üçün kannabis bitki materialı həlledici ilə qarışdırılır, sonra isə yağların bitkidən həllediciyə keçməsi üçün preslənir və süzülür. Kakao yağı, kərə yağı, yemək yağı, qliserin və dəri nəmləndiriciləri geniş istifadə olunan həlledicilərdir.
Tibbi marixuana Cannabis bitkisinin həkim tərəfindən tövsiyə olunan bitki mənşəli müalicə vasitəsi kimi istifadəsini, eləcə də sintetik THC və kannabinoidlərin istifadəsini ifadə edir. Bu istifadə adətən resept tələb edir və paylanma, bir qayda olaraq, yerli qanunlarla müəyyən edilmiş çərçivədə həyata keçirilir. Bir sıra tədqiqatlar göstərmişdir ki, kannabisin və ya onun törəmələrinin istifadəsi, məsələn, kimyaterapiyanın səbəb olduğu ürəkbulanma və qusmaya, neyropatik ağrıya və dağınıq skleroza qarşı təsir göstərir.